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超快速液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱文献资料
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三叶青叶化学成分鉴定及其总黄酮含量测定研究
目的:建立超快速液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱法(RRLC-Q-TOF-MS法)快速鉴定三叶青叶化学成分,根据鉴定的黄酮成分建立相适应的紫外-可见分光光度法(UV-Vis法),测定三叶青叶中总黄酮的含量.方法:RRLC-Q-TOF-MS法采用CORTECS C18色谱柱(2.1mm×100mm,1.6 μm),流动相为乙腈(A)-0.1％甲酸水溶液(B),梯度洗脱,流速0.25 mL· min-1,柱温45℃;飞行时间质谱采用负离子全扫描模式,数据采集范围m/z 50～1 000,通过一级质谱和二级质谱、相关文献及对照品推测鉴定化学成分.根据鉴定的黄酮进行3种总黄酮显色方法比较,确定三乙胺法显色,以UV-Vis法在400 nm波长处测定三叶青叶总黄酮含量.结果:采用RRLC-Q-TOF-MS共鉴定了三叶青叶中异荭草苷、荭草苷、异荭草素鼠李糖苷、荭草素鼠李糖苷、牡荆苷、异牡荆苷、牡荆素鼠李糖苷、异牡荆素鼠李糖苷共8个主要黄酮类成分;采用UV-Vis法测定三叶青叶总黄酮含量,以牡荆苷计,质量浓度在1.956～9.780 μg· mL-1范围内与吸光度值呈良好线性关系(r=0.999 5),平均加样回收率99.8％(RSD=3.4％),三叶青叶总黄酮含量范围为13.38～28.67 mg· g-1.结论:本文建立RRLC-Q-TOF-MS联用技术,为鉴定三叶青叶的黄酮成分提供了一种快速、高效的定性分析方法;建立以三乙胺显色的UV-Vis法定量分析三叶青叶总黄酮方法准确,为综合评价三叶青叶的质量提供参考.
