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断藤益母汤对破骨细胞RANKL信号通路及MMP-9的影响
目的:探讨断藤益母汤(DTYMD)对破骨细胞(OC)核转录因子-κB(NF-κB)受体活化因子配体(RANKL)信号通路及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的影响及其骨保护的作用机制.方法:通过诱导RAW264.7巨噬细胞建立体外破骨细胞培养体系;设空白组,模型组,DTYMD(400,600,800,1 000 mg· L-1)组和甲氨蝶呤(2 mg· L-1 )组,然后通过抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色对破骨细胞进行鉴定;细胞增殖检测(CCK-8)各组细胞生存率;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测RANKL信号通路关键蛋白表达;酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组细胞MMP-9表达水平的变化.结果:TRAP染色显示,与模型组相比, DTYMD 400,600 mg·L - 1组融合细胞数量有所减少,但差异无统计学差异;DTYMD 800,1 000 mg· L-1组融合细胞数目显著减少(P＜0.01).CCK-8结果显示,与模型组比较,DTYMD 600,800,1 000 mg· L -1组和甲氨蝶呤2 mg· L-1组生存率明显下降(P＜0.05,P＜0.01). Western blot结果显示,与模型组相比,DTYMD 1000 mg· L-1组、甲氨蝶呤2 mg· L 组中RANKL蛋白表达有所下降(P＜0.05).DTYMD各组中的OPG蛋白表达水平无明显变化.ELISA结果显示,与模型组相比,DTYMD各组及甲氨蝶呤组中的MMP-9表达水平均有所下降,且DTYMD质量浓度越高,下降越明显(P＜0.05,P＜0.01).结论:断藤益母汤可能是通过下调RANKL和MMP-9的表达以及抑制破骨细胞的分化和增殖而起到骨保护作用.
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断藤益母汤抑制PI3K/AKT通路诱导类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞凋亡
目的:探讨PI3K/AKT通路在断藤益母汤诱导人类风湿关节炎(RA)成纤维样滑膜细胞(FLSs)凋亡中的作用.方法:收集RA患者的滑膜组织,组织块法培养RA FLSs;用不同浓度的断藤益母汤处理细胞后,CCK-8法检测RA FLSs活力;Annexin V-FITC/PI检测RA FLSs凋亡率;Western blot法检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2,P I3K/A KT通路相关蛋白表达水平.结果:与空白对照组比较,随着断藤益母汤浓度的增加可显著抑制RA FLSs活力(P＜0.05,P＜0.01),诱导RA FLSs发生凋亡(P＜0.05,P＜0.01);Bcl-2及PI3K和AKT蛋白磷酸化表达水平明显降低(P＜0.05),Bax表达水平上升(P＜0.05),呈现剂量依赖性.PI3K蛋白抑制剂(LY294002)干扰后增强了断藤益母汤对RA FLSs的作用:与断藤益母汤组比较,LY294002联合断藤益母汤组细胞活力显著下降(P＜0.05),凋亡率显著升高(P＜0.05);Bcl-2及AKT蛋白磷酸化表达水平明显降低(P＜0.05),Bax表达水平上升(P＜0.05).结论:断藤益母汤可能通过抑制PI3K/AKT通路诱导RA FLSs凋亡.
关键词： 断藤益母汤 类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞 凋亡 PI3K/Akt通路 -
断藤益母汤对育龄期女性类风湿关节炎患者卵巢功能的影响
目的 观察断藤益母汤对育龄期女性类风湿关节炎患者卵巢储备功能的影响. 方法 将60例育龄期女性类风湿关节炎患者随机分为试验组和对照组各30例.试验组给予断藤益母汤,每日1剂;对照组给予甲氨蝶呤片,每次10 mg,每周1次.两组疗程均为3个月经周期.比较两组治疗后月经情况,治疗前后检测血清促卵泡生成素(FSH)、促黄体生成素(LH)、雌二醇(E2)、抗苗勒氏管激素(AMH)水平及子宫内膜厚度、子宫及卵巢体积、窦状卵泡数、子宫及卵巢动脉阻力指数.结果 试验组月经紊乱率明显高于对照组(P＜0.01);治疗后试验组FSH、LH水平较治疗前显著升高,E2、AMH显著降低(P＜0.01),对照组治疗前后FSH、LH、E2、AMH水平无明显变化(P＞0.05);试验组治疗后FSH、LH、E2、 AMH水平与对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).试验组窦状卵泡数阻力指数、卵巢动脉阻力指数较对照组升高(P＜0.05). 结论 断藤益母汤能降低育龄期女性类风湿关节炎患者卵巢储备功能,临床应慎用.
