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REG3α基因促进胰岛内皮细胞分泌胰岛素
目的 探讨小鼠胰岛再生衍生因子3α( REG3α)对胰岛β细胞功能代偿作用.方法 建立小鼠部分(90％)胰腺切除模型,分别于术前、术后12和24h检测血糖,术后48 h收集小鼠剩余胰腺组织,经全基因组芯片分析、q-PCR验证REG3α表达；然后构建REG3α过表达质粒,转染MS1细胞系,48 h后ELISA检测细胞上清培养液胰岛素分泌量的变化,并通过q-PCR检测转染后MS1中PDX1、INSULIN2 mRNA表达水平.结果 小鼠部分胰腺切除后REG3α发生高表达.转染REG3α过表达质粒组胰岛素分泌量显著高于未转染组(转染REG3α组879±2 ng/L,未转染组686±5 ng/L,P＜0.01)；转染REG3α过表达质粒组胰岛素分泌量显著高于转染空载体pcDNA3.1组(转染REG3α组879±2 ng/L,转染空载体组671±5 ng/L,P＜0.01).转染REG3α过表达质粒后MS1中的PDX1、INSULIN2mRNA表达水平明显高于未转染组及转染空载体pcDNA3.1组(P＜0.01).结论 REG3α促进内皮细胞表达和分泌胰岛素可能具有对胰岛β细胞功能代偿作用.
关键词： 胰岛再生衍生因子3α 胰岛内皮细胞 胰岛素 转染 -
C-fos诱导生长因子在胰腺再生中的重要作用
目的 探讨c-fos诱导生长因子(Figf)对小鼠胰腺再生的影响.方法 建立小鼠胰腺损伤模型,于术前、术后12h、24 h检测血糖,48 h后收集剩余胰腺组织.经全基因组芯片分析、Q-PCR验证Figf发生高表达.构建Figf过表达质粒,转染胰岛内皮细胞(MS1),36 h后ELISA检测上清培养液胰岛素分泌量的变化,Q-PCR检测转染后MS 1中Pdx1、Insulin1 mRNA表达水平. 结果 小鼠胰腺再生过程FigfmRNA表达上调.与未转染组、转染PcDNA 3.1组比较,转染Figf过表达质粒组胰岛素分泌量明显升高[未转染组(116.89±6.09)(P＜0.01);转染PcDNA 3.1组(114.24±4.60)(P＜0.01)],转染Figf过表达质粒组Pdx1、Insulin1 mRNA表达水平均明显升高(P＜0.01). 结论 MS1中过表达Figf可使Pdx1、Insulin1 mRNA表达水平升高,增加胰岛素的分泌.Figf可能在胰岛β细胞再生中发挥着重要作用,是小鼠胰腺再生的关键基因.
关键词： c-fos诱导性生长因子 胰岛内皮细胞 胰岛素 胰腺再生 -
Sox4基因的促胰岛内皮细胞分泌胰岛素作用
目的：探讨Sox4基因对胰岛β细胞功能代偿作用。方法：构建Sox4过表达载体，包装病毒感染MS1细胞系，qPCR检测感染后MS1中胰腺发育及分化相关基因MafA、Pax、PDX-1和Insulin mRNA的表达水平，Western blotting检测Sox4以及Insulin蛋白的表达水平。结果：过表达Sox4慢病毒感染MS1细胞后Maf A、Pax4、Insulin mRNA表达水平显著高。结论：Sox4促进内皮细胞表达和分泌胰岛素可能具有对胰岛β细胞功能代偿作用。
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高糖经内质网应激途径诱导胰岛内皮细胞凋亡
目的:探讨高糖诱导胰岛微血管内皮细胞株MS-1凋亡及其可能机制.方法:体外培养MS-1细胞,用含有不同浓度葡萄糖(5.6、25.0和33.6 mmol/L)的培养液分组培养12、24h.流式细胞术分析各组细胞凋亡率变化；四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测各组细胞增殖率变化；RT-PCR分析GRP78、CHOP、caspase-3、caspase- 12 mRNA表达变化情况；Western blot分析GRP78、CHOP蛋白表达变化情况.结果:与5.6 mmol/L组相比,培养12 h及24h后,25.0和33.6 mmol/L组MS-1细胞凋亡率显著增加(P＜0.05);而细胞增殖率显著下降(P＜0.05),且呈浓度和时间依赖性.进一步研究表明,在高糖刺激12 h及24h后,caspase-3、caspase-12 mRNA表达显著上调(P＜0.05),CHOP mRNA和蛋白表达水平均显著上调(P＜0.05)；而GRP78 mRNA和蛋白表达水平在刺激12 h后显著上调,24h后却显著下降(P＜0.05).结论:高糖可以促进胰岛内皮细胞凋亡增加,并呈浓度和时间依赖性升高,其机制可能与启动胰岛内皮细胞内质网应激有关.
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Nephrin的特征及其与糖尿病的关系
Nephrin是第一个被证实的肾小球裂孔隔膜上的跨膜蛋白,在维持肾小球滤过屏障完整性及其正常功能中起关键作用.近期发现胰岛细胞中也存在Nephrin和CD2相关蛋白等足细胞裂孔隔膜的关键蛋白的表达.由于胰岛的血管网类似于肾小球,因此进一步研究Nephrin的结构、功能及其与糖尿病的关系,有助于更好地了解糖尿病及其并发症的发生机制.
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胰岛内皮细胞的特点与功能
血管内皮细胞除了在交换营养和代谢物质外,同样还在血管发生、止血以及血管通透性方面发挥重要作用,此外通过分泌一系列重要的免疫辅助和调节因子在炎症反应中发挥重要作用[1].
