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RNA干扰技术新进展
20世纪90年代初,科学家在矮牵牛花中导入与花青素合成有关的查尔酮合成酶基因,原以为转基冈的牵牛花会变得更鲜艳,结果却发现一些花反而变成白色,这种现象引起人们的高度关注,之后的研究将这种过度表达内源基因而引发的基因沉默称为共阻遏.
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小鼠模型与人类疾病(续)
小鼠基因组的控制改造:基因敲除 由于建立小鼠疾病模型的能力在技术开发方面有了很大的进展,使我们能够向内源基因引入特定的突变,并通过小鼠的生殖系传递下去[2,32]。所需变异首先通过同源重组,引入胚胎干细胞(embryonic stem cell,ES),然后将ES细胞注射到胚囊中。ES细胞在注入胚囊后可形成各种细胞谱系。几乎所有的变异都可引入小鼠基因,包括将基因功能全部去除的全突变(null),或其他点突变。此还可造成复杂的染色体重组如大区域缺失、转位及倒位[33-38]。一旦某个人类疾病基因被克隆得到,很容易组建一个在相应基因中有相同突变的小鼠。这样组建的许多小鼠,它们与病人的表型虽然未必完全一样,但非常相似。这些小鼠即可作为人类疾病很好的模型。
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RNAi抑制内源性基因表达在肝脏疾病研究中的应用
RNA干扰(RNA interference, RNAi ),即用核苷酸组成的短的双链RNA(dsRNA)代替传统反义核酸进行转录后基因沉默(post-transcriptional gene silencing PTGS ).
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siRNA抑制小胶质细胞上TLR4的表达
应用siRNA转染体外培养的原代大鼠大脑皮质和海马神经元,干扰外源导人基因或内源基因的表达已取得成功.我们设计了4条大鼠小胶质细胞Toll样受体4(TLR4)的siRNA,对比研究基因干扰对小胶质细胞上的TLR4基因表达和蚩白水平的影响.