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麝香糖蛋白成分对中性白细胞趋化反应的抑制作用
目的: 观察麝香糖蛋白成分(麝香-1)对中性白细胞趋化反应的影响.方法: 体内采用羧甲基纤维素诱导大鼠腹腔内中性白细胞趋化反应模型.体外采用Boyden隔室法测定兔中性白细胞趋化反应.以Fura-2标记荧光法测定细胞内游离钙水平.结果:皮下注射麝香水提物5,20,80 mg*kg-1,显著抑制羧甲基纤维素诱导的大鼠腹腔中性白细胞趋化反应,抑制率分别为58.6%,65.1%和73.0%;终浓度为1,10,100 μg*mL-1麝香-1,显著抑制fMLPP 诱导的兔中性白细胞的趋化反应,抑制率分别为57.9%,64.7%和77.8%;终浓度为1,10,100 μg*mL-1的麝香-1,明显抑制刺激剂引起的中性白细胞胞内游离钙水平的升高,抑制率分别为16.3%,24.7%和37.8%.结论:麝香糖蛋白成分对中性白细胞趋化反应有显著抑制作用,是其抗炎作用机制之一.
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LBP/CD14增敏系统在内毒素血症中的作用
全身炎症反应综合征(SIRS)和脓毒症是临床严重的综合征。其主要特征为细胞激酶释放，黏附分子表达增加，淋巴细胞趋化反应及巨噬细胞吞噬活性增强，急性期蛋白表达增加，终导致致死性并发症多器官衰竭(MOF)〔1〕。LPS即革兰阴性(G－)菌细胞壁的脂多糖，是触发这种病理生理反应的重要因素。过去对其确切机制尚不清楚,90年代初,LPS激活细胞的受体作用机制取得突破性进展〔2〕,发现脂多糖结合蛋白/脂多糖受体（LBP/CD14）是体内增敏细胞效应的重要系统，是机体识别和调控内毒素作用的关键机制之一。通过这些系统，细胞对微量LPS产生应答反应，这可能在内毒素血症致病中具有重要的意义。现对LBP/CD14系统在内毒素血症中的作用作一综述。
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单纯疱疹病毒Ⅱ型感染对生殖道上皮细胞间紧密连接和单核细胞趋化性影响的初步研究
目的 探讨人类单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-2)感染对生殖道上皮细胞间紧密连接的影响及对单核细胞的趋化作用.方法 通过以人子宫内膜腺癌细胞(HEC-1-A)小室培养模型为基础建立生殖道体外单层细胞致密层模型,低剂量HSV-2感染后(MOI=0.1),检测体外细胞活力;通过检测跨膜电阻判断细胞间紧密连接程度的变化;采用Western blot、荧光定量PCR法观察细胞紧密连接蛋白ZO-1、E-cadherin和Occuldin的表达情况;通过单核细胞趋化反应实验来检测感染HSV-2的HEC-1-A细胞培养上清液的趋化效应.结果 与阴性对照组(Mock组)相比,HSV-2(MOI=0.1)感染使HEC-1-A单层细胞致密层跨膜电阻逐渐降低,且在感染中后期下降明显(P＜0.01),而细胞活力无显著变化(均＞80％);随着HSV-2病毒感染,ZO-1蛋白表达水平逐渐降低,在感染60h,该蛋白表达水平低,而其mRNA表达水平无显著变化(P＞0.05),E-cadherin和Occuldin均无显著变化(均P＞0.05);HSV-2感染HEC-1-A后的细胞上清液可诱导单核细胞产生明显的趋化反应(P＜0.01).结论 低剂量HSV-2持续感染可降低HEC-1-A单层细胞致密层跨膜电阻,破坏细胞间紧密连接,很可能与下调ZO-1表达水平相关;感染后的细胞上清液可产生某种特殊的趋化分子介导免疫细胞向感染区域迁移浸润.
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纤维蛋白原诱导大鼠主动脉平滑肌细胞增殖及趋化
目的观察不同浓度纤维蛋白原对体外培养的血管平滑肌细胞增殖、趋化和随机迁移的影响,探讨其致动脉粥样硬化的可能作用及其机制.方法采用胶原酶消化法培养大鼠主动脉平滑肌细胞,用BrdU掺入法和细胞计数法观察其增殖能力,刮伤实验及慢速显微摄像技术检测其随机迁移能力,微孔滤膜法观察其趋化性,Western印迹法检测其明胶酶A的表达,明胶酶谱分析其分泌的明胶酶活性.结果细胞计数(r=0.860,P<0.05)和BrdU掺入实验(r=0.880,P<0.05)发现0.2 g/L～ 3.2 g/L纤维蛋白原呈剂量依赖性地促进血管平滑肌细胞增殖,其中0.4、0.8、1.6和3.2 g/L 纤维蛋白原作用48 h,细胞计数依次为(6.32±0.39)×107/L、(10.63±0.25)×107/L、(12.31±0.44)×107/L和(13.59±0.43)×107/L,BrdU掺入率依次为5.2%±2.2%、17.5%±2.0%、21.5%±2.3%和25.5%±2.5%,与对照组[分别为(5.63±0.34)×107/L和2.0%±0.8%]比较差异均有显著性(P<0.01).微孔滤膜法趋化实验发现0.2 g/L～3.2 g/L纤维蛋白原呈剂量依赖性地促进血管平滑肌细胞趋化(r=0.957,P<0.01).刮伤实验中细胞迁移速度及慢速显微摄像单细胞随机迁移速度在纤维蛋白原组及对照组细胞均无明显差别(P>0.05).Western印迹及明胶酶谱发现纤维蛋白原促使血管平滑肌细胞明胶酶A的表达及活性上调.结论纤维蛋白原可能通过促进血管平滑肌细胞增殖和趋化在动脉粥样硬化发生过程中起重要作用.
