首页 > 文献资料
-
断藤益母汤抑制PI3K/AKT通路诱导类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞凋亡
目的:探讨PI3K/AKT通路在断藤益母汤诱导人类风湿关节炎(RA)成纤维样滑膜细胞(FLSs)凋亡中的作用.方法:收集RA患者的滑膜组织,组织块法培养RA FLSs;用不同浓度的断藤益母汤处理细胞后,CCK-8法检测RA FLSs活力;Annexin V-FITC/PI检测RA FLSs凋亡率;Western blot法检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2,P I3K/A KT通路相关蛋白表达水平.结果:与空白对照组比较,随着断藤益母汤浓度的增加可显著抑制RA FLSs活力(P＜0.05,P＜0.01),诱导RA FLSs发生凋亡(P＜0.05,P＜0.01);Bcl-2及PI3K和AKT蛋白磷酸化表达水平明显降低(P＜0.05),Bax表达水平上升(P＜0.05),呈现剂量依赖性.PI3K蛋白抑制剂(LY294002)干扰后增强了断藤益母汤对RA FLSs的作用:与断藤益母汤组比较,LY294002联合断藤益母汤组细胞活力显著下降(P＜0.05),凋亡率显著升高(P＜0.05);Bcl-2及AKT蛋白磷酸化表达水平明显降低(P＜0.05),Bax表达水平上升(P＜0.05).结论:断藤益母汤可能通过抑制PI3K/AKT通路诱导RA FLSs凋亡.
关键词： 断藤益母汤 类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞 凋亡 PI3K/Akt通路 -
类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞背景特异性microRNA-靶基因及microRNA-小分子互作网络分析
目的 建立类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(rheumatoid arthritis fibroblast like synoviocytes,RA-FLS)背景特异性的microRNA-靶基因和microRNA-小分子互作网络.方法 利用microRNA PCRArray数据(GSE72564)筛选出RA-FLS和骨关节炎对照样本中差异表达的microRNAs,整合多个microRNA-靶基因互作数据库,构建RA-FLS差异表达microRNA与靶基因的功能调控网络;整合microRNA-小分子互作数据,构建RA-FLS差异表达microRNA-小分子调控网络,计算网络中心性,获得核心调控micmRNA及小分子药物节点.结果 获得RA-FLS差异表达microRNA 63个,建立RA-FLS背景特异性的microRNA-靶基因和microRNA-小分子互作网络,筛选出hsa-let-7b-5p、hsa-mir-15b-5p、hsa-mir-218-5p、hsa-mir-30a-5p、hsa-mir-520d-3p五个关键microRNA,5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil)、glucose、1,2,6-Tri-O-galloyl-beta-D-glucopyranose (TGGP)、糖皮质激素(glucocorticoid)四种与RA-FLS密切相关的活性小分子.结论 RA-FLS背景特异性的microRNA-靶基因和microRNA-小分子互作网络的构建,尤其是中心性microRNA和小分子的筛选,有望成为RA-FLS研究的潜在靶点.
关键词： 类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞 microRNA 靶基因 小分子 -
基于血栓素合酶的类风湿关节炎血瘀病机的分子基础
目的：探讨类风湿关节炎（ RA）血瘀病机的分子基础。方法用肿瘤坏死因子－α（ TNF－α）诱导RA成纤维样滑膜细胞MH7A，构建RA体外模型；采用MTS法检测甲氨蝶呤（MTX）及青藤碱（SIN）对MH7A细胞增殖的影响；采用Western blot法检测不同浓度MTX及SIN对α辅肌动蛋白－1（ACTN1）、血栓素合酶（TxAS）、环氧酶－2（COX－2）蛋白表达的影响，并检测ACTN1、TxAS蛋白在RA不同证型滑膜组织中的表达。结果 MTS结果显示，50、200、400μg／mL的MTX及SIN作用24、48、72 h均能抑制MH7A细胞的增殖；Western blot结果显示， MTX及SIN均能抑制ACTN1、TxAS、COX－2的表达，且在TNF－α诱导模型中更显著；MH7A细胞中ACTN1、Tx-AS、COX－2的表达趋势具有一致性；寒湿痹阻证、肝肾不足证滑膜组织中ACTN1、TxAS的表达均显著高于湿热痹阻证。结论 TxAS可以被经典抗风湿药物MTX和SIN所调节，且与RA滑膜细胞增殖与侵袭的标志物ACTN1表达一致，说明TxAS可能是RA血瘀病机的分子基础之一。
关键词： 类风湿性关节炎 血瘀 病机 血栓素 类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞
