首页 > 文献资料
-
下调HIPK2基因表达促进顺铂诱导的肾小管上皮细胞HKC凋亡
目的 探讨HIPK2对顺铂诱导的人肾小管上皮细胞(HKC)凋亡的影响.方法 构建顺铂诱导的HKC细胞凋亡模型,实时荧光定量PCR和Western blot检测HIPK2的表达;设计合成2条HIPK2 siRNA干扰片段,通过脂质体转染HKC细胞,建立HIPK2干扰的细胞株;实时荧光定量PCR和Western blot分别检测HIPK2 mRNA和蛋白的表达;再用顺铂处理细胞,AnnexinV/PI检测细胞凋亡;Western blot检测Bax表达的影响.结果 顺铂呈剂量依赖性诱导的HKC细胞凋亡过程中,HIPK2 mRNA和蛋白表达水平均明显下调(P＜0.05);转染siRNA后可显著降低HIPK2在HKC细胞内mRNA和蛋白的表达(P＜0.05),且HIPK2表达降低后会促进顺铂诱导的HKC细胞凋亡.结论 HIPK2可抑制顺铂诱导的HKC细胞凋亡.
-
HIPK2对肝癌细胞HepG2生物学表型的调控机制研究
目的:研究外源同源结构域相互作用蛋白激酶2(HIPK2)基因表达对人肝癌细胞系HepG2裸鼠成瘤性的影响及机制.方法:将人HIPK2基因的全长cDNA序列克隆至腺病毒载体(pAdeno-HIPK2),制备Adeno-HIPK2重组腺病毒.以50 pfu/细胞的Adeno-HIPK2感染HepG2细胞作为实验组,Adeno-lacZ感染作为阴性对照,未感染细胞作为空白对照,观察各组细胞的裸鼠成瘤性和细胞凋亡情况,并绘制细胞生长曲线.第6周取材,检测各组样品中HIPK2、JNK1、JNK2、P53、mdm2的水平和JNK激酶活性.结果:实验组细胞的裸鼠成瘤性明显降低,细胞凋亡率有所上升.实验组的P53和mdm2的蛋白表达分别是对照组的3倍和15%,JNK1和JNK2基本不变,但JNK激酶活性则升至对照组的5倍. 结论:HIPK2高表达可以激活JNK激酶途径,并有效提高细胞内P53水平,使HepG2细胞的裸鼠成瘤性下降,是肝癌生物治疗中重要目的基因.
-
HIPK2在口腔鳞状细胞癌中的胞质再定位表达及其与预后的关系
目的:探讨同源结构域相互作用蛋白激酶2(HIPK2)在口腔鳞状细胞癌(OSCC)中的表达及其与预后的关系.方法:采用组织微阵及免疫组化染色方法检测99例OSCC组织中HIPK2的表达,利用real-time PCR及细胞免疫荧光实验检测OSCC细胞系中HIPK2基因和蛋白表达水平.结果:HIPK2在99例OSCC组织的肿瘤中心、肿瘤前沿及淋巴结转移灶中表达显著高于癌旁正常上皮(P＜0.05);肿瘤中心伴淋巴结转移比不伴淋巴结转移的表达低(P＜0.000 1).HIPK2具有胞核阳性、胞核及胞质均阳性及仅胞质阳性3种表达模式,癌旁正常上皮主要表现为胞核阳性;肿瘤主要表现为胞核及胞质均阳性或仅胞质阳性.HIPK2的表达模式与患者临床分期及病理分级显著相关(P＜0.01),而与性别及年龄无显著相关性(P＞0.05).OSCC的总体生存率与HIPK2的表达模式有关,胞核及胞质均阳性、仅胞质阳性相对较强、仅胞质阳性相对较弱者的总体生存率依次降低(P=0.000 6).HIPK2在OSCC细胞系中mRNA及蛋白的表达显著高于正常上皮细胞系(HIOEC) (P＜0.01).结论:HIPK2在OSCC中表达升高,且以仅胞质阳性表达为主.HIPK2的表达及胞质再定位与OSCC的预后密切相关.
