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  • 电针“足三里”对脾虚大鼠骨骼肌线粒体自噬相关蛋白表达的影响

    作者:董佳梓;张妤;魏云涛;许环宇;刘路;邓婷月;张立德

    目的:观察脾虚大鼠骨骼肌线粒体自噬相关蛋白表达的变化,以期阐释针刺足三里治疗脾虚证的部分作用机制.方法:40只雄性SD大鼠,适应性饲养后随机分为正常对照组、脾虚组、足三里组、非经非穴组,每组10只.除正常对照组外,其余3组采用三因素复合法复制脾虚证模型,造模持续14 d.足三里组电针大鼠双侧“足三里”穴,非经非穴组电针双侧髂嵴上非经非穴点,疏密波,频率2 Hz/100 Hz,每日1次,每次20 min,干预10d.正常对照组和脾虚组大鼠在每天同一时间固定20 min,不予电针干预.采用高效液相色谱法检测大鼠骨骼肌三磷酸腺苷(ATP)、磷酸腺苷(AMP)的含量;Western blotting法检测大鼠骨骼肌腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、磷酸化AMPK(p-AMPK)、Atg1/失调51样激酶-1(ULK1)、磷酸化ULK1 (p-ULK1)、微管相关蛋白1轻链3-Ⅰ (LC3-Ⅰ)以及LC3-Ⅱ蛋白的表达.结果:脾虚组大鼠骨骼肌ATP含量明显低于正常对照组(P<0.01),足三里组ATP含量高于脾虚组(P< 0.05)但低于正常对照组(P<0.05),非经非穴组与脾虚组差异无统计学意义(P> 0.05);脾虚组、足三里组AMP/ATP较正常对照组上调(P< 0.01,P< 0.05);脾虚组p-AMPK/AMPK较正常对照组差异无统计学意义(P> 0.05),足三里组p-AMPK/AMPK较正常对照组和脾虚组均上调(均P< 0.05);足三里组p-ULK1/ULK1和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ均明显高于正常对照组和脾虚组(均P<0.01).结论:电针“足三里”可能是通过激活AMPK,AMPK直接磷酸化ULK1,形成稳定的ULK1/AMPK复合物,提高线粒体自噬能力,从而起到调理脾胃、补中益气治疗脾虚证的作用.

  • Ach和ATP在小鼠胰岛β细胞诱导细胞内钙变化的比较

    作者:赵玉峰;朱运龙;周京军;胡玉珍

    目的探讨Ach和ATP在小鼠胰岛β细胞诱导细胞内钙([Ca2+]c)变化的不同.方法原代培养的小鼠胰岛β细胞,分为Ach和ATP诱导组.每组又分为正常对照组、EGTA处理组和Thapsigargin处理组.正常对照组细胞不经处理即开始[Ca2+]c测定;EGTA处理组细胞加入EGTA的无钙溶液,螯合细胞外Ca2+后进行[Ca2+]c测定;Thapsigargin处理组细胞记录前用Thapsigargin(1mmol/L )预处理20分钟,耗竭细胞内钙库的Ca2+后进行[Ca2+]c测定.采用Fura-2钙离子指示剂反映[Ca2+]c,观察Ach与ATP诱导[Ca2+]c变化的规律.结果 Ach可诱导[Ca2+]c的短暂峰性升高和持续性升高.ATP只诱导[Ca2+]c的短暂峰性升高,无持续性升高.EGTA螯合细胞外Ca2+后,Ach和ATP诱导的[Ca2+]c峰性升高依然存在,而Ach诱导的持续性升高被消除.Thapsigargin预处理耗竭细胞内钙库的Ca2+后,Ach和ATP诱导的[Ca2+]c峰性升高消除,同时Ach诱导的持续性升高也被消除.结论 Ach在小鼠胰岛β细胞诱导细胞内Ca2+释放和Ca2+释放激活的Ca2+内流;ATP可诱导细胞内Ca2+释放,但阻断Ca2+释放激活的Ca2+内流.

  • 线粒体的分子热机原理及其在运动医学中的应用

    作者:李云

    本文探讨用线粒体的分子热机工作原理研究运动疲劳,从呼吸链电子漏影响线粒体合成ATP效率的角度对运动疲劳发生的分子机制做出解释,并分析其影响因素;在基因水平上分析运动训练对运动员机体的影响,指出运动应激产生的活性氧对运动员机体造成的基因损伤、修复和复制更新机制及活性氧作为信号分子通过氧化还原修饰传递相关刺激信号激活转录因子诱导基因表达是运动员通过运动训练提高体能和改变身体形态的分子机制,并提出运动训练的"弹弓"假说,为科学化训练提供一个思路;从基因表达调控和线粒体蛋白质组学的角度分析运动员科学选材的依据,提出建立运动员科学选材的理论基础.

