375 利用固相提取配伍麻黄方剂中的生物碱

374 用反相固相提取对罂粟属植物中生物碱进行纯化和HPLC分析

9种WADA禁用生长激素释放肽和生长激素促分泌素的HPLC-MS/MS检测及尿中稳定性研究

目的:选取世界反兴奋剂机构(WADA)禁用的7种生长激素释放肽(GHRP-1,GHRP-2,GHRP-4,GHRP-5,GHRP-6,Hexarelin和Alexamorelin)和2种生长激素促分泌素(Anamorelin和Ipamorelin)为研究对象,建立人尿中的HPLC-MS/MS检测方法,进行稳定性实验.方法:使用Oasis(R)WCX固相提取小柱(1cc,30rmg)对尿样进行化学前处理,尿样加入内标后离心,取1mL加入小柱,依次用5％ NH4OH和20％ CH3CN清洗后,用含2％甲酸的水/乙腈(1/3)洗脱液洗脱,35℃氮气流下吹干,复溶后进样于LC-MS/MS.使用1290/6470液相色谱质谱仪和Zorbax 300SB-C18色谱柱进行定性分析,流动相采用含0.2％甲酸的水/乙腈体系.结果:检测限根据不同物质分布在0.01～0.5 ng/mL(S/N＞3).回收率分布在40％～76％之间,日内精密度和日间精密度均小于15％,尿中基质无明显干扰.室温,冷藏条件储存和反复冻融对Anamorelin、GHRP-2、GHRP-4和GHRP-5有明显影响.结论:建立了尿中9种生长激素释放肽和生长激素促分泌素的HPLC-MS/MS检测方法,方法简单,特异性、灵敏度均可满足WADA实验室国际标准和技术文件要求.现已应用于我实验室的常规检测.尿样在传送、检测及实验室长期保存过程中应尽量避免反复冻融.

大鼠肝组织中普伐他汀的高效液相色谱法测定

目的　建立反相色谱法测定普伐他汀在大鼠肝组织中的含量。方法　肝组织样品加普伐他汀和内标(丙炎松)，用Bond Elut C18小柱进行固相提取，然后用色谱方法分析。采用C18反相色谱柱，流动相为0.035 mol*L-1磷酸氢二钠缓冲液(pH 3.0)-乙腈(155∶42)。结果　普伐他汀的线性范围为0.05-10.00 μg*g-1肝，回归方程为Y=0.1843X-4.238×10-3 (γ=0.9934)；用普伐他汀标准液试验，低检测限达13 ng*mL-1，定量限为50 ng*g-1肝(RSD<20%)；不同浓度固相提取回收率平均为80.8%；RSD为4.3%-15%。用此法测定了Lewis大鼠(ig 20 mg*kg-1)肝组织中普伐他汀的含量，并绘制了药时曲线。结论　方法灵敏，可用于普法他汀的组织分布和药动学研究。

气相色谱-质谱法检测水中苯系物

水中苯系物的检测方法主要为二硫化碳提取后的气相色谱测定法[1].从水中提取有机物的常用方法为液-液提取法,由于苯系物多具挥发性,在挥散溶剂时易造成被测组分损失.固相萃取法为近年来发展及应用广泛的样品提取技术,可以在柱上净化富集样品,具有提取效率高,基质干扰小等特点,适用于液体样品的提取,尤其在挥发性有机物的提取中占有优势[2].气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)集色谱的高分辨能力与质谱的高鉴定能力于一体,依据化合物的质谱碎片定性,可以不需要标准品的比对,在定性分析中具有专属性强的特点,适于未知物的检测.本文建立了C18小柱固相提取,GC-MS法同时检测水中多种苯系物的方法,对水中多种苯系物的小检测限为10 ng/ml,回收率均可达90%以上.本法用于某污染水样的检测,检出了样品中存在的多种苯系物.

高效液相色谱-电喷雾串联三重四级杆质谱法测定水中微囊藻毒素

目的 研究利用固相提取净化、高效液相色谱-电喷雾串联三重四级杆质谱检测分析水中微囊藻毒素MC-LR和MC-RR.方法 水样品经玻璃纤维滤纸过滤后,经C18固相提取柱富集净化,氮吹后定容.流动相中添加0.1％甲酸,采用梯度洗脱模式,经C18反相色谱柱分离,以电喷雾串联三重四级杆质谱定性、定量测定.结果 线性定量范围0.1～5.0μg/kg,检测低限为MC-LR 0.01 μg/kg,MC-RR 0.02 μg/kg.结论 此方法操作简便、定性定量能力较强,可作为检测水质量和评估食品安全风险的可靠方法.

