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HPLC同时测定苦豆草中7种生物碱的含量
目的:建立了用HPLC对苦豆草中苦豆碱、槐定碱、氧化苦参碱、氧化槐果碱、苦参碱、槐果碱和莱曼碱同时定量的方法.方法:采用HPLC检测方法,色谱柱Waters X-Brige C18(4.6 mm×250 mm,5 μm);流动相为乙腈-0.05 mol·L-1的磷酸二氢钾溶液(2.0 mL·L-1三乙胺),进行梯度洗脱;检测波长为205 nm,柱温25℃,进样量10 μL,流速1.0 mL·min-1.结果:苦豆碱、槐定碱、氧化苦参碱、氧化槐果碱、苦参碱、槐果碱和莱曼碱的浓度与峰面积,分别在20.66～103.32gμ(Γ=0.998 8),22.82～114.12 μg(Γ=0.999 7),25.10～125.52μg(Γ=0.999 1),23.88～119.40μg(Γ=0.997 5),5.00～24.99μg(Γ=0.9986),4.69～23.46μg(Γ=0.9996)和4.60～23.01μg(Γ=0.9978)范围呈良好的线性关系;平均加样回收率分别为97.12%,97.47%,96.21%,94.64%,98.04%,96.24%和101.31%;RSD分别为7.3%,3.0%,4.5%,5.2%,5.4%,5.8%,4.3%.结论:该方法准确、简便,灵敏,为苦豆草的质量评价提供了依据.
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苦豆草中总生物碱含量测定
目的寻求一种简便实用的苦豆草总生物碱含量测定方法.方法用pH=5.6的醋酸-醋酸钠缓冲液提取苦豆草中的总生物碱,总生物碱在pH=7.6的溶液中与溴麝香草酚蓝形成离子对,氯仿萃取后在422nm处用紫外分光光度法进行含量测定.结果线形范围0～13.60μg*ml-1.苦参碱的平均回收率为98.57%,RSD=1.92%.结论测定结果表明提取完全、方法简便、重现性好、结果准确,优于药典采用的氨水碱化后氯仿提取总生物碱的含量测定方法.
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苦豆草治疗大肠湿热证大鼠血清代谢组学研究
中药苦豆草具有清肠燥湿的功效,临床用于治疗菌痢、肠炎等疾病,但对于其作用机制尚不完全清楚.本研究以探究苦豆草治疗大肠湿热证作用机制为目的,采用高温高湿环境、高糖高脂饮食结合腹腔注射产肠毒性大肠杆菌的方法建立大肠湿热证模型.通过检测大鼠血常规和促炎细胞因子,观察其肠道组织病理学变化,并结合基于超高效液相色谱与串联四级杆飞行时间二级质谱(UHPLC-Q/TOF-MS/MS)联用技术的血清代谢组学方法进行研究.结果显示,苦豆草能够缓解大肠湿热证症状,改善肠道组织病变及调节体内促炎细胞因子IL-1β、IL-2、IL-6和TNF-α的含量异常.经血清代谢轮廓分析发现牛磺酸、色氨酸、溶血磷脂酰乙醇胺、溶血磷脂酰胆碱、溶血磷脂酸、甘油二酯、鹅去氧胆酸硫酸氢盐、2-十二碳烯二酸和7-酮基脱氧胆酸等9种差异代谢物可能是苦豆草治疗大肠湿热证的潜在代谢标志物,其涉及牛磺酸和亚牛磺酸代谢、甘油磷脂代谢、甘油酯代谢、色氨酸代谢和初级胆酸合成等5条代谢路径.本研究运用血清代谢组学方法揭示了苦豆草干预大肠湿热证的作用机制,为苦豆草临床应用提供了理论依据.
关键词： 苦豆草 大肠湿热证 血清 代谢组学 UHPLC-Q/TOF-MS/MS -
苦豆草药材质量标准的研究
目的:建立苦豆草药材的质量标准.方法:采用TLC法对苦豆草药材进行定性鉴别；用HPLC法测定氧化苦参碱和槐定碱的含量.结果:薄层色谱图显示,氧化苦参碱和槐定碱与其他生物碱分离效果良好,可以用于苦豆草药材的鉴别；高效液相色谱中,氧化苦参碱和槐定碱分别在25.104～125.52μg和22.824～114.12 μg范围内线性关系良好,平均加样回收率(n=9)分别为96.2％和95.9％.结论:所建立的方法可准确地进行定性、定量分析,可用于苦豆草药材的质量控制.
