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二甲苯对妊娠小鼠及胚胎发育的毒性作用
目的探讨二甲苯对妊娠小鼠及胚胎发育的影响.方法对妊娠初期的雌性小鼠采用静式吸入染毒法进行二甲苯染毒,观察胎鼠体重变化;原子吸收分光光度测定法(atomic absorption spectroscopy,AAS)检测妊娠母鼠血清Fe2+、Mg2+含量;单细胞凝胶电泳法(single cell gel electrophoresis,SCGE)检测妊娠母鼠外周血有核细胞DNA损伤程度.结果染毒各组妊娠母鼠血清Fe2+、Mg2+含量下降(P＜0.01,P＜0.05),并具有统计学意义;染毒组妊娠母鼠外周血有核细胞发生DNA断裂并形成彗尾图像;染毒各组胎鼠体重较正常组相比均显著下降,且存在显著性差异(P＜0.05);部分胎鼠表现为胚胎被吸收、脑膜脑膨出、椎骨发育不全等.结论二甲苯可造成妊娠母鼠血清Fe2+、Mg2+含量下降、外周血有核细胞DNA损伤并致使流产发生;二甲苯引起胎鼠体重下降,并影响生长发育.
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单细胞凝胶电泳法分析指标及检测DNA交联的标准断裂剂的研究
目的 寻求单细胞凝胶电泳计算机成像与分析系统中的有效分析指标,为H2O2在1 ℃条件下作为检测DNA交联的标准DNA断裂剂提供依据. 方法 常规培养Vero细胞,消化后悬浮在PBS中,H2O2 染毒,分别在37 ℃和1 ℃条件下孵育1 h,常规单细胞凝胶电泳,专用软件分析其图像. 结果 H2O2的染毒浓度在2 500 μmol/L以下时,尾长、尾面积、尾矩和尾积分等指标均有剂量-效应关系(T=37 ℃时,r分别为0.680,0.725,0.796,0.798;T=1 ℃时, r分别为0.685,0.717,0.622,0.714,P均＜0.01).在H2O2浓度较高的另一实验中,当H2O2为2～7 μmol/L时,仅尾矩和尾积分间存在这种关系;H2O2 各剂量(20、100、500、2 500 μmol/L)在37 ℃时对DNA的损伤程度均明显高于1 ℃时. 两种条件下上述4个指标都存在剂量-效应关系. 结论由该系统得到的尾矩和尾积分所反映的DNA损伤信息更准确、更全面、适用范围更广,但尾长可用作较初步的研究;H 2O2在1 ℃条件下可以作为检测DNA交联的标准DNA断裂剂.
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光气致小鼠肺脏细胞DNA损伤和凋亡
目的研究光气致BALB/c小鼠肺水肿模型的肺脏的DNA损伤和凋亡.方法26只二级BALB/C小鼠,雄性,随机分为正常对照组和染毒组,各13只.正常对照组小鼠给予空气,染毒组小鼠给予11.9mg/L剂量的光气,时间均为5 min,染毒后4 h,比较2组小鼠肺脏的湿于比、病理学变化,单细胞凝胶电泳测定2组肺Ⅱ型细胞DNA损伤情况及对小鼠肺脏进行DNA琼脂糖凝胶电泳.结果11.9 mg/L的光气染毒5 min,小鼠肺脏湿干比(6.42±1.00)比正常对照组(4.25±0.47)显著增加(P＜0.05);光镜下观察肺组织可见肺水肿发生;单细胞凝胶电泳法测定染毒组肺Ⅱ型细胞的尾长、尾部DNA、尾距均显著高于正常对照组(P＜0.001);DNA琼脂糖凝胶电泳出现DNA梯状样改变.结论光气染毒可造成小鼠肺水肿,引起肺Ⅱ型细胞发生DNA损伤和肺脏细胞凋亡.
