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离子色谱法测定三叶青多糖中单糖组成
建立离子色谱-脉冲安培法(IC-PAD)测定三叶青多糖中单糖组成的方法.方法:三叶青块根、叶子中的粗多糖采用水提、醇沉法提取,采用2mmol/L硫酸在100℃下水解粗多糖.采用CarboPacPA10分析柱(4mm×250mm)分离,10mmol/L氢氧化钠淋洗,流速为1.0mL/min,采用脉冲安培法测定三叶青多糖中岩藻糖、鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖含量.结果:该方法线性范围宽,相关性好(r＞0.999,2),相对标准偏差为2.20％～3.80％,样品平均加标回收率为98.0％～116.0％,低检出限为3.95～20.61μg/L.结论:该实验方法简单、可靠,灵敏度高,具有一定的实用推广价值.
关键词： 三叶青 多糖 离子色谱—脉冲安培法 单糖 -
三叶青水提物对慢性阻塞性肺疾病肿瘤坏死因子α和白细胞介素-1β的影响
目的:探讨三叶青水提物对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠血清和肺组织匀浆中的肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)及支气管肺泡灌洗液炎症细胞的影响,研究三叶青对COPD炎症影响的可能机制.方法:将健康清洁级雄性SD大鼠50只随机分成对照组、模型组和低剂量、中剂量、高剂量三叶青用药组5个组,每组10只.除对照组外,其余各组采用烟熏加气管注射脂多糖(LPS)法复制大鼠COPD的模型.HE染色的方法观察各组大鼠肺组织病理变化.酶联免疫吸附法(ELISA)测定各组大鼠血清和肺组织匀浆中TNF-α和IL-1β的含量,测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞和中性粒细胞数量.结果:除对照组外,各组大鼠气管壁内可见慢性炎症改变,出现肺泡扩张,肺泡间隔变窄并断裂,部分肺泡融合成较大囊腔等形态学改变.三叶青各剂量组TNF-α和IL-1β含量及白细胞和中性粒细胞总数较模型组显著下降,并呈一定的剂量效应关系,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:三叶青提取物对COPD的炎症影响可能与抑制TNF-α和IL-1β的释放有关.
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浅谈三叶青
三叶青能提高免疫力、增强肝功能,抗肿瘤,被广泛的应用于临床,并取得较好的疗效.
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三叶青化学成分和抗肿瘤作用研究进展
三叶青为葡萄科崖爬藤属植物三叶崖爬藤,研究表明其具有广谱的抗肿瘤作用.三叶青的化学成分主要包括黄酮类、三萜及甾体类、酚酸类、脂肪酸类化合物,可通过抑制肿瘤细胞增殖、诱导细胞凋亡、调节机体免疫功能和协同化疗药物等途径发挥抗肿瘤作用.三叶青在抗肿瘤药物开发方面显示了良好的应用前景,本文综述了三叶青的化学成分及抗肿瘤功能方面的研究进展,为其进一步的开发利用提供了资料参考和理论支持.
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民间中药三叶青的研究进展
通过查阅国内外相关文献,进行分析和总结,对三叶青的化学成分、生物活性及质量控制研究进行综述.结果显示从三叶青中鉴定出的化学成分包括黄酮类、酚酸类、三萜类、甾类和二苯乙烯类等,现代药理研究表明三叶青具有抗肿瘤、抗氧化、免疫调节、抗病毒、抗炎、镇痛、解热、保肝等多种生物活性.三叶青药材质量控制方法包括高效液相色谱指纹图谱研究和指标成分的含量测定.三叶青的研究尽管取得了一定的进展,但仍存在一些问题,需要进一步深入探讨.
