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牻牛儿苗种质资源遗传多样性的ISSR研究
目的:研究牻牛儿苗亲缘关系和遗传多样性.方法:23个样品进行简单序列重复区间(ISSR)分析,利用NTSYS软件计算材料间遗传相似系数,并用UPGMA方法聚类,构建亲缘关系系统图.结果:从100条ISSR引物中筛选出14条多态性明显、反应稳定的引物,在23份供试材料DNA中共扩增出185条谱带,其中多态性条带142条,占76.8％.材料间ISSR标记遗传相似性系数(GS)在0.458 ～0.916.聚类分析结果显示,所有供试材料均可区分开,并聚为6组.结论:分子标记研究结果与牻牛儿苗的地理位置、形态性状存在显著的相关性,较好地揭示了牻牛儿苗种源间的遗传关系,可为牻牛儿苗资源划分和良种选育提供科学依据.
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RP-HPLC同时测定牻牛儿苗中4种酚酸类活性成分含量
目的:建立HPLC同时测定牻牛儿苗中没食子酸,原儿茶酸,柯里拉京,鞣花酸的含量测定方法.方法:采用RPHPLC,AgilentTC-C18色谱柱(4.6mm×250 mm,5μm),0.4％磷酸水溶液-甲醇为流动相梯度洗脱,流速0.8 mL· min-1,检测波长259 nm,柱温30℃.结果:没食子酸,原儿茶酸,柯里拉京,鞣花酸的线性范围为0.059 ～2.360 g·L-1(r=0.999 6),0.017～0.672 g·L-1(r=0.999 9),0.351 ～14.04 g·L-1(r=0.999 9),0.151 ～6.040 g·L-1(r=0.999 8).平均回收率(n=3)分别为99.45(RSD 1.5％),98.65％(RSD 1.7％),100.3％(RSD 2.0％),98.90％(RSD 1.2％).结论:该含量测定的方法快速,准确,可靠,重复性好,可为药材的质量控制提供依据.
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3种基源老鹳草药材无机元素的比较及与土壤相关性分析
目的 比较3种不同来源老鹳草药材中无机元素含量及分析其与土壤中无机元素的相关性.方法 对3种不同来源老鹳草药材及根迹土壤中16种无机元素含量进行测定,所得数据用SPSS17.0软件进行统计分析.并从元素组学的角度建立药材无机元素特征谱.结果 3种不同来源老鹳草药材与土壤中无机元素含量整体呈正相关;采用ANOVA法及Kruskal-Wallis 检验法得出3种不同来源老鹳草药材中所测无机元素除了Cu和Hg以外,其他14种差异均有统计学意义;通过Bayes判别分析得到的3种不同来源老鹳草药材的Fisher线性判别函数可用于鉴别3种不同来源老鹳草药材.结论 3种不同来源老鹳草药材主要通过主动吸收调控无机元素的含量;3种不同来源老鹳草药材中无机元素含量存在差异.
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牻牛儿苗的化学成分研究
目的:研究牻牛儿苗(Erodium stephanianum Willd.)的化学成分.方法:采用硅胶、Sephadex LH - 20柱层析并结合重结晶等方法对牻牛儿苗的95％乙醇提取物的乙酸乙酯萃取部位进行分离纯化,再依据理化性质和波谱数据(包括NMR和MS)对所分的化合物进行结构鉴定.结果:分离并鉴定了5个化合物,分别为:没食子酸( gallic acid,Ⅰ)、山奈酚(kaempferol,Ⅱ)、山奈酚-3 -0 -β -D -吡喃葡萄糖苷(kaempferol -3 -O-β-D- glucopyranoside,Ⅲ)、柯里拉京(corilagin,Ⅳ)、鞣花酸(ellagic acid,Ⅴ).结论:化合物Ⅲ为首次从该植物中发现.实验结果可为牻牛儿苗的进一步研究开发提供依据.
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HPLC法同时测定3种老鹳草中7种成分
目的 建立HPLC法同时测定老鹳草Geranium wilfordii Maxim.、牻牛儿苗Erodium stephanianum Willd.和野老鹳草Geranium carolinianum L.中没食子酸、原儿茶酸、柯里拉京、老鹳草素、鞣花酸、金丝桃苷和槲皮素的含有量.方法 分析采用Agilent 5TC-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相乙腈-0.1％磷酸,梯度洗脱;体积流量1 mL/min;检测波长280 nm(0～32 min)、360 nm (32 ～62 min);柱温30℃.SPSS17.0软件进行数据分析.结果 3种老鹳草中7种成分含有量均依次为老鹳草素＞柯里拉京＞鞣花酸＞没食子酸＞原儿茶酸＞金丝桃苷＞槲皮素.其中,没食子酸、槲皮素含有量呈显著性差异(P＜0.05).结论 7种成分含有量在牻牛儿苗和野老鹳草中相近,而在老鹳草中较低.
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3种正品老鹳草的鉴别
目的为建立增补药典2000年版中牻牛儿苗、老鹳草、野鹳草的鉴别提供实验依据。方法 采用显微特征、理化和薄层色谱的鉴别.结果 3种正品老鹳草具不同鉴别特征.结论能更准确地把3种正品老鹳草区别.
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牻牛儿苗总黄酮提取工艺优化及含量测定研究
目的 优化牻牛儿苗佳提取工艺,并对不同种质来源的药材进行含量测定.方法 通过正交试验法考察不同因素和水平对提取工艺的影响,优化提取工艺.并按照优化后的工艺对不同产地牻牛儿苗中总黄酮进行提取并进行含量测定.结果 优化后的提取条件为40倍量60％乙醇回流提取3次,每次1h.对全国26个不同产地牻牛儿苗总黄酮含量进行测定,其范围为2.47％ ～16.81％.结论 该实验方法简便,准确,为工业化生产提供一定的实验依据；不同产地药材总黄酮含量差异明显,建议入药时充分考虑产地因素.
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正交设计法优选牻牛儿苗总黄酮的提取工艺
目的:对老鹳草总黄酮的提取工艺进行优化.方法:采用正交设计,以老鹳草药材总黄酮的提取率为考察指标,考察乙醇浓度、提取时间、乙醇用量、提取次数4个因素对提取率的影响.结果:优化提取工艺条件为4倍量90%乙醇、提取3次、每次1h,验证性实验符合标准.结论:该工艺方法经实验验证稳定、可靠、操作可控,重现性好,对进一步的工艺开发有较好的参考价值.
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牻牛儿苗化学成分研究
目的 对牻牛儿苗的化学成分进行研究.方法 利用溶剂提取和凝胶柱层析进行分离,根据化合物的理化性质和光谱数据鉴定其结构.结果 得到8个化合物,分别确定为:没食子酸(1),3-O-galloyl-(-)-shikimic acid(2),3,4-di-O-galloyl-(-)-shikimic acid(3),3,5-di-O-galloyl-(-)-shikimic acid(4),β-谷甾醇(5),山柰酚(6),槲皮素(7)和鞣花酸(8).结论 化合物2～8都是首次从该植物中分离得到.
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牻牛儿苗HPLC指纹图谱及模式识别研究
目的:研究牻牛儿苗药材的质量控制方法.方法:采用HPLC法建立牻牛儿苗药材的HPLC指纹图谱,收集不同产地的23批样品进行测定,并使用聚类分析和主成分分析对指纹图谱进行模式识别研究.结果:根据主成分分析和聚类分析结果,筛选14批样品建立指纹图谱共有模式.结论:该方法可用于牻牛儿苗质量控制及综合评价.
