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乌头碱抗佐剂关节炎的药效学研究
目的 研究乌头碱对佐剂性关节炎模型大鼠的治疗作用.方法 取Wistar大鼠50只,按随机数字表法分为空白组、模型组、甲氨蝶呤组、乌头碱低剂量组及乌头碱高剂量组.除空白组外,各组大鼠右后足皮内注射弗式完全佐剂致大鼠佐剂性关节炎模型.造模后第10天,乌头碱低、高剂量组分别灌胃25、100μg/kg乌头碱,1次/d,甲氨蝶呤组灌胃0.5 mg/kg甲氨蝶呤,2次/周,连续给药19 d.末次给药后,使用足趾容积测量仪测量大鼠足肿胀度,按5级评分法计算大鼠关节炎指数,计算脾脏、胸腺指数,采用HE染色观察大鼠右足踝关节部位病理学改变.结果 与模型组比较,造模后20、24、28 d,乌头碱低、高剂量组大鼠足跖肿胀度[20 d:(668.7±144.5)μl、(566.9±179.3)μl比(912.1±200.5)μl;24 d:(833.1±144.0)μl、(803.9±213.4)μl比(1069.5±164.6)μl;28 d:(736.4±115.0)μl、(835.7±170.1)μl比(1107.2±215.8)μl]降低(P<0.05或P<0.01);造模后18、24、28 d,乌头碱低、高剂量组大鼠关节炎指数评分[18 d:(3.1±0.7)分、(3.2±0.4)分比(3.8±0.6)分;24 d:(3.1±0.5)分、(3.4±0.5)分比(3.9±0.3)分;28 d:(2.7±0.6)分、(3.2±0.9)分比(4.0±0.0)分]降低(P<0.05);与模型组比较,乌头碱低、高剂量组及甲氨蝶呤组脾脏指数[(3.5±0.4)、(3.3±0.4)、(4.0±0.6)比(4.9±0.5)]降低(P<0.01).结论 乌头碱对佐剂性关节炎大鼠有一定的治疗作用.
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完全弗氏佐剂预防NOD鼠糖尿病的机制及其与细胞因子Th表达和β细胞凋亡的关系
目的探讨完全弗氏佐剂(CFA)预防非肥胖糖尿病(NOD)小鼠胰岛炎与糖尿病的作用机制. 方法 42只NOD雌鼠随机分为CFA处理组(n=21)和磷酸盐缓冲液(PBS)对照组(n=21), 3周龄时分别于后脚板一次性注射50 μl CFA和PBS.于12周龄时观察胰岛炎的程度、胰岛Fas和FasL的表达、β细胞凋亡情况以及测定血清白细胞介素-4(IL-4)、γ干扰素(Ifn-γ)水平和胰岛内IL-4、Ifn-γ、白细胞介素1β(IL-1β)、Fas mRNA的表达水平. 结果 12周龄时CFA组胰岛炎积分和β细胞凋亡率均显著低于PBS组(P均<0.05).Fas只在PBS组胰岛内表达,而FasL在CFA和PBS组均有相似表达.12周龄CFA组血清IL-4水平较PBS组增高而Ifn-γ水平降低(P均<0.05); RT-PCR结果显示,CFA组胰岛内IL-4 mRNA转录水平较对照组显著增高(P＜0.01),而Ifn-γ、IL-1β、Fas mRNA转录水平则明显降低[P均<0.01(Ifn-γ,IL-1β),P<0.05(Fas)].30周龄时CFA组糖尿病发病率(9.1%,1/11)比PBS组(81.8%,9/11)显著降低(P=0.001). 结论 CFA预防NOD鼠胰岛炎及糖尿病可能与胰岛自身反应T细胞由Th1向Th2转型,从而抑制Fas介导的β细胞凋亡相关.