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三叶青乙酸乙酯提取物诱导人结肠癌HT-29细胞凋亡
目的:评价三叶青乙酸乙酯提取物(ethyl-acetate fraction ofextracts from Tetrastigma hemsleyanum Diels et.Gilg,EAFT)诱导人结肠癌HT-29细胞凋亡作用.方法:体外培养HT-29细胞.FITC标记annexin V/PI染色流式细胞术分析细胞凋亡率.ELISA法测定细胞组蛋白/DNA碎片.Westem Blotting分析细胞Bax蛋白和细胞色素C的表达.结果:EAFT以浓度依赖方式诱导annexin V染色阳性细胞百分率和组蛋白/DNA碎片增加(P＜0.01).10.0 mg/L EAFT分别作用HeLa细胞6 h、12 h和24 h,细胞色素C和Bax蛋白表达上调.结论:EAFT具有诱导人结肠癌HT-29细胞凋亡作用,其作用机制与激活线粒体途径有关.
关键词： 结肠癌 三叶青 三叶青乙酸乙酯提取物 细胞凋亡 -
三叶青有效部位抑制肿瘤增殖和迁移的作用研究
目的:观察三叶青有效部位对人乳腺癌细胞MCF-7增殖和迁移的抑制作用及相关机制研究.方法:制备三叶青有效部位,将接种于培养板的MCF-7细胞分为阴性对照组,三叶青有效部位给药组和阳性对照组,观察细胞增殖抑制率、IC50值、乳酸脱氢酶(LDH)活力、迁移距离、细胞周期分布和凋亡率.结果:与阴性对照组相比,三叶青有效部位5～160 g/L各剂量组和阳性对照组对MCF-7细胞增殖有显著抑制作用(P＜0.01),且随着浓度的增大,三叶青有效部位对MCF-7细胞的抑制率呈剂量依赖性关系.三叶青对MCF-7细胞增殖的IC50值为(22.35±1.02) g/L.与阴性对照组相比,当给药浓度为160 g/L时,LDH活力明显增加(P＜0.05).与阴性对照组相比,经药物处理48 h后,随着剂量的增大,MCF-7细胞的迁移能力被明显抑制(P＜ 0.05,P＜ 0.01),呈明显的剂量依赖性.与阴性对照组相比,三叶青有效部位作用后,随着给药浓度的增大,G0/G1期细胞比例降低,S期和G2/M期细胞比例增大,凋亡率升高(P＜0.01).结论:三叶青有效部位可有效地抑制MCF-7细胞的增殖和迁移,其作用机制可能与阻滞细胞周期和诱导细胞凋亡有关.
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蛇附子的本草考证
为了澄清蛇附子(三叶青)的品种混乱和保证用药安全,该文对其原植物、入药部位、性味功效和药材名称进行了考证整理.结果表明,蛇附子的原植物为葡萄科植物三叶崖爬藤Tetrastigma hemsleyanum Diels et Gilg,人药部位为块根,味苦性凉,有清热祛湿之功;在不同省区,其原植物、入药部位皆有差异,建议统一以蛇附子作为其药材规范名称,以避免混淆.
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三叶青水提物抑制小鼠痛经作用
目的 观察三叶青水提物对小鼠痛经模型的影响.方法 采用连续灌胃给药后,观察三叶青水提物对缩宫素诱发的小鼠离体子宫体平滑肌收缩及扭体反应的影响.结果 发现三叶青水提物对缩宫素诱发的小白鼠扭体反应有较好的对抗作用(P＜0.01);对正常小白鼠离体子宫平滑肌的收缩活动无明显影响,在浴槽终质量浓度为(50～200 mg/ml)时,具有抑制缩宫素诱发的子宫平滑肌的收缩功能(P＜0.05或P＜0.01),且呈明显的剂量依赖性.结论 三叶青水提取物可显著抑制缩宫素诱发的小鼠子宫收缩.
