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我国分离的两株病毒为重组甲病毒
目的明确我国分离的XJ-90260和XJ-91006病毒的分类地位、种系发生和遗传型。方法 特异引物逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）扩增两株病毒的NSP4、E1基因区和3′端非编码区，测序，进行核苷酸序列同源性比较和3′端非编码区核苷酸序列分析，并结合同属其他病毒这些基因区的核苷酸序列进行种系进化分析。结果 两株病毒的核苷酸序列同源性为100％，与西方马脑炎病毒的核种酸序列同源性高，具有西方马脑炎病毒3′端非编码区结构特征，其NSP4基因区与东方马脑炎病毒同源，E1基因区与辛德毕斯病毒同源，两株病毒均位于西方马脑炎病毒B组，与西方马脑炎病毒俄罗斯分离株进化关系近。结论 我国分离的XJ-90260和91006病毒属于西方马脑炎病毒同一遗传型，均为重组甲病毒。
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海南岛两株甲病毒基因组3＇末端核苷酸序列的克隆与分析
目的 从分子水平鉴定海南省分离的两株甲病毒(HBb17和M1病毒)。方法 采用RT-PCR方法 ，分别扩增两株病毒基因组的3＇末端核苷酸序列，扩增产物经亚克隆，筛选重组子并测定核苷酸序列对序列进行分析。结果 HBb17和M1病毒分别扩增出约1.6kb和1.3kb的特异片段。序列分析表明，在3＇末端非翻译区HBb17病毒与罗斯河病毒(国际标准株T48病毒)核苷酸同源性为99％，M1病毒与鹭山病毒(SAG)同源性为98％；两病毒结构基因的E1区序列，HBb17病毒与罗斯河病毒核苷酸(氨基酸)同源性为99％(99％)，M1病毒与鹭山病毒核苷酸(氨基酸)同源性为97％(99％)，M1病毒与盖塔病毒同源性为94％(98％)。结论 序列分析表明，海南岛分离的HBb17病毒属于罗斯河病毒，M1病毒可能是鹭山病毒或盖塔病毒的变异株。
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复制型DNA疫苗的研究进展
复制型DNA疫苗是基于常规DNA疫苗和RNA复制子疫苗的基础上发展起来的一种新型疫苗,既具有稳定性好、安全性高的优点,又实现了外源基因的高效表达.本文就复制型DNA疫苗的构建、作用机制、优点以及新的研究进展作一简要综述.
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生物防御用DNA疫苗
近年的生物防御疫苗研究集中于DNA疫苗.DNA疫苗对人以及环境相对安全、经济,并且多价联合DNA疫苗还可以提供多重保护,因此有良好的研发前景和潜在的实用价值,但也存在免疫原性不强和接种方式有待改进等问题.此文就炭疽杆菌、埃博拉病毒、马尔堡病毒、猴痘病毒、天花病毒和委内瑞拉马脑炎病毒等几种被美国NIH和CDC列为重要生物战剂的DNA疫苗研发现状作一综述.
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在我国北方涉县首次检测到盖塔病毒
目的:确定从河北省涉县蚊体中分离到的病毒种类.方法:采集三带喙库蚊标本,液氮运输和保存,10只为一组研磨后接种C6/36细胞分离病毒.病毒株分别采用乙醚试验、免疫荧光试验和分子生物学试验进行毒株鉴定.结果:采集到蚊标本1290只,标本处理后接种细胞47批,病毒分离结果得到13株阳性分离物(毒株),经乙醚试验和免疫荧光试验初步鉴定HB0215-3和HB0234两株病毒为披膜病毒科甲病毒属成员,再经RT-PCR、核酸序列测定和分析,证实两株病毒核酸与国际基因库中的AY702913和NC-006558盖塔病毒同源性高,被进一步鉴定为盖塔病毒.结论I该研究从河北省涉县三带喙库蚊中分离到了盖塔病毒,这是我国内陆地区北方首次分离到.
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实时荧光PCR检测基孔肯雅病毒方法的建立及初步应用
目的 建立基孔肯雅病毒的荧光定量PCR检测方法.方法 针对基孔肯雅病毒的基因序列,设计、合成引物、探针及反应体系,摸索出佳反应条件,建立TaqMan荧光探针法和SYBR荧光染料法.利用建立的方法对30例基孔肯雅热病标本和10份基孔肯雅病毒保存液进行扩增、检测和结果分析,并与常规RT - PCR方法的检测结果进行比对.结果 实时荧光定量PCR法比常规RT - PCR法快速、灵敏.40份标本TaqMan荧光探针法、SYBR荧光染料法和常规RT - PCR方法的阳性率分别为:17.5％、17.5％、15％.统计分析表明,3种方法差异不具有统计学意义.结论 实时荧光定量PCR方法快速且具有较好的特异性、敏感性、重复性,适用于基孔肯雅病毒的快速检验.
