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广东省食品中单核细胞增多性李斯特菌脉冲场凝胶电泳技术分子分型的研究
目的 应用脉冲场凝胶电泳技术(PFGE)对广东省食品中分离的单核细胞增多性李斯特菌(Lm)进行分子分型,并建立PFGE数据库.方法 参照美国PulseNet的Lm PFGE分子分型标准方法进行检测.应用BioNumerics软件对不同食物种类、时间和地点的分离株进行比对,分析菌株之间的相关性.结果 107株Lm分成41个PFGE型,型别较为分散;从鸡肉中分离的菌株数多(37株),PFGE分型也多(19个);冷藏和冷冻食品的分离率较高,其中有26株菌仅存在1～2个电泳条带的差异,相似度极高;韶关和惠州地区分离的Lm存在着地区特异性;随时间变迁,部分菌株仍存在不同程度的相关性.结论 广东省食品中分离的Lm在整体上表现出较大的遗传多样性,但部分菌株有不同程度的相关性.
关键词： 单核细胞增多性李斯特菌 脉冲场凝胶电泳技术 食品 分子分型 -
中国2001年11省(市)食品中李斯特菌污染状况的主动监测
目的监测中国主要食品中单核细胞增生李斯特菌(LM)的污染状况.方法在11个省(市)抽检生肉、熟肉、生奶、生食蔬菜、酸奶、冰淇淋、生食水产品7类食物样品4 034份,采用国家标准方法(国标法)检测LM,并经BAX○ R系统(DuPont Qualicon, Wilmington,DE)鉴定.结果 4 034份样品中,国标法检出LM 70株,分布于7省(市)4类食品中,总阳性率为1.74%,11省(市)中福建省LM阳性率高,7类食品中生肉污染严重.与国标法相比,BAX○ R系统鉴定结果敏感性＞98%,特异性＞97%.结论各省7类食品不同程度受到LM污染,各地应加强相应卫生监管工作.BAX○ R系统可用于准确、快速检测LM.
关键词： 单核细胞增多性李斯特菌 食品 主动监测 BAX(○R)系统 -
单核细胞增多性李斯特菌脑干脑炎一例并文献复习
目的 探讨单核细胞增多性李斯特菌脑干脑炎诊断方法及治疗措施.方法 对2014年10月解放军第309医院重症医学科(ICU)收治的1例单核细胞增多性李斯特菌脑干脑炎的临床表现、实验室和辅助检查结果及诊断与治疗经过进行回顾性分析,并结合文献讨论其发病特点.结果 本例患者以头痛、发热、意识障碍为主要临床表现,先后诊断为病毒性脑膜炎、结核性脑膜炎,给予相应治疗,但病情逐渐加重.血细菌培养涂片回报为革兰阳性球菌,予利奈唑胺治疗后,明显好转.后血细菌培养回报为单核细胞增多李斯特菌,予注射用哌拉西林钠他/唑巴坦钠治疗,用药3周后换为青霉素继续治疗,青霉素治疗近3周后患者无头痛、发热等症状,脑脊液常规生化均正常,出院.结论 单核细胞增多性李斯特菌脑干脑炎临床少见,误诊率高,病死率高.一旦确诊,应给予早期、足量、足疗程的抗生素治疗.
关键词： 诊断 治疗 脑干脑炎 单核细胞增多性李斯特菌 -
树突状细胞在李斯特菌疫苗抗肿瘤过程中的作用
单核细胞增多性李斯特菌(LM)是一种严格的胞内寄生菌,具有细胞内生长和繁殖的特性,且在机体内具有一定的可清除性.近年来,在肿瘤免疫治疗领域,以LM为载体的减毒活疫苗已经被广泛应用.树突状细胞是目前已知的功能强的抗原呈递细胞,在介导LM疫苗发挥抗肿瘤效应的过程中起着重要的免疫调控作用.然而目前已有的研究对其具体的免疫调控机制和抗肿瘤效应并未进行系统性的描述.
关键词： 单核细胞增多性李斯特菌 疫苗 树突状细胞 肿瘤免疫治疗 -
新生儿早发型李斯特菌败血症合并脑膜炎1例
李斯特菌败血症(listeriosis sepsis)是由单核细胞增多性李斯特菌( listeria monocytogenes,LM)感染所致的人畜共患疾病,是新生儿期较为严重的感染性疾病,病情重且病死亡率高.本病多为散发,在欧美国家曾有报道引起多次食源性爆发流行,且近年来发病呈上升趋势,但在国内报道尚属较少[1].现将中国医科大学附属瑞京医院第二新生儿科于2010年8月收治的1例李斯特菌败血症合并新生儿脑膜炎的病例报告如下.