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多指标评价不同干燥工艺及切片对三叶青质量的影响
目的:研究不同干燥工艺和切片对三叶青质量的影响,优选三叶青的干燥处理方式.方法:分别采用2种处理方式(切片、不切片)及5种干燥方法(阴干、晒干、热风干燥、微波干燥、冷冻干燥)对三叶青块根进行处理,分别干燥3.5 h~213.0 h后,以药材中总黄酮、多糖、总多酚和β-谷甾醇的含量为指标,对比分析不同干燥工艺对三叶青质量的影响.结果:与不切片比较,三叶青切片后可缩短干燥时间,减少药材中活性成分的损耗.5种干燥方法中,冷冻干燥对三叶青中活性成分保留效果好,切片干燥后药材中总黄酮、多糖、总多酚和β-谷甾醇的含量分别约为18.5、92.7、9.19、0.344 mg/g;微波干燥次之,随后依次为热风干燥、阴干和晒干.各干燥方法间有效成分含量差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01).结论:不同干燥工艺对三叶青质量有明显影响;从成本、有效成分含量及实用性等综合分析,三叶青宜采用切片后在60℃热风干燥的方式处理.
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不同干燥方法对三叶青活性成分含量的影响﹡
目的：探讨不同干燥方法对三叶青活性成分含量的影响。方法选取三叶青中总黄酮、总多酚和多糖3种主要活性成分作为评价指标，分析测定三叶青鲜品及冷冻干燥、真空干燥、热风干燥3种不同干燥方法的三叶青总黄酮、总多酚和多糖含量。结果三叶青鲜品和3种干燥方法的总黄酮含量分别为7.68，7.73，6.65，6.36 mg/g，总多酚含量分别为8.69，8.88，8.32，6.51 mg/g，多糖含量分别为6.39%，6.52%，4.87%，5.11%；传统的热风干燥方法对总黄酮、总多酚和多糖造成的含量损失分别为17.18%，25.09%，20.03%，真空干燥对总黄酮、总多酚和多糖造成的含量损失分别为13.41%，4.25%，23.79%，冷冻干燥的三叶青活性成分含量与三叶青鲜品相当，几乎没有损耗。结论不同的干燥方法对三叶青活性成分含量影响很大，冷冻干燥能大程度地保留三叶青活性成分，适合作为三叶青干燥加工方法。
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水蛭和三叶青的真伪优劣鉴别
目的 正确鏊男水蛭和三叶青的真伪,保障用药安全.方法 通过性状观察、理化鉴别和高效液相色谱法进行鉴别.结果 水蛭中有性状差异较大的人工压制伪品,三叶青中混有鸟头类植物生品.结论 该鉴别方法可为基层快速鉴别水蛭和三叶青真伪提供参考.
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三叶青总黄酮的提取工艺研究
目的 优选三叶青总黄酮的佳提取工艺.方法 采用正交试验法,以乙醇浓度(因素A)、乙醇用量(因素B)、提取时间(因素C)、提取次数(因素D)为考察因素,每个因素设计3个水平进行试验;用分光光度法测定总黄酮含量.结果 佳超声提取工艺为12倍量的50%乙醇,超声提取3次,每次1.5 h.结论 优选得到的提取工艺合理、操作可行、质量可控.
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三叶青抗肝病变药效研究及临床应用的回顾与展望
三叶青的药效研究已广泛开展,尤其是保肝研究,日渐成为该中药研究的核心内容.作者通过概括近年来三叶青抗肝病变的药效及对临床应用的研究,为开发治疗重型肝脏疾病的新药提供新途径.
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三叶青石油醚萃取部位的化学成分研究
目的 研究三叶青石油醚萃取部位的化学成分.方法 运用硅胶柱色谱、凝胶柱色谱和制备HPLC等色谱分离方法对三叶青石油醚萃取部位化学成分进行分离纯化,用质谱法和核磁共振波谱法等波谱学方法鉴定化合物的结构.结果 从三叶青石油醚萃取部位分离得到5个化合物,分别鉴定为:9-羟基-10,12-十八碳二烯酸(1),(4R,5R)-4-羟基-5-异丙基-2-甲基环己-2-烯酮(2),(4S,5R)-4-羟基-5-异丙基-2-甲基环己-2-烯酮(3),(3R,4R,6S)-3,6-二羟基-1-薄荷烯(4),肉桂酸(5).结论 化合物1~5均为首次从崖爬藤属植物中分离得到.