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苦豆子生物碱的研究进展
苦豆子（sophora alopecuroides L）是豆科槐属植物，别名苦豆根、苦甘草、西豆根、苦豆草、欧苦参等，我国西北省区及中亚细亚一带均有分布。药用根、根茎、全草及种子，味苦性寒，有清热解毒、祛风燥热、止痛杀虫等作用。近年来的研究发现，其还有抗癌、抗炎、抗菌的作用。关于化学成分的研究的研究已有报道，为了更好的开发利用该资源，我们对其种子中生物碱成分的研究和药理作用的研究。已有报道鉴定的生物碱有氧化苦参碱（oxymatrine OMT）、氧化槐果碱（oxysophocarpine OSC）、苦参碱（matrine MT）、槐果碱（sophocarpine SC）、槐定碱（sophoridine SRI）和槐胺碱（sophoramine SA）、莱曼碱（lehmannine LEH）、苦豆碱（aloperine ALC）。现将近几年苦豆子类生物碱在抗炎方面的资料进行综述如下。
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HPLC法测定苦豆草药材中生物碱的含量
目的：建立苦豆草药材中生物碱含量的测定方法。方法：采用HPLC法测定，色谱柱为Agilent TC-C18（2）（250mm×4.6mm，5μm）；流动相为乙腈-0.05mol·L-1磷酸二氢钾水溶液（三乙胺2.0ml/L），梯度洗脱；流速为1.0ml/min，柱温30℃；检测波长205nm。结果：苦豆草中主要生物碱槐定碱在0.00804mg·ml-1～0.2412mg·ml-1范围内有良好的线性关系，回收率为99.3%，RSD为1.63%；氧化苦参碱在0.00808mg·ml-1～0.2424mg·ml-1范围内有良好的线性关系，回收率为99.4%，RSD为1.82%。结论：该方法简便易行、结果准确、可靠，重复性好，可用于苦豆草中生物碱的定量分析方法。
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苦豆草中槐定碱在大鼠体内的浓度及药动学研究
目的:研究苦豆草中槐定碱在大鼠血浆中的浓度及药动学.方法:给大鼠灌胃苦豆草水溶液,用HPLC法测定血浆中槐定碱的浓度,估算相应的药动学参数.结果:在本实验所建立的方法中,槐定碱的回收率达到89.09%,准确度高于94.90%;大鼠灌胃苦豆草水溶液含40 mg/kg槐定碱后的t1/2(α)、t1/2(β),Tmax、Cmax、CL/F、AUC0-t分别为(0.28 ±1.70)h、(3.66±1.23)h、(0.75±8.66)h、(1.62±0.13)mg/L、(0.10±0.02)L/(h·kg)、(4.84±0.20) mg/(μL·h),其在大鼠体内的分布符合二室模型.结论:本实验所建立的方法适合大批量的血样分析,该方法能够满足药动学研究的需要.
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复方岗松洗液的薄层色谱研究
目的:对复方岗松冼液中的药材进行定性研究,以便更好地控制产品质量.方法:对方中主要药味苦豆草、岗松、黄柏、冰片、红花五味药用薄层色谱法进行定性研究,展开系统分别为苯-丙酮-醋酸乙酯(7:3:3)、石油醚(60℃～90℃)-醋酸乙酯(5:1)、苯-醋酸乙酯(19:1)、正丁醇-冰醋酸-水(7:1:2)及环已烷-乙酸乙酯(5:3).结果:供试品色谱在对照品或对照药材色谱相应位置上显相同颜色斑点,所得斑点清晰,专属性强,重现性好,分离度良好,阴性样品无干扰.结论:所建立的方法简便、结果准确、重复性好,可用于产品的质量控制.
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苦豆草生物碱的酶法提取工艺优选
目的:优选苦豆草的酶法提取工艺,提高苦豆草生物碱的提取率.方法:以苦豆草生物碱为指标,通过单因素实验及正交试验优化酶质量浓度、pH、酶解温度、酶解时间等工艺参数.结果:佳提取工艺条件为:酶解时间4h,缓冲液pH=6,酶用量为1mg/g,酶解温度50℃,酶法提取的提取率比传统提取法提高了37%.结论:该工艺简单、合理,适用于工业化生产.
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大孔吸附树脂分离纯化苦豆草总生物碱的工艺研究
目的：采用大孔树脂分离纯化苦豆草总生物碱，优选佳工艺条件。方法以苦豆草总生物碱的吸附量及解吸率为评价指标，比较DF01、D101等8种型号大孔树脂对苦豆草总生物碱的分离纯化性能，选出佳树脂并优选纯化工艺。结果 D101型大孔树脂对苦豆草总生物碱具有较好的吸附分离性能，在实验条件下对苦豆草总生物碱的吸附量和解吸率可达到9．2 mg · mL －1和90％以上。结论该优选工艺可为苦豆草总生物碱纯化的产业化生产提供依据。
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酶法提取苦豆草生物碱研究
目的：在实验室酶法提取的基础上，优化苦豆草生物碱酶法提取小试工艺条件。方法以苦豆草生物碱的提取率为指标，在小试条件下优化提取次数、料液比、提取时间，并与传统提取法比较。结果酶法提取佳的小试工艺条件为：酶解时间4h，溶剂pH＝6，温度为50℃，加酶量为1∶1000，酶解后，加入盐酸至浓度为4mL·L -1，料液比1∶16，提取2次，第1次2h，第2次1 h。苦豆草生物碱的提取率达到2．17％结论实验室提取工艺与小试生产存在差异，经条件优化基本达到实验室提取生物碱的提取率。
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HPLC法定性定量分析苦豆草药材中多个生物碱成分
目的:建立苦豆草药材中多个生物碱同时定性定量分析的高效液相色谱法.方法:采用DiamonsilTM C18柱(5 μm,250mm ×4.6mm),以0.05 mol·L-1磷酸二氢钠水溶液-乙腈-甲醇-高氯酸钠(940 mL:50 mL:10 mL:25 g;pH4.5)为流动相.流速1 mL·min-1,检测波长210 nm,柱温40℃(0～39 rain)→50℃(40～49 min)→40℃(50～55 min).结果:本方法在55min内定性分析了宁夏市售苦豆草中9个生物碱.并对其中6个进行了定量测定.苦参碱、槐定碱、槐果碱、苦豆碱、氧化槐果碱、氧化苦参碱的浓度均在0.002～2.00 mg·mL-1范围内与峰面积呈良好线性关系,平均回收率(n=3)分别为97.4%～98.3%(RSD≤1.3%),97.5%～98.3%(RSD≤1.2%),96.8%～98.0%(RSD≤1.2%).97.1%～98.0%(RSD≤1.0%).97.9%～98.3%(RSD≤1.1%),97.1%～98.7%(RSD≤0.8%).结论:本法灵敏、准确,专属性好,适用于苦豆草药材中生物碱成分的定性鉴别和定量分析.