  • Celltiter-Glo ATP荧光活性检测在登革病毒1型中和试验中的应用

    作者:白志军;狄飚

    目的 利用Celltiter-Glo ATP荧光活性检测方法(CTG法)在登革病毒1型(DENV1)中和试验中的实验研究,探索出新的组织培养中和试验结果判断方法.方法 DENV1病毒与抗DENV1多克隆抗体进行中和试验感染Vero细胞,选择CTG法和传统的显微镜观察法判断CPE的程度,比较两种方法对细胞半数致死量(TCID50)和中和指数的判定,确定CTG法的准确性.结果 显微镜观测TCID50=5.5,CTG法TCID50=5.31;显微镜观测、CTG检测法均为10-2.1为中和终点,两种方法获得的中和指数较一致.结论 CTG法可作为DENV1细胞组织培养中和试验的结果判断,并能减少实验结果评定中的人为误差.

  • 阵发性室上性心动过速的药物治疗

    作者:张志英;屠庆龙

    作者2004年1月~2006年6月共收治阵发性室上性心动过速(PSVT)患者105例,使用心律平、异搏定、ATP、西地兰等药物复律取得了一定的疗效,现报道如下.

  • 三磷酸腺苷脂质体的研究进展

    作者:皮凤梅;屠锡德;周建平

    本文综述了近年来三磷酸腺苷(ATP)脂质体的研究进展.脂质体作为新载体可以提高ATP在体内的稳定性,并且能靶向于缺血的心肌和缺血的大脑,用于器官移植中能提高冷冻贮存器官的能级状态,提高移植的成活率,故制备稳定的ATP脂质体具有重要的意义.本文还综述了ATP脂质体的制备方法,探讨如何进一步提高脂质体的包裹率和靶向性,以用于临床.

  • 应用三磷酸腺苷荧光检测复用管腔器械清洗效果的评价

    作者:刘肖;马黎黎

    目的:探讨应用三磷酸腺苷(ATP)荧光检测复用管腔器械清洗效果的检测效率。方法从回收的复用管腔器械中随机抽取50件,在流动水下充分冲洗,接着应用自动灌流器进行标准操作程序(SOP)清洗处理后,依次用放大镜目测法、ATP荧光检测法进行清洗效果评价,比较两种不同检测方法不合格检出率、检测速度情况。结果放大镜目测和ATP检测不合格分别为2件(4%)和7件(14%),两者比较有显著性差异(P<0.05);A T P检测法单件检测速度为(1.02±0.32) min ,放大镜目测速度为(1.96±0.48)min ,两者比较有显著性差异(P<0.05)。结论应用ATP荧光检测复用管腔器械清洗,不合格检出率高,检测速度快,是提高工作效率、主动控制污染事故发生的有效方法。

  • 谷氨酸对牛大脑中动脉平滑肌细胞胞浆静息Ca2+和ATP触发的Ca2+内流的影响

    作者:宜全;关永源;贺华

    目的观察谷氨酸对牛大脑中动脉平滑肌细胞有无直接的激动作用以及对ATP触发的Ca2+内流有无影响?方法采用Fura-2荧光法测定胞浆内Ca2+变化技术,在培养的乳牛大脑中动脉平滑肌细胞上观察药物的作用. 结果谷氨酸(10~200 μmol*L-1)不能增加或减少细胞胞浆静息游离Ca2+浓度([Ca2+]i)和ATP触发的Ca2+内流(谷氨酸:10~400 μmol*L-1).结论谷氨酸对大脑中动脉平滑肌细胞信息Ca2+水平和Ca2+内流均无直接的影响.谷氨酸可能没有直接参与脑血管张力的调节.

  • 肾移植受者术后CD4+细胞内ATP水平与免疫状态的关系

    作者:刘杏;黎程;许茹;邵媛;叶欣;罗广平;汪传喜;申升;刘东

    目的 利用三磷酸腺苷生物发光技术测定移植物血凝素刺激后的CD4+细胞内ATP浓度监测肾移植术后的免疫状态,为临床调整免疫抑制剂用量提供客观具体的数值依据,为减少或停用免疫抑制剂提供理论依据.方法 选择年龄18~60岁的肾移植受者100例,利用三磷酸腺苷生物发光技术连续动态的监测100例肾移植受者术后2年内正常状态、感染以及发生排斥反应时的CD4+细胞内ATP浓度.结果 肾移植受者术前ATP浓度为(410±105)ng/ml.所有肾移植受者CD4+细胞内ATP浓度术后均下降,于1周左右降至低,2周左右开始回升,但4周时仍低于术前水平(P<0.01).术后并发肺部感染时,其CD4+细胞内ATP浓度时比未发生感染者进一步下降,病情加重时下降更加明显,感染控制后有所回升.术后并发急性排斥反应时,其CD4+细胞内ATP浓度对比未发生排斥者明显上升,排斥控制后有所下降.结论 CD4+细胞内ATP浓度可反映机体的整体细胞免疫状态,可以为临床调整免疫抑制用量提供数值依据.

  • 三磷酸腺苷在心肺脑复苏中的临床应用

    作者:吕新民

    在心肺复苏过程中,我们常注重人工呼吸、胸外按压、循环的建立,而忽视缺血缺氧后机体代谢能量的损耗和缺失,细胞水肿、变性、坏死而致不可逆损伤,从而导致相关器官功能障碍.因此,在复苏早期即给予能量供给,从而减轻各种器官损害程度,为后期器官功能恢复奠定良好的基础.

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