普伐他汀在大鼠血浆中的固相提取和反相高效液相色谱法测定

目的:建立反相高效液相色谱法测定普伐他汀在大鼠血浆中的含量.方法:空白血浆加普伐他汀和内标,用Bond Elut C18 小柱进行固相提取,然后用色谱方法分析.采用Puroshper RP-C18反相色谱柱(5 μm,250 mm×4 mm), Lichrospher 100 RP-18预柱(5 μm,4 mm×4 mm),流动相为0.035 mmol*L-1磷酸二氢钠缓冲液(用磷酸调pH 3.0)-乙腈(13∶7),流速1 mL*min-1,检测波长239 nm,柱温40 ℃,进样量100 μL.结果:普伐他汀在血中的线性范围为 10 ～ 400 ng * mL-1,r=0.999 7;低检测限用标准液试验达 2 ng*mL(S/N=3),用加标样血浆试验,方法定量限为10 ng*mL-1血,RSD＜2 0%;不同浓度固相提取回收率平均为71.48%;日内差平均为13%,日间差平均为19%.用上述色谱方法测定了普伐他汀在大鼠血浆中(Lewis大鼠,灌胃20 mg*kg-1)的含量, 并绘制药时曲线.结论:方法实用有效,可用于药代动力学研究.

气相色谱质谱联用法检测大鼠尿液中2C-B及其代谢物

目的 研究4-溴-2,5-二甲氧基苯乙胺(2C-B)在大鼠体内的代谢物以及代谢途径.方法 取 Wistar大鼠3只,以2C-B灌胃,收集24h内尿液,用β葡萄糖醛酸酶水解,Oasis HLB柱固相提取,DB-35MS柱分析,气相色谱质谱联用检测.结果 从大鼠尿液中检出6种2C-B的代谢产物,分别为:4-溴-2-羟基-5-甲氧基苯乙醇、4-溴-2,5-二甲氧基苯乙醇、4-溴-2-羟基-5-甲氧基苯乙酸、4-溴-2,5-二甲氧基苯乙酸、1-乙酰氨基-2-(4-溴-5-羟基-2-甲氧基苯)乙烷和1-乙酰氨基-2-(4-溴-2-羟基-5-甲氧基苯)乙烷.未检出2C-B原药.结论 2C-B在大鼠尿液中主要以代谢物形式存在,其在大鼠体内至少存在两种代谢途径:第一种是2C-B的2位和5位氧上去甲基后氨基被乙酰化;第二种是2C-B去氨基生成醛,接着被还原或氧化生成醇和羧酸.

SPE-GC/MS法检测大鼠尿中尼美西泮及其代谢物

目的 检测尼美西泮阳性大鼠尿液中的代谢物.方法 2只Wistar大鼠分别喂食半粒尼美西泮药丸,收集24h内尿液,用β葡萄糖醛酸酶水解,Oasis(R)HLB柱固相提取,以DB-35 MS柱为分离柱,气相色谱质谱联用法检测.结果 从大鼠尿液中检出尼美西泮的4种代谢物:7-乙酰氨基尼美西泮、7-乙酰氨基硝基安定、7-氨基尼美西泮和2一氨基-5-硝基苯基苯甲酮及少量尼美西泮原体.结论 尼美西泮在大鼠体内易代谢,在尿液中的主要代谢物为7-乙酰氨基尼美西泮和7-乙酰氨基硝基安定.

肝中对硫磷的固相萃取一电子捕获检测气相色谱分析法

目的建立肝中对硫磷的快速、灵敏、可靠的GC/ECD分析方法.方法肝匀浆加内标甲基对硫磷,用乙腈浸提,浸提液加6%高氯酸稀释,稀释的上清液用GDX403树脂进行固相提取,提取物用HP-5色谱柱和电子捕获检测器进行气相色谱分析.结果提取率92.3%,检测限7.8ng/g,线性范围0.04～4.0μg/g,回收率99.6%±6.2%(Mean±CV,n=5).结论方法简便、灵敏适合于实际案件检验.

尿中吗啡的氮磷检测--气相色谱分析法

目的建立尿中吗啡的简便快速、灵敏可靠的GC/NPD分析方法.方法样品尿加内标烯丙吗啡,酶或酸催化水解,氯仿-异丙醇(9:1)液液提取或GDX403树脂固相提取,BSA衍生化,HP-5柱和氮磷检测器进行分析.结果提取率62%～85%,检出限1.2～3.1ng/ml,线性范围20～2000ng/ml,回收率(97%～99%)±(6%～9%)(Mean±cv,N=5).结论方法适合于实际案件中尿样的检验.