关键词： 单核细胞增多性李斯特菌 败血症 新生儿 脑膜炎 -
李斯特菌化脓性脑膜炎患儿20例临床治疗效果分析
目的 探讨20例李斯特化脓性脑膜炎患儿的临床治疗效果.方法 根据临床表现及检查结果,分别在不同的治疗阶段采用不同的药物对患者进行治疗,综合分析结果,提出疾病治疗措施及预防建议.结果 接受治疗后,20例患儿死亡1例(5.0％),治愈17例(85.0％),好转2例(10.0％).后期出现3例运动障碍,1例癫痫,1例智力障碍等后遗症.结论 本治疗方法具有较高的治愈率,值得推广应用.但李斯特化脓性脑膜炎死亡率较高,易产生后遗症,相关地区应加强预防,及时发现和治疗.
关键词： 单核细胞增多性李斯特菌 脑膜炎 细胞免疫功能缺陷 -
重症单核细胞增多性李斯特菌脑膜脑炎1例
李斯特菌脑膜脑炎是单核细胞增多性李斯特菌(LM)引起的细菌性脑膜脑炎,通常发生于免疫功能低下者.LM是人畜共患致病菌,通过污染的食物传播.欧美国家报道较多,国内报道较少.李斯特菌脑膜脑炎病死率高,临床表现与其他细菌性脑膜炎类似.脑脊液检查与结核性脑膜炎亦难鉴别,确诊依赖于脑脊液涂片及培养.本文报道1例重症李斯特菌脑膜脑炎,患者为免疫力正常的菲律宾籍中年女性,急性起病,先后以病毒性脑膜脑炎及结核性脑膜炎治疗,病情进展快,发病3周出现呼吸衰竭,气管插管呼吸机辅助通气.脑脊液培养见LM后,予氨苄西林联合氨基糖苷类药物治疗3周,患者意识恢复,病情好转出院.本病例报道总结了李斯特菌脑膜脑炎的临床特点、危险因素及治疗转归.
关键词： 单核细胞增多性李斯特菌 重症脑膜脑炎 临床表现 -
单核细胞增多性李斯特菌mpl全基因克隆与序列分析
目的 克隆单核细胞增多性李斯特菌mpl全基因并进行序列比较分析.方法 分别从参考菌株CCTCCAB97021和分离菌株XFL0605中PCR扩增mpl全基因,连接到T克隆载体转化到受体菌DH5α中,经菌落PCR和提取质粒酶切鉴定,分别获得阳性克隆转化子后测序,运用DNAStar软件对测定核苷酸及推导AA序列与GenBank中李斯特菌属的部分菌株进行分析.结果 成功克隆了单核细胞增多性李斯特菌mpl全基因,所获得的mpl基因片段具有完整的ORF,均全长1 533bp,编码510个氨基酸.对李斯特菌属mpl基因遗传性分析显示L. monocytogenes与L. seeligeri和L. ivanovii处于不同的分支,在L. monocytogenes种内分为两个群,表明mpl能够反应出这三种李斯特菌株的亲缘关系.结论 单核细胞增多性李斯特菌mpl基因具有种的特异性.
关键词： 单核细胞增多性李斯特菌 金属蛋白酶 MPL基因 T载体 -
重组减毒单核细胞增多性李斯特菌作为疫苗载体在抗肿瘤中的研究进展
将细菌疫苗用于肿瘤的治疗和预防已取得多方面的进展,单核细胞增多性李斯特菌(LM)能在专职吞噬细胞和非专职吞噬细胞内生存繁殖,可同时引起机体的细胞免疫和体液免疫.将外源性肿瘤特异性抗原导入减毒LM,可以显著诱导抗肿瘤的细胞免疫应答,是非常有效的疫苗载体.文章主要从具有胞内菌特殊优势的单核细胞增多性李斯特菌的生物学特性、做为抗肿瘤疫苗载体的优点等方面的研究进展进行了阐述.