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正交设计法优选三叶青中总黄酮的提取工艺
目的 研究三叶青中总黄酮的提取工艺.方法 采用正交试验法,以总黄酮含量为考察指标,优化三叶青中总黄酮的提取工艺.结果 佳提取工艺为1:15倍煎药液得量,回流提取2次,每次3 h.结论 该试验工艺稳定,重现性好.
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三叶青对CCl4致肝损伤大鼠血清五项生化指标水平的影响
目的:研究三叶青水煎液对CCl4致大鼠急性肝损伤的保护作用.方法:将40只SD大鼠随机分为5组,即正常对照组,模型对照组,高、低剂量治疗组及阳性对照组,分别灌胃等容积(10 mL/kg)的生理盐水、三叶青水煎液(1.6 g/mL、0.16 g/mL)和联苯双酯(0.000208 g/mL),连续6 d,每天1次.末次给药后,除正常组外其他各组腹腔注射CCl4原液1次,造成大鼠急性肝损伤模型,检测血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST )、碱性磷酸酶(ALP)、丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)水平.结果:与模型组比较,三叶青高、低剂量治疗组ALT、AST、ALP 及MDA含量均明显降低(P＜0.05或P＜0.01),但SOD活性明显升高(P＜0.05或 P＜0.01);高剂量组与阳性对照组比较,AST、ALP 及MDA水平差异显著(P＜0.05).结论:三叶青对CCl4造成的大鼠急性肝损伤具有保护作用,且三叶青高剂量保护损伤肝的效果优于联苯双酯.
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三叶青叶化学成分鉴定及其总黄酮含量测定研究
目的:建立超快速液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱法(RRLC-Q-TOF-MS法)快速鉴定三叶青叶化学成分,根据鉴定的黄酮成分建立相适应的紫外-可见分光光度法(UV-Vis法),测定三叶青叶中总黄酮的含量.方法:RRLC-Q-TOF-MS法采用CORTECS C18色谱柱(2.1mm×100mm,1.6 μm),流动相为乙腈(A)-0.1％甲酸水溶液(B),梯度洗脱,流速0.25 mL· min-1,柱温45℃;飞行时间质谱采用负离子全扫描模式,数据采集范围m/z 50～1 000,通过一级质谱和二级质谱、相关文献及对照品推测鉴定化学成分.根据鉴定的黄酮进行3种总黄酮显色方法比较,确定三乙胺法显色,以UV-Vis法在400 nm波长处测定三叶青叶总黄酮含量.结果:采用RRLC-Q-TOF-MS共鉴定了三叶青叶中异荭草苷、荭草苷、异荭草素鼠李糖苷、荭草素鼠李糖苷、牡荆苷、异牡荆苷、牡荆素鼠李糖苷、异牡荆素鼠李糖苷共8个主要黄酮类成分;采用UV-Vis法测定三叶青叶总黄酮含量,以牡荆苷计,质量浓度在1.956～9.780 μg· mL-1范围内与吸光度值呈良好线性关系(r=0.999 5),平均加样回收率99.8％(RSD=3.4％),三叶青叶总黄酮含量范围为13.38～28.67 mg· g-1.结论:本文建立RRLC-Q-TOF-MS联用技术,为鉴定三叶青叶的黄酮成分提供了一种快速、高效的定性分析方法;建立以三乙胺显色的UV-Vis法定量分析三叶青叶总黄酮方法准确,为综合评价三叶青叶的质量提供参考.
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两种药物的生药学鉴别
从性状特征、显微特征及一般理化鉴别等方面对两种不同产地三叶青进行生药学鉴别,为鉴别三叶青及制订三叶青药材质量标准提供实验依据.
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银翘散加三叶青治疗上呼吸道感染发热体会
目的：银翘散加三叶青治疗上呼吸道感染发热疗效观察。方法：对134例上呼吸道感染发热患者随机分为治疗组68例与对照组各66例。分别以银翘散加三叶青与利巴韦林分散片联合酚麻美敏片治疗。结果：治疗组总有效率均高于对照组。结论：银翘散加三叶青治疗上呼吸道感染发热有显著疗效。