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完全弗氏佐剂预防非肥胖糖尿病鼠胰岛炎和糖尿病的效应
目的探讨完全弗氏佐剂(CFA)在预防非肥胖糖尿病(NOD)鼠胰岛炎和糖尿病机制中的作用.方法将3周龄NOD雌鼠随机分入CFA组、磷酸盐缓冲液(PBS)对照组,分别给予后足板一次性注射CFA 50 μl、PBS 50 μl,于6周龄、12周龄、30周龄时观察胰岛β细胞凋亡、胰岛炎程度和糖尿病发病率.结果 6周、12周时CFA组胰岛炎积分、β细胞凋亡率均明显低于同期PBS组(P＜0.05, P＜0.01), 6周龄、12周龄胰岛炎积分与β细胞凋亡率存在正相关.到30周龄时,CFA组11只鼠只有1只发生糖尿病(1/11),明显低于PBS组[11只中有9只(9/11)],P=0.001.结论早期给予NOD鼠CFA可明显减轻其胰岛炎和糖尿病的发生,其机制与抑制β细胞凋亡有关.
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类风湿性关节炎大鼠模型的制备
目的 建立简便实用的类风湿性关节炎大鼠模型.方法 利用小牛软骨Ⅱ型胶原加福氏完全佐剂充分乳化后作为造模剂,对Wistar大鼠足底、尾根部、背部多点皮内注射,7天后加强注射一次.结果 二次注射后2周,大鼠四肢严重肿胀,踝关节直径、脚爪体积增大,血清TNF-α水平明显升高,胫骨远端骨小梁吸收破坏,可累及骨皮质,关节软骨可见坏死脱落、纤维化,关节软骨可见坏死脱落、纤维化,关节腔狭窄,动物造模全部成功.结论 Ⅱ型胶原加完全费氏佐剂是一种良好的类风湿性关节炎大鼠模型造模剂.
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完全弗氏佐剂诱导胸腺细胞凋亡对NOD鼠1型糖尿病发生的影响
目的 探讨完全弗氏佐剂(CFA)诱导胸腺细胞凋亡对NOD鼠1型糖尿病的预防作用.方法 42只3周龄NOD雌鼠随机均分为CFA组和PBS组(n=21),分别给予NOD鼠后足板一次性注射CFA 50μl、磷酸盐缓冲液(PBS)50μl,于6、12周(各取5只小鼠)及30周(11只小鼠)时观察胰岛β细胞凋亡、胸腺细胞凋亡、胰岛炎程度和糖尿病发病率.结果 与PBS组相比,6周、12周时CFA组胰岛炎积分明显降低(P<0.01),胰岛β细胞凋亡率明显减少(P<0.01),而经地塞米松诱导可见更多的胸腺细胞凋亡(P<0.01).6周、12周时胰岛炎积分与B细胞凋亡率呈正相关(r=0.511,P<0.05),与胸腺淋巴细胞凋亡率呈负相关(r=-0.549,P<0.05);β细胞凋亡率与胸腺淋巴细胞凋亡率呈负相关(r=0.614,P<0.01).30周时,CFA组糖尿病发病率为9.1%(1/11).而PBS组糖尿病发病率为81.8%(9/11),两组间差异具有统计学意义(P=0.001).结论 CFA可通过调节胸腺细胞凋亡,导致胰岛β细胞凋亡的减少,可能是减轻NOD鼠胰岛炎并预防1型糖尿病的机制之一.
