首页 > 文献资料
-
miR-195过表达促进人神经胶质瘤细胞T98G凋亡
目的 检测过表达miR-195对人神经胶质瘤细胞T98G增殖的影响,探讨miRNA-195在胶质瘤发病过程中可能机制.方法 用合成的miR-195模拟物,转染miR-195表达水平较低的人神经胶质瘤细胞T98G,用MTT、流式细胞术和TUNEL法分别检测T98G细胞增殖、细胞周期和凋亡,用Western blot检测细胞BCL-2的表达.结果 miR-195模拟物转染T98G后,成熟miR-195明显升高(P＜0.05).在T98G中过表达miR-195后,可明显抑制细胞增殖,过表达miR-195能促进T98G细胞的凋亡和下调细胞BCL-2的表达.结论 过表达miR-195能显著促进T98G细胞凋亡,提示miR-195可能对胶质瘤的治疗起作用.
-
氯化钴诱导上皮间充质转化并增加胶质瘤T98G细胞侵袭能力的研究
目的 研究氯化钴对胶质瘤T98G细胞上皮间充质转化(EMT)和侵袭能力的影响.方法 用氯化钴处理胶质瘤T98G细胞,未处理组作为对照,Western blot检测各组细胞上皮细胞钙黏蛋白(E-cadherin)和间充质细胞波形蛋白(Vimentin)的表达,采用Transwell及Boyden方法检测各组迁移细胞数.结果 氯化钴处理胶质瘤T98G细胞后发生了典型的EMT:E-cadherin表达明显降低(P＜ 0.05或P＜0.01),Vimentin表达明显升高(P＜0.01);Transwell迁移实验显示迁移能力明显增强:穿过Transwell小室滤膜的细胞数由(29±5)个增加至(53±4)个(P=0.0397);Boyden结果显示:穿过小室细胞数由(26±3)个增加至(36±2)个(P=0.0402).结论 氯化钴能促进胶质瘤T98G细胞发生EMT,增强胶质瘤T98G细胞迁移能力.
-
NECL1对神经胶质瘤细胞系T98G增殖的影响
目的 研究神经胶质瘤中表达缺失基因NECL1对神经胶质瘤细胞增殖的影响.方法 采用半定量逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)及Western blot方法 检测NECL1在1例人正常脑组织和6株人神经胶质瘤细胞系中的表达谱.选取NECL1缺失表达、转染效率相对较高的T98G细胞作为研究对象,采用细胞生长曲线、流式细胞仪、Hoechst染色等方法 观察过表达NECL1对 T98G细胞体外增殖能力的影响.结果 NECL1在6株人神经胶质瘤细胞系中的表达明显下降或缺失.在T98G细胞中过表达NECL1,细胞生长速度较对照组明显变慢,凋亡细胞数较对照组明显增多.结论 NECL1可能通过促进神经胶质瘤细胞系的凋亡而抑制其增殖.
-
黄芩素通过调控Wnt/β-catenin信号通路抑制人胶质母细胞瘤细胞MGMT表达
目的:研究黄芩素在体外对人胶质母细胞瘤T98G细胞和GBM-X细胞MGMT(O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶)表达的作用以及相关的信号通路机制.方法:将T98G细胞和GBM-X细胞在常氧和缺氧条件下分成对照组与处理组,采用Western Blot (蛋白质印迹法)检测黄芩素作用于两种细胞72h后MGMT及其相关信号通路蛋白的表达水平,CCK-8试验检测黄芩素、替莫唑胺以及二者联用对两种细胞的毒性作用,探讨联合用药的可能性.结果:T98G细胞常氧/缺氧条件下黄芩素处理组MGMT蛋白表达水平(0.757± 0.058,0.714±0.049)较对照组(1.000±0.101,1.000±0.072)显著下降(P＜0.05,P＜0.01),GBM-X细胞常氧/缺氧条件下黄芩素处理组MGMT蛋白表达水平(0.843±0.027,0.697±0.052)相比对照组(1.000±0.031,1.000± 0.082)明显降低(P＜0.01,P＜0.01).同对照组相比,T98G、GBM-X细胞黄芩素处理后TCF1/TCF7(T细胞因子)、LEF1(淋巴样增强因子)、Survivin(生存素)蛋白表达水平明显下降,差异有统计学意义.经CCK8试剂检测,T98G、GBM-X细胞药物作用24、48、72h后,替莫唑胺组与对照组相比无明显统计学差异,黄芩素联合替莫唑胺组较对照组吸光度值显著降低,差异有统计学意义.结论:黄芩素可通过调控Wnt/β-catenin(β-连环蛋白)信号通路稳定抑制人胶质母细胞瘤细胞MGMT蛋白表达,黄芩素联合替莫唑胺可降低MGMT阳性胶质母细胞瘤细胞对替莫唑胺的耐药性,增强替莫唑胺细胞毒作用,发挥替莫唑胺化疗效果.
-
积雪草酸通过改变自噬作用促进胶质瘤细胞T98 G凋亡的实验研究
目的：研究积雪草酸对 T98G 细胞凋亡及自噬的影响。方法 MTT法分析积雪草酸对T98G细胞增殖的影响；Hoechst 33258染色观察细胞形态；流式细胞术检测细胞凋亡和细胞自噬；Western blot检测凋亡和自噬通路相关因子的表达。结果积雪草酸对 T98G 细胞增殖有抑制作用, IC50值为46．3μmol · L-1。 Annexin-V/7-AAD 双染和West-ern blot结果显示,积雪草酸可引起Akt表达下调、线粒体膜电位下降和Caspase-3激活,进而诱导T98G细胞凋亡。同时,AA可抑制T98G细胞自噬,表现为降低MDC荧光强度,抑制Beclin-1、LC3-Ⅱ、Atg表达。通过氯喹上调Beclin-1和LC3-Ⅱ的表达,积雪草酸抑制自噬作用被阻断,同时促凋亡作用也明显降低。结论积雪草酸可同时诱导T98G细胞凋亡和抑制自噬,并且抑制自噬作用能够促进细胞凋亡,进而抑制T98G细胞增殖。