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中药薏苡仁酯作用喉癌Hep-2细胞的体外研究
目的研究中药薏苡仁酯对喉癌Hep-2细胞的增殖抑制作用及机制.方法应用MTT法测定不同浓度的薏苡仁酯对Hep-2细胞增殖抑制情况;应用单细胞凝胶电泳法,检测薏苡仁酯引起Hep-2细胞的DNA损伤情况.结果 5μl/ml～40μl/ml的薏苡仁酯作用48h后明显抑制Hep-2细胞的增殖作用(P＜0.01);5μl/ml和10μl/ml的薏苡仁酯作用48h后引起Hep-2细胞DNA损伤(P＜0.01).结论在体外培养的条件下中药薏苡仁酯能明显抑制Hep-2细胞的增殖,其机制与DNA的损伤作用有关.
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冰冻对精子DNA的影响
目的: 探讨冰冻是否引起精子DNA损伤. 方法: 采用改进后的单细胞凝胶电泳法(SCGE)对-80 ℃条件下保存不同时间的精子DNA进行分析. 结果: 以DNA头部百分比为检测参数,方差分析显示,对于时间因素,P＞0.05,无统计学差异. 结论: 冰冻不引起精子DNA损伤.
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护士职业接触抗癌药对外周淋巴细胞DNA损伤
中国医学科学院肿瘤医院护理部开展了"护士职业接触抗癌药对外周淋巴细胞DNA损伤”课题的研究,发现长期职业接触抗癌药可损伤淋巴细胞的DNA.薛岚副主任等以24名工龄为6至9年的化疗科护士为对象,以10名没有接触抗肿瘤药物的女学生和5名肿瘤化疗女病人为对照组,用单细胞凝胶电泳法分别测定3组人血中淋巴细胞DNA有无损伤及损伤程度.
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HBV感染者外周血淋巴细胞DNA损伤的监测
[目的] 对HBV感染者外周血淋巴细胞DNA损伤进行监测. [方法] 采用单细胞凝胶电泳法,在荧光显微镜下观察淋巴细胞损伤情况. [结果] 56名HBV感染者外周血淋巴细胞DNA损伤率为24.1%,其中急性感染者为28.5%,慢性感染者损伤率为22.5%,携带者损伤率为18.6% (P<0.001);82名健康者的损伤率为10.3% (与感染者比较P<0.001). [结论] HBV感染可以造成外周血淋巴细胞DNA损伤,且不同感染模式的损伤情况不同.该法可作为HBV转归与药物疗效评价的可靠依据.
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对单细胞凝胶电泳法检测细胞核DNA损伤的影响因素
目的:探讨对单细胞凝胶电泳法(SCGE)检测细胞核DNA损伤的影响因素.方法:结合一氧化氮对食管癌细胞系EC109细胞核DNA的损伤作用模型,对SCGE实验中的影响因素等进行分析讨论和综合评价.结果:受试物的浓度及其对细胞的作用时间、细胞周期等是SCGE实验中的主要影响因素.结论:SCGE中的一些因素对实验结果有显著影响.
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不同浓度的一氧化氮对食管癌细胞核DNA的损伤作用
目的: 研究不同浓度的一氧化氮(nitric oxide,NO)对食管癌细胞核DNA损伤作用的特征性规律.方法: 以硝普钠(sodium nitroprusside,SNP)作为NO的体外供体,以食营癌细胞系EC109作为细胞模型,采用单细胞凝胶电泳法检测不同浓度的SNP作用一定时间后,食管癌细胞核DNA被损伤的情况.结果:无论SNP的作用时间是8 h,还是16 h,彗星状细胞核所占的百分率均越来越高,经χ2检验差异有显著性意义(P＜0.01).曲线回归分析结果表明,食管癌细胞彗星状细胞核生成的百分率与SNP的浓度之间明显相关.结论:在一定的条件下,NO对食管癌细胞核DNA的损伤作用具有明显的浓度依赖性特征.
