首页 > 文献资料
-
CD133+结直肠癌SW480细胞系克隆亚系的建立
目的 建立CD133+结直肠癌SW480细胞系克隆亚系.方法 通过有限稀释法进行单细胞克隆培养,从结直肠癌SW480细胞系48个单细胞孔中培养出8个单细胞源性细胞亚系(编号Y1～8).对所建立的细胞亚系进行RT-PCR、流式细胞分析及免疫细胞化学筛选CD133+的细胞亚系(Y6、Y2);并通过MTT法体外增殖实验、划痕实验、体外运动实验和皮下成瘤实验,比较CD133+之间及与CD133-单细胞源性细胞亚系的生物学特性.结果 筛选出CD133+单细胞源性细胞亚系2个(Y2、Y6),CD133-单细胞源性克隆6个(Y1、Y3、Y4、Y5、Y7、Y8).结论 通过单细胞克隆培养建立CD133+结直肠癌SW480细胞亚系,为下一步结直肠癌转移机制研究提供相关的单细胞源性细胞亚系.
-
高侵袭转移Lovo细胞亚系的建立及其生物学特性的研究
目的：建立高侵袭Lovo细胞亚系以及研究其生物学特性。方法：应用裸鼠体内连续传代法，筛选并建立高侵袭Lovo细胞亚系，并测量Lovo亚系电泳泳动速率、细胞周期和DNA含量。结果：Lovo亚系细胞电泳泳动速率明显高于其母系Lovo细胞；其增殖周期(S+G2M)百分率为57.4％，高于其母系Lovo细胞的41.7％，且其DNA含量也远高于其母系细胞。结论：Lovo亚系细胞比Lovo母系细胞具有更高侵袭力和更快的增殖能力。
-
北京中国农大小型猪三个亚系群体的遗传状况分析
目的：对北京地区中国农大小型猪三个亚系群体进行遗传质量评价与分析。方法利用DB11／T828.3－2011中的25对微卫星引物，对3个中国农大小型猪亚系群体进行微卫星分型，利用群体遗传分析软件Popgen32对所得结果进行处理分析。结果农大I系、农大II系和农大III系小型猪群体分别得到130、122和138个等位基因，平均杂合度分别为0.6759、0.5967、0.6779，平均多态信息含量（ PIC）分别为0.6344、0.5540、0.6403；农大II系和农大III系的遗传距离为0.4251，农大I系与农大II系的遗传距离为0.2084。结论三个亚系中，农大II系和农大III系小型猪均具有较好的遗传多样性和稳定性，符合封闭群动物的群体遗传特征。
-
C57BL/6J亚系Nnt部分功能基因丢失的检测
目的 介绍一种判定C57BL/6小鼠亚系中烟酰胺核苷酸转氢酶(Nnt)基因是否丢失的PCR检测方法.方法 用PCR方法分别对5只购自杰克逊的C57BL/6J小鼠以及10只本公司C57BL/6背景的转基因小鼠基因组DNA进行扩增,对扩增产物进行分析.结果 从杰克逊实验室购得的5只C57BL/6J小鼠基因组以及本公司抽取的3只C57BL/6小鼠Nnt部分功能基因丢失,本公司C57BL/6中有6只小鼠含有Nnt基因未丢失,另外还有1只小鼠为Nnt基因杂合小鼠.结论 在选择C57BL/6作为代谢性实验的模型时,应考虑选择适当的亚系.
-
高侵袭力人膀胱癌细胞亚系的建立及鉴定
目的 建立人膀胱癌细胞BIU-87的高侵袭力亚系,并对侵袭过程进行观察.方法 通过构建侵袭小室,以穿透人工基底膜、聚碳酸脂膜能力为依据筛选具有体外高侵袭能力的膀胱癌细胞亚系.运用扫描电镜观察细胞侵袭的过程,通过生长曲线、细胞周期、体外侵袭力对母代与子代细胞体外增殖及侵袭能力进行对比.结果 通过扫描电镜观察到了细胞的侵装运动.筛选后的各子代细胞,经16代以上传代后,细胞形态与母代无明显变化,细胞增殖速度较母代有明显加快(P＜0.05),体外侵袭能力较母系明显提高(P＜0.01).结论 运用改良的侵袭实验筛选膀胱癌细胞系的高侵袭力亚系的方法是可靠的,建立的高侵袭力亚系细胞为今后对膀胱癌侵袭及转移的研究提供了较为可靠的细胞模型.
-
高侵袭力人膀胱癌细胞亚系的分离鉴定
目的 建立BIU-87、EJ和T24 3株膀胱癌细胞的高侵袭力亚系,并对侵袭过程进行观察.方法 通过构建侵袭小室,以穿透人工基底膜、聚碳酸脂膜能力为依据筛选具有体外高侵袭能力的膀胱癌细胞亚系.运用扫描电镜观察细胞侵袭的过程,通过生长曲线、细胞周期、体外侵袭力对母代与子代细胞体外增殖及侵袭能力进行对比.通过裸鼠膀胱灌注不同侵袭力的肿瘤细胞,对侵袭力与种植转移的关系进行初步研究.结果 通过扫描电镜观察到了细胞的侵袭运动.筛选后的各子代细胞,经16代以上传代后,细胞形态与母代无明显变化,细胞增殖速度较母代有明显加快(P<0.05),体外侵袭能力较母系明显提高(P<0.001).结论 运用改良的侵袭实验筛选膀胱癌细胞系的高侵袭力亚系的方法是可靠的,建立的高侵袭力亚系细胞为今后对膀胱癌侵袭及转移的研究提供了较为可靠的细胞模型.
-
B型流感亚系单碱基延伸终止荧光偏振快速检测的研究
目的 建立一种利用单碱基延伸终止结合荧光偏振技术(Fluorescence polarization,FP)快速检测B型流感By(B/Yamagata)和By(B/Victoria)亚系的新方法. 方法 从GenBank下载By和Bv血凝素(HA)基因各50条序列,通过MEGA软件进行分析,利用Primer Premier 5.0设计B型流感病毒亚系特异性引物和单标记延伸引物,建立单碱基延伸终止法与荧光偏振检测方法. 结果 40株By和40株By病毒用单碱基延伸终止法与荧光偏振检测,与传统的基因测序结果一致性达100％. 结论 本方法操作简便、敏感性及特异性高、判读结果直观明确、检测费用低,适合于流感监测实验室对流感病毒的快速分子诊断.
-
高侵袭力人膀胱癌细胞亚系的获得及生物学特性的观察
目的 建立人膀胱癌细胞BIU-87的高侵袭力亚系,并对侵袭过程进行观察.方法 通过构建侵袭小室,以穿透人工基底膜、聚碳酸脂膜能力为依据筛选具有体外高侵袭能力的膀胱癌细胞亚系.运用扫描电镜观察细胞侵袭的过程,通过生长曲线、细胞周期、体外侵袭力对母代与子代细胞体外增殖及侵袭能力进行对比.结果 通过扫描电镜观察到了细胞的侵袭运动.筛选后的各子代细胞,经16代以上传代后,细胞形态与母代无明显变化,细胞增殖速度较母代有明显加快(P＜0.05),体外侵袭能力较母系明显提高(P＜0.001).结论 运用改良的侵袭实验筛选膀胱癌细胞系的高侵袭力亚系的方法是可靠的,建立的高侵袭力亚系细胞为今后对膀胱癌侵袭及转移的研究提供了较为可靠的细胞模型.