关键词： 重组 减毒 单核细胞增多性李斯特菌 疫苗载体 肿瘤特异性抗原 -
联合应用分子血清分型与二元基因分型检测单核细胞增多性李斯特菌的研究
目的 了解食品中单核细胞增多性李斯特菌(LM)的分子血清型分布,并探索二元基因分型方法在LM分型检测中的意义.方法 对2005年-2012年间河北省分离自食品的154株LM进行分子血清分型与二元基因分型分析.结果 154株LM中,1/2a型菌株多,占52.60％,其次为1/2c型(22.08％)、1/2b型(15.58％)和4b型(9.74％).二元基因分型可将154株LM分为31个BT(Binary Type)型,分辨力(DI值)为92.28％.二元基因型与分子血清型综合分析,可将154株LM分为34个型别,DI值为92.56％.通过对进化树分析可见,大多数BT型仅见于一种血清型,仅少数BT型见于2种血清型,提示二元基因型和分子血清型是否存在一种紧密的关系,尚需进一步研究证明.结论 分子血清分型与二元基因分型综合应用于LM的分型研究,分型能力强,且具有操作简便、快速、高通量的优势,便于推广,可应用于暴发确认与溯源检测.
关键词： 单核细胞增多性李斯特菌 分子血清分型 二元基因分型 -
单核细胞增多性李斯特菌荧光定量PCR检测
目的探索建立快速、敏感、特异的单核细胞增多性李斯特菌的PCR检验方法.方法以单核细胞增多性李斯特菌hlyA基因作为靶序列设计一对引物,并以单核细胞增多性李斯特菌标准菌株中提取的DNA作为模板,用常规PCR和荧光定量PCR对单核细胞增多性李斯特菌进行鉴定.结果含有一段特异基因的600bp片段,表现出良好的单核细胞增多性李斯特菌种特异性.结论荧光定量PCR比普通PCR特异性强、灵敏度高、重现性好,可以定量、快捷地应用于检测单核细胞增多性李斯特菌.
关键词： 单核细胞增多性李斯特菌 聚合酶链反应 荧光定量PCR -
荧光实时定量PCR检测单核李斯特菌方法学建立及应用
目的建立检测单核细胞增多性李斯特菌的荧光定量PCR方法,并利用此方法检测人工污染的牛奶中单增李斯特菌菌量.方法选择单增李斯特菌特异性的基因ListeriolysinO基因为靶目标设计引物,采用煮沸法抽提纯单增李斯特菌株(1/2a)DNA,建立SYBRGREEN实时定量PCR检测体系.结果定量PCR对李斯特菌可产生特异扩增信号,对其他菌(大肠杆菌)无响应.标准曲线的相关系数为0.9521.小检菌量约为100个菌落形成单位/反应体系.在人为污染牛奶检测中,与传统细菌计数方法结果相比,相关系数为0.839.结论实时定量PCR是一种快速、灵敏的定量检测单增李斯特菌的方法,可用于牛奶样品的检测.
关键词： 荧光实时定量PCR 单核细胞增多性李斯特菌 -
新生儿单核细胞增多性李斯特菌感染7例
李斯特菌病(listeriosis)是由单核细胞增多性李斯特菌(listeria monocytogenes)感染所致的一种严重威胁围产儿生命的人兽共患病.新生儿单核细胞增多性李斯特菌感染多经宫内传播,引起败血症,病情重,病死率高,但是国内少见报道.2007年至2008年,吉林大学第一医院(5例)和温州医学院育英儿童医院(2例)新生儿科共收治患儿7例,诊断符合新生儿单核细胞增多性李斯特菌败血症[1],报道如下.
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PCR方法检测单核细胞增多性李斯特菌的实验研究
目的 建立一种快速、简便、准确,适合于基层应用的检测鉴定Lm的方法.方法 选取iap基因作为靶序列设计一对引物,用该引物对4株标准株及4株无关菌进行PCR扩增,得到进一步验证.采用PCR和常规方法同时对人工感染的牛奶进行检测鉴定.结果 4株标准株获得了预期700bp左右的扩增片段,而同属的L.welshimeri、L.grayi、粪肠球菌和蜡样芽孢杆菌均没有这一特异性条带.检测人工感染牛奶20份,检出率为90%,高于传统分离培养法(60%).结论 建立的PCR法可用于单增李斯特氏菌的快速、特异、敏感诊断.
关键词： 单核细胞增多性李斯特菌 聚合酶链反应 优化的选择性培养法 -
单核细胞增多性李斯特菌致早产儿败血症1例报道
近年来，单核细胞增生性李斯特菌所导致的感染患者呈增多趋势。该菌可导致孕妇早产、流产及新生儿感染等，病死率较高。本院1例单核细胞增多性李斯特菌所导致的早产儿败血症，现报道如下。
关键词： 单核细胞增多性李斯特菌 新生儿 败血症
