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二脱甲氧基姜黄素与阿霉素联合应用对HL-60/ADR的生长抑制作用
目的:研究二脱甲氧基姜黄素(Bdmc)与阿霉素(ADR)联合应用对人白血病多药耐药细胞株(HL-60/ADR)的生长抑制作用.方法:HL-60/ADR细胞2×103/孔,1,2,4,8μmol·L-1 Bdmc分别与0.4,0.8,1.6,3.2μmol· L-ADR同时联合给药,48 h后,MTT法测定两种药物的体外杀伤作用.6,12,24,48μmol·L-1Bdmc分别与0.08,0.2,0.4,1.0μmol·L-1ADR序贯联合给药,48 h后,应用金氏公式进行序贯联合用药效果分析.结果:单独ADR 0.4,0.8μmol·L-1时抑制率6.9％,11.8％,同时联合加8μmol·L-Bdmc时,抑制率达到94％以上.1～8μmol·L-1Bdmc和0.8～3.2 μmol·L-1ADR同时联合作用HL-60/ADR细胞可产生单纯相加至增强的协同杀伤效果.序贯给药法中,先给Bdmc后给SDR结果为协同作用,先给ADR后给Bdmc实验结果为拮抗作用.结论:Bdmc与ADR同时用药可产生协同作用,二者序贯联合用药仅产生单向协同作用.
关键词： 白血病 抗药性 阿霉素 二脱甲氧基姜黄素 HL-60/ADR细胞 -
3种姜黄色素干预ox-LDL促平滑肌细胞增殖与影响LDL-R表达的研究
目的:研究3种不同结构的姜黄色素单体对牛主动脉平滑肌细胞(VSMC)增殖及牛VSMC低密度脂蛋白受体(LDL-R)表达的影响,解析构效关系.方法:用MTT比色法和流式细胞仪观察3种不同结构的姜黄色素单体对ox-LDL促牛VSMC增殖及对VSMC LDL-R表达的影响.结果:ox-LDL在2.5,5,10mg·L-1时,对VSMC有明显的促增殖作用,P＜0.05.姜黄素16.5,33,66μmol·L-1,一脱甲氧基姜黄素(简称一脱)33,66μmol·L-1和二脱甲氧基姜黄素(简称二脱)66μmol·L-1对10mg·L-1ox-LDL培养的VSMC有明显的抑制作用,P＜0.05.3种姜黄色素的抑制率为姜黄素＞一脱＞二脱.3种姜黄色素在66,33,16.5 μmol·L-1时对VSMCLDL-R的表达均有明显的上调作用,其中姜黄素16.5μmol·L-1组与正常组比较,P＜0.05,其他组与正常组比较P＜0.01,上调作用二脱＞一脱＞姜黄素,经组间方差分析,P＜0.01,与姜黄色素抑制牛VSMC增殖作用相反.结论:3种不同结构姜黄色素单体能明显抑制ox-LDL促牛VSMC增殖作用,上调牛VSMC LDL-R表达,从而有可能延缓动脉粥样硬化的发生发展过程.
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HPLC法测定协日嘎四味片中姜黄素类成分的含量
目的:建立同时测定蒙药协日嘎四味片中姜黄素、脱甲氧基姜黄素、二脱甲氧基姜黄素含量的方法.方法:采用高效液相色谱(HPLC)法.应用VP-ODS(150mm×4.6mm,5μm)色谱柱;以乙睛-4%冰乙酸溶液(48∶52)为流动相;流速为0.6ml/min:柱温为30℃;检测波长为425nm.结果:理论板数按姜黄素峰计算不低于4000的条件下:姜黄素、脱甲氧基姜黄素、二脱甲氧基姜黄素基线分离(R>1.5),空白无干扰;线性范围依次为0.0260μg～0.0780μg(r=0.999 9)、0.02525μg～0.07575μg(r=0.999 9)、0.01275μg～0.03825μg(r=0.9998);平均回收率依次为99.85%(RSD=0.70%,n=6)、99.36%(RSD=0.90%,n=6)、99.09%(RSD=0.71%,n=6).结论:本试验方法简便、快捷,结果准确、重复性好.可用于该制剂中姜黄素类的成分的含量测定.
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二脱甲氧基姜黄素对体外HepG2 Caspase-3活性的影响
目的:研究二脱甲氧基姜黄素对体外培养人肝癌细胞HepG2 Caspase-3蛋白酶活性的作用.方法:MTT法检测二脱甲氧基姜黄素对体外培养人肝癌细胞HepG2的抑制作用;分光光度检测其对Caspase-3酶活性的影响;免疫组化法检测其对人肝癌细胞HepG2 Caspase-3蛋白的表达.结果:二脱甲氧基姜黄素对人肝癌细胞HepG2有明显的抑制作用(P＜0.001)且呈剂量关系,与姜黄素有显著差异(P＜0.001);二脱甲氧基姜黄素能增强Caspase-3酶活性,增强Caspase-3蛋白的表达.结论:二脱甲氧基姜黄素能激活Caspase-3蛋白活性,这可能也是它体外抑制肝癌细胞HepG2生长的机理之一.