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构建新西兰兔脊柱结核模型的对比研究
目的 探讨构建新西兰兔脊柱结核模型的实验方法,并评价此种方法的可行性.方法 62只新西兰兔随机分为致敏造模组(经弗氏完全佐剂致敏后造模)20只、未致敏造模组(造模前未经弗氏完全佐剂致敏)20只、对照组20只、空白组2只.致敏造模组兔经弗氏完全佐剂致敏后,于L4上终板下方钻孔,填入明胶海绵,在其中浸注种植H37Rv人型标准结核杆菌混悬液0.1ml；未致敏造模组未经弗氏完全佐剂致敏,浸注H37Rv人型标准结核杆菌混悬液0.1ml；对照组浸注液体培养基与生理盐水混悬液0.1 ml；空白组不做任何处理.结果 术后8周兔存活率致敏造模组为89.5％、未致敏造模组60.0％,对照组94.7％、空白组100％；致敏造模组成活兔造模全部成功.致敏造模组造模椎体破坏情况:术后4周X线片为50％、重建CT和MRI均为83.3％；术后8周X线片为58.8％、CT重建和MRI均为100％.术后8周,肉眼观察全部成活兔造模椎体均出现骨破坏、肉芽及坏死组织形成,腰大肌脓肿发生率为17.6％；组织病理学显示造模椎体均有大量淋巴细胞和类上皮样细胞、骨小梁断裂、凝固性坏死物质；细菌培养阳性率为52.9％.未致敏造模组术后8周有75％成活兔造模椎体出现骨破坏,腰大肌脓肿发生率为100％.对照组与空白组无上述改变.结论 经弗氏完全佐剂致敏后,在新西兰兔腰椎椎体的上终板下钻孔、明胶海绵填塞、种植H37Rv结核杆菌标准菌株的方法,可成功构建兔脊柱结核模型.
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辣木叶或根的甲醇提取物对弗氏佐剂致关节炎大鼠模型的止痛作用
目的:辣木(Moringa olei fera)是非洲民间医学中一种常用的药用植物,近期已有临床研究揭示了其抗炎功效.本实验研究辣木叶及根的甲醇提取物对弗氏佐剂致关节炎模型大鼠的止痛作用.方法:使用健康雄性成年Wistar大鼠(体质量200~220 g),皮下注射弗氏佐剂建立实验性关节炎模型.造模当天及造模后第3天和第6天,治疗组大鼠分别腹腔内注射辣木根或叶的甲醇提取物(200,300或400 mg/kg),使用消炎痛(5 mg/kg)作为阳性对照药.
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NOD小鼠胰岛β细胞凋亡及完全弗氏佐剂的预防效应
目的探讨NOD小鼠胰岛β细胞凋亡的规律及完全弗氏佐剂(CFA)在预防胰岛炎和糖尿病中的作用.方法计数12天龄、6周龄、12周龄未处理的NOD雌鼠胰岛β细胞的凋亡.将3周龄NOD雌鼠随机分入CFA组、PBS对照组,分别给予后足板一次性注射CFA 50 μl、PBS 50 μl,于6周龄、12周龄、30周龄时,观察胰岛β细胞凋亡率,胰岛炎程度和糖尿病发病率.结果未处理组12天龄胰岛β细胞凋亡率分别高于6周龄、12周龄(P＜0.01).6周、12周时CFA组胰岛炎积分,β细胞凋亡率均明显低于同期PBS组(P＜0.05,P＜0.01),6周龄、12周龄胰岛炎积分与β细胞凋亡率存在正相关(r=0.59,P＜0.01).到30周龄时,CFA组糖尿病发病率(9.1%)较PBS组(81.8%)明显降低(P=0.001).结论早期给予NOD鼠CFA可明显减轻胰岛炎和预防糖尿病的发生,其机制与抑制β细胞凋亡有关.
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雷公藤药酒对大鼠佐剂性关节炎治疗作用的研究
目的:观察雷公藤药酒对大鼠佐剂性关节炎(Adjuvant arthritis in rats,AA)动物模型的治疗作用.方法:用氟氏完全佐剂(Fluoride's complete adjuvant,FCA)诱导大鼠形成关节炎,经雷公藤药酒治疗后,观察大鼠足跖关节肿胀度,判断药效学结果.结果:雷公藤药酒能阻止大鼠继发性病变的发生,而治疗组能显著减轻大鼠足跖关节肿胀度.结论:雷公藤药酒不仅能改善大鼠佐剂性关节炎模型关节炎症状、抑制炎症反应,而且能预防继发性病变的出现.