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断藤益母汤联合来氟米特治疗类风湿关节炎的疗效观察
目的:分析和研究应用断藤益母汤联合来氟米特治疗类风湿关节炎的临床疗效和价值.方法:选取我院收治的62例类风湿性关节炎患者按照随机分为治疗组和对照组,治疗组应用中药断藤益母汤联合来氟米特治疗,对照组应用来氟米特治疗,疗程为半年,随访观察两组患者治疗效果.结果:治疗组总有效率为90.3％,对照组为71.0％,治疗组优于对照组,经分析,差别具有统计学意义(P＜0.05).结论:应用断藤益母汤联合来氟米特治疗类风湿关节炎,安全可靠,疗效确切,具有临床应用的重要现实意义.
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断藤益母汤对育龄期女性类风湿关节炎患者卵巢功能的影响
目的:探讨断藤益母汤对育龄期女性类风湿关节炎患者卵巢功能的影响.方法:选取我院65例育龄期女性类风湿关节炎患者,随机分为对照组32例,观察组33例,对照组予以甲氨蝶呤片治疗,观察组予以断藤益母汤治疗,比较两组风湿性关节炎活动度评分(DAS-28)及子宫内膜厚度、卵巢体积、卵巢动脉阻力指数、窦状卵泡数目.结果:两组治疗后DAS-28评分均较治疗前显著降低,观察组治疗后卵巢动脉阻力指数高于对照组,窦状卵泡数目小于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05).结论:断藤益母汤可改善育龄期女性类风湿关节炎患者关节活动度及卵巢功能.
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断藤益母汤对类风湿关节炎患者血清骨代谢指标的影响
目的:观察断藤益母汤对类风湿性关节炎(Rheumatoid arthritis,RA)患者临床血清骨代谢指标的影响.方法:77例类风湿关节炎患者随机分为对照组38例、试验组39例.对照组予甲氨蝶呤片治疗,试验组予断藤益母汤治疗.分别在治疗前及治疗后第4、8、12周记录两组患者的ESR、CRP、SDAI评分等疾病活动指标及PINP、N-MID、25-(OH) VitD、β-CTX等骨代谢指标水平,并观察不良反应方发生情况.疗程均为12周.结果:试验组总有效率为94.44％,对照组为75％,试验组明显优于对照组,两组差异有统计学意义(P＜0.05);治疗第4周,试验组ESR、CRP、SDAI评分开始改善(P＜0.05),早于对照组,治疗12周后试验组ESR水平、SDAI评分优于对照组(P＜0.05),而两组CRP水平相当(P＞0.05);两组比较,试验组能够较快改善骨代谢指标,治疗12周后,试验组P1 NP、B-CTX水平优于对照组(P＜0.05),治疗前后两组25-(OH) VitD水平变化无统计学意义(P＞0.05).结论:断藤益母汤能够在控制RA疾病活动的同时,有效改善RA骨代谢水平,抑制骨破坏,促进骨形成.
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断藤益母汤对佐剂性关节炎大鼠生殖功能的干预研究
目的 通过观察断藤益母汤对佐剂性关节炎大鼠脏器系数和血清激素水平的变化,探讨其对生殖功能的影响.方法 将64只大鼠分成8组,予完全弗氏佐剂建立模型.给药36d,计算脏器系数,观察血清雌激素(E2)、黄体生成素(LH)、卵泡雌激素(FSH)、苗勒氏管抑制物(AMH)水平及组织病理切片.结果 与模型组对比,给药单方组脏器系数及血清E2和AMH水平下降,LH和FSH水平上升(P＜0.05);与单方低剂量组对比,复方低剂量组E2和AMH水平上升,LH和FSH水平下降(P＜0.05).结论 断藤益母汤可以减轻昆明山海棠对佐剂性关节炎大鼠生殖系统的毒副作用,保护卵巢功能.