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二脱甲氧基姜黄素对胰腺癌Panc-1细胞抑制作用的体外实验研究
目的:研究二脱甲氧基姜黄素对人胰腺癌细胞Panc-1的体外抑制作用.方法:提取二脱甲氧基姜黄素;将不同浓度二脱甲氧基姜黄素作用于人胰腺癌细胞Panc-1,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测胰腺癌细胞的增殖活性;采用荧光染料吖啶橙观察二脱甲氧基姜黄素诱导胰腺癌细胞凋亡的形态学变化,流式细胞仪分析二脱甲氧基姜黄素诱导胰腺癌细胞的凋亡率.结果:二脱甲氧基姜黄素对Panc-1细胞具有增殖抑制作用,且具有浓度依赖效应,姜黄素＜二脱甲氧基姜黄素,统计表明有组间差异(P＜0.05);二脱甲氧基姜黄素能诱导人胰腺癌细胞Panc-1凋亡.结论:二脱甲氧基姜黄素能明显抑制人胰腺癌细胞Panc-1的体外增殖.可为临床治疗胰腺癌药物研究提供一种新的方法.
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二脱甲氧基姜黄素对体外培养宫颈癌Hela 细胞 Caspase -8的影响
目的：观察二脱甲氧基姜黄素对体外培养人宫颈癌Hela细胞Caspase-8的作用。方法：MTT法检测二脱甲氧基姜黄素对体外培养人宫颈癌细胞Hela的抑制作用；分光光度计检测其对Caspase-8酶活性的影响；免疫组化法检测其对人宫颈癌细胞Hela Caspase-8蛋白表达的影响。结果：二脱甲氧基姜黄素对人宫颈癌细胞Hela有明显的抑制作用（ P＜0.001），且呈剂量关系，与姜黄素有显著差异（ P＜0.001）；二脱甲氧基姜黄素能增强Caspase-8酶活性，增强Caspase-8蛋白的表达。结论：二脱甲氧基姜黄素能激活Caspase-8蛋白活性，这可能也是其体外抑制宫颈癌细胞Hela生长的机理之一。
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天然姜黄素类化合物的合成
目的 以化学合成法制备天然姜黄素类化合物.方法 以对羟基苯甲醛或香草醛和乙酰丙酮为原料经硼络合保护,分别合成姜黄素、一脱甲氧基姜黄素和二脱甲氧基姜黄素,测定熔点,并以氢谱进行结构解析.结果 姜黄素、一脱甲氧基姜黄素和二脱甲氧基姜黄素合成品分别为亮黄色、橙黄色和橙红色粉末,氢谱所确证的结构与已知结构一致.结论 本合成法操作简单,条件温和,可在短时间内制备大量天然姜黄素类化合物,效率较传统的提取分离法大大提高.
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HPLC法测定姜黄提取物中有效成分含量
目的:建立高效液相色谱法同时测定姜黄提取物中姜黄素、一脱甲氧基姜黄素、二脱甲氧基姜黄素的含量.方法:采用C18色谱柱(150 mm×6 mm,5μm),流动相为乙腈-水-冰乙酸(39∶57∶4),流速为1.4 ml· min-1;检测波长:428 nm;柱温:35℃;进样量:20μl.结果:同时测定了姜黄素、一脱甲氧基姜黄素、二脱甲氧基姜黄素的含量,三者的线性范围分别为81.31～650.50 μg ·ml-1,26.93 ～215.42μg· ml-1,16.32～130.54 μg ·ml-1.平均回收率分别为100.9％,100.9％,100.6％,RSD分别为1.7％,1.2％,1.5％(n=9).结论:该方法简便、准确、重复性好,可用于姜黄提取物中有效成分的测定.
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高效液相色谱法同时测定协日嘎四味汤胶囊中姜黄素、脱甲氧基姜黄素、二脱甲氧基姜黄素的含量
目的 建立同时测定协日嘎四味汤胶囊中姜黄素、脱甲氧基姜黄素、二脱甲氧基姜黄素含量的方法.方法 采用高效液相色谱法.应用Agilent ZORBAX SB-C18(4.6 mm×l50 mm,5 μm)色谱柱;以乙腈-0.4%冰醋酸溶液(48∶52)为流动相;流速为0.8 mL·min-1;柱温为30℃;检测波长为430 nm.结果 姜黄素、脱甲氧基姜黄素、二脱甲氧基姜黄素基线分离,线性范围分别为0.508~4.572、0.516~4.644、0.253~2.277 μg·mL-1;平均回收率依次为99.5 %、99.0%、98.8%,RSD分别为1.5%,1.7%、2.3%.结论 本试验方法简便、快捷,结果准确、重复性好,可用于该制剂中姜黄素类成分的含量测定.
