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附子理中汤对脾阳虚大鼠AQP4-ANP-pGC轴的影响
目的:从水通道蛋白4-心房利尿钠钛-非可溶性鸟苷酸环化酶(aquaporin4-atrial natriuretic peptide-particulate guanylate cyclase,AQP4-ANP-pGC)通路探讨附子理中汤温阳健脾祛湿的作用机制.方法:选清洁级Wistar大鼠120只,分为空白组、假手术组、模型组和附子理中汤高、中、低剂量组共6个组,每组20只.空白组常态饲养.假手术组与模型组采用“肩胛骨间棕色脂肪组织(brown adipose tissue,BAT)切除术+高脂饲料喂养+隔日寒冷环境刺激”方法造模(假手术组只找到BAT但不切除).术后第1天始喂高脂饲料共30 d.在模型组基础上,高、中、低剂量各组分别予附子理中汤40,20,10 g·kg-1·d-1灌胃,其他组给予等体积的生理盐水灌胃.于给药30 d后(其中模型组于造模成功后第1天)取材,苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠胃窦与回肠组织病理形态学变化;酶联免疫吸附法(ELISA)检测ANP含量;实时荧光定量PCR(Real-time PCR)法检测AQP4 mRNA表达情况;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测AQP4含量.结果:大鼠胃窦与回肠组织HE染色光镜下观察可见,附子理中汤各剂量组大鼠胃肠组织病理学改变均有不同程度的减轻,以高剂量组效果明显.与空白组和假手术组相比,模型组AQP4,ANP含量及AQP4 mRNA相对表达量降低(P ＜0.05,P＜0.01).与模型组相比,中、高剂量组AQP4,ANP含量及AQP4 mRNA相对表达量升高(P＜0.05,P＜0.01).结论:附子理中汤可能通过影响AQP4-ANP-pGC通路中AQP4,ANP含量及AQP4 mRNA表达以参与脾阳虚证大鼠水液代谢的调节.
关键词： 附子理中汤 水通道蛋白 心房利尿钠肽 非可溶性鸟苷酸环化酶 -
附子理中汤对脾阳虚大鼠ANP含量、pGC mRNA表达及胃肠动力学的影响
目的:观察附子理中汤对脾阳虚大鼠心房利尿钠肽(ANP)含量和非可溶性鸟苷酸环化酶(pGC)mRNA表达及胃肠动力学的影响.方法:清洁级Wistar大鼠100只随机分为对照组、模型组、附子理中汤低、中、高剂量组5组,每组20只.对照组常态饲养.模型组采用“肩胛骨间棕色脂肪组织(BAT)切除术+高脂饲料喂养+隔日寒冷环境刺激”方法造模.术后第1天喂高脂饲料共3周.在模型组基础上,附子理中汤低、中、高剂量组术后第1天按10,20,40 g·kg-1 ig给药,对照组及模型组则给予等容量的生理盐水,每天1次,连续3周.3周后第1天测空肠肌活动,然后取结肠标本,ELISA法检测ANP含量,RT-PCR法检测pGC mRNA表达.结果:和对照组比较模型组的ANP含量、pGC mRNA相对表达量降低(P＜0.05或P＜0.01),慢波频率显著下降(P＜0.01),快波出现频率、大振幅、每丛快波数均增高(P＜0.05或P＜0.01);纵肌收缩力振幅和环肌收缩力振幅均显著增大(P＜0.01).和模型组比较,附子理中汤高剂量组的ANP含量、pGC mRNA相对表达量升高(P ＜0.05或P＜0.01);附子理中汤中剂量组慢波频率上升(P＜0.05),快波出现频率、大振幅、每丛快波数均减小(P＜0.05或P＜0.01);附子理中汤高剂量组慢波频率显著上升(P＜0.01),快波出现频率、大振幅、每丛快波数均显著减小(P均＜0.01);中剂量组纵肌收缩力振幅减小(P＜0.05),高剂量组纵肌收缩力振幅和环肌收缩力振幅均显著减小(P＜0.01).结论:附子理中汤“止泻”的一种可能机制在于一方面上调ANP的含量及pGC mRNA表达量,进而恢复正常胃肠动力学,另一方面通过对水盐重吸收的调节作用而起效.
关键词： 附子理中汤 脾阳虚 心房利尿钠肽 非可溶性鸟苷酸环化酶