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断藤益母汤含药血清对人类风湿关节炎滑膜成纤维细胞增殖及TLR4表达的影响
目的 探讨断藤益母汤(DYD)含药血清对体外培养的类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者滑膜成纤维细胞(fibrolast-like synoviocytes,FLS)增殖以及TLR4(Toll like receptor 4)mRNA表达的影响和作用机制.方法 体外培养RA-FLS,取第3～5代细胞,分别加入来氟米特和DYD高、中、低剂量家兔含药血清,空白组加入正常家兔血清,MTT法检测24 h、48 h、72 h后各组含药血清对RA-FLS的影响.取RA -FLS,空白组不加脂多糖(LPS),阳性对照组加LPS20 μg·mL-1,实验组在加入LPS后分两组,分别加入来氟米特和细胞抑制率高的DYD含药血清.Realtime-PCR法检测以上4组细胞TLR4 mRNA的表达.结果 来氟米特和DYD高剂量组含药血清作用48 h、72 h,二者均能显著抑制RA-FLS增殖(P＜0.05);对LPS诱导的TLR4的mRNA表达也有显著抑制作用(P＜0.05)；来氟米特和DYD药效相当,两者比较差异无统计学意义.结论 断藤益母汤高、中剂量含药血清作用48 h、72 h后能显著抑制RA-FLS增殖,且高剂量血清可下调LPS诱导的TLR4mRNA表达,这可能是该方治疗RA的机制之一.
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断藤益母汤对比常规用药对类风湿关节炎患者血沉、C-反应蛋白及类风湿因子影Ⅱ的研究
目的:观察断藤益母汤对比常规用药对类风湿关节炎患者临床疗效.方法:选取2014年6月～ 2016年6月在本院专科门诊及住院治疗的226名类风湿关节炎患者.将226名患者按113人一组随机分为两组,试验组服用断藤益母汤;对照组服用来氟米特片.持续用药3个月后观察患者的关节肿胀关节数、压痛关节数、晨僵时间、患者对疼痛度和病情整体的VAS评分以及医生对患者病情的VAS评分、健康状况问卷(HAQ)临床症状指标的差别和血沉(ESR)、C-反应蛋白(CRP)以及类风湿因子(RF)指标的不同.结果:两组患者通过治疗都能达到很好的效果,试验组在关节肿胀关节数、压痛关节数、晨僵时间、患者对疼痛度和病情整体的VAS评分以及医生对患者病情的VAS评分、健康状况问卷(HAQ)的临床指标与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05);试验组在血沉(ESR)、C-反应蛋白(CRP)以及类风湿因子(RF)与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论:断藤益母汤对类风湿关节炎患者具有改善关节活动功能及降低风湿炎症指标的作用,对比来氟米特改善关节以及降低指标的作用更明显.
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断藤益母汤含药血清对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞增殖及TNF-α分泌的影响
目的:探讨断藤益母汤含药血清对体外培养的类风湿关节炎患者滑膜成纤维细胞增殖以及肿瘤坏死因子-α的影响和机制.方法:体外培养类风湿关节炎滑膜成纤维细胞,取第3 ～ 5 代细胞,分别加入按临床常规口服剂量折算制取的来氟米特和断藤益母汤家兔含药血清,对照组加入正常家兔血清,MTT 法检测24 h、48 h、72 h 后各组含药血清对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞的影响.ELISA 法检测72 h后各组细胞培养上清肿瘤坏死因子-α的含量.结果:相对于对照组,来氟米特和断藤益母汤含药血清作用48 h、72 h,二者均能显著抑制类风湿关节炎滑膜成纤维细胞增殖(Ρ < 0.05),72 h 后来氟米特组抑制率明显高于断藤益母汤(Ρ < 0.05);相对于对照组,两种含药血清对肿瘤坏死因子-α也有显著抑制作用(Ρ < 0.05),组间差异不明显(Ρ > 0.05);结论:成人临床常规剂量的断藤益母汤含药血清作用48 h、72 h 后能显著抑制类风湿关节炎滑膜成纤维细胞增殖,并可降低该细胞肿瘤坏死因子-α分泌量,这可能是该方药改善类风湿关节炎患者临床症状的潜在机制之一.
