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广西贵港地区2009-2012年新生隐球菌和格特隐球菌临床分离株基因分型与毒力特性研究
目的 研究广西贵港地区新生隐球菌和格特隐球菌临床分离株,在种、基因型和交配型的构成及毒力特性.方法 收集2009-2012年广西贵港地区临床分离的新生隐球菌株20株,PCR扩增转录间隔区(ITS)序列进行分子生物学验证,通过特异性引物进行PCR扩增,鉴定血清型、交配型.利用M13-PCR指纹图谱法和URA5-限制性片段长度多态性分析法,鉴定和验证基因型.表型研究包括37 ℃生长试验、黑色素生成试验和尿素酶试验.结果 20株有19株为新生隐球菌格鲁比变种,血清型为A型,α交配型,基因型为VNⅠ型.1株为格特隐球菌,属α交配型,基因型VG Ⅰ.毒力特性研究结果显示,所有临床分离株37℃正常生长,黑色素试验、尿素酶试验阳性.结论 广西贵港地区隐球菌致病菌株中绝大多数(95％)为新生隐球菌格鲁比变种、血清型为A型,α交配型,基因型为VNⅠ型,并发现格特隐球菌菌株.
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一例格特隐球菌感染引起脑膜脑炎患者的临床表现与实验室鉴定分析
目的 探讨格特隐球菌引起脑膜脑炎的临床及病原学特点,为临床和实验室认识及诊疗该类疾病提供帮助.方法 分析患者的临床资料、实验室辅助检查、诊疗经过和实验室对病原菌的分离鉴定、药敏试验及18S rRNA序列测定并复习相关文献.结果 该患者有慢性肝炎的消耗性、免疫力低下病史,临床表现为头痛、发热和呕吐等,脑部影像学显示病变侵及脑膜和脑实质,一度发生脑疝,病情凶险.实验室检测血常规显示白细胞、中性粒细胞及CRP升高;脑脊液压力明显升高,脑脊液细胞总数、白细胞数、单核细胞及蛋白升高,葡萄糖和氯化物降低,墨汁染色阳性;脑脊液真菌培养在显色培养基上生长为白色菌落,在豆氨酸-甘氨酸-溴麝香草酚蓝(CGB)培养基生长使其变蓝色;分离菌经Vitek-2 Compact鉴定为新型隐球菌(99%),终经18S rRNA测序和系统发育分析确定为格特隐球菌(相似度>99.0%).药敏试验结果 显示,该菌株对5-氟尿嘧啶、两性霉素B、氟康唑、伊曲康唑和伏立康唑均敏感.临床应用两性霉素B联合氟康唑和5-氟尿嘧啶治疗后患者症状及体征好转,回当地继续治疗.结论 CGB培养基可作为格特隐球菌的初筛培养基,分子学方法 较自动化仪器鉴定格特隐球菌更准确可靠;治疗应以两性霉素B和5-氟尿嘧啶为主的联合治疗,早诊断、早治疗、足量和足疗程是治疗隐球菌病的关键.
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格特隐球菌病的研究进展
格特隐球菌病是一种由格特隐球菌引起的真菌疾病.格特隐球菌通过担孢子和酵母细胞的吸入引起人或动物肺部感染,再传播到中枢神经系统,导致脑膜炎或脑膜脑炎,未经治疗常致命.治疗格特隐球菌中枢神经系统感染需要标准抗真菌治疗并积极处理颅内高压,此外,加用地塞米松可改善持续加重的炎症反应和降低颅内压.本文就格特隐球菌病的分子流行病学、临床表现和诊断以及治疗进行综述.
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GM-CSF抗体在免疫正常格特隐球菌感染中的作用研究
目的 探讨抗粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)抗体在免疫正常格特隐球菌感染患者中的作用.方法 分为两组,病例组为7例无免疫异常状态的隐球菌性脑膜脑炎患者,健康对照组为7名健康人,分别检测抗GM-CSF抗体.并对隐球菌性脑膜脑炎患者的脑脊液进行菌株分离培养及鉴定.结果 7例患者中6例为新生隐球菌感染,1例为格特隐球菌感染.抗GM-CSF抗体只在格特隐球菌感染的患者血浆中发现,而在新生隐球菌感染的患者中未发现.健康对照组中l例检测到抗GM-CSF抗体.结论 在“免疫正常”的隐球菌脑膜脑炎患者中,抗GM-CSF抗体可能为格特隐球菌感染的危险因素,而与新生隐球菌感染无关.
关键词： 抗粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子抗体 格特隐球菌 免疫正常 -
格特隐球菌病暴发流行机制的研究进展
目前已证实,格特隐球菌病可暴发流行.近10年来,在加拿大温哥华岛暴发的格特隐球菌病发病率显著高于其他地区,且大部分感染者免疫力正常,该致病菌已蔓延至周边地区.本文就格特隐球菌病暴发流行机制,包括致病菌的分子流行病学分析、可能来源、毒力分析和播散机制进行综述.
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格特隐球菌感染的临床特征与实验室研究进展
格特隐球菌主要感染免疫力正常人并以肺部感染为主,格特隐球菌感染的临床特征、治疗、预后、影像学特点、实验室检查等均与新生隐球菌有所不同.文章对格特隐球菌感染的临床特征和实验室检查方法作一综述.
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微小RNA-146a在新生隐球菌、格特隐球菌诱导THP-1细胞炎性反应中的机制研究
目的 观察并分析微小RNA-146a(miR-146a)在新生隐球菌(标准株WM148)、格特隐球菌(标准株R265)刺激人单核巨噬细胞系(THP-1细胞)中表达的差异,探讨miR-146a在隐球菌所致隐球菌脑膜炎中的调控作用及机制.方法 体外培养的人单核巨噬细胞系THP-1细胞分成新生隐球菌诱导组、格特隐球菌诱导组,按灭活菌数∶THP-1=5∶1的比例与THP-1细胞共孵育0、3、6、9和12h后离心收集上清液和细胞沉淀.采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测各组细胞miR-146a的表达情况,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测各组上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)的释放量.结果 新生隐球菌诱导组细胞中miR-146a表达量与0h相比明显升高(P＜0.01),且在3h达到峰值,随后呈下降趋势;上清液中TNF-α的表达量在诱导后12h达到高值,IL-6的表达各时间点没有明显变化.格特隐球菌诱导后,miR-146a的表达逐渐升高,12h达到高值,但3h、6h点变化与0h比较差异并无统计学意义;上清液中YNF-α的表达12h到达峰值;IL-6的表达逐渐增加,12h达到高值,变化无统计学意义.结论 新生隐球菌、格特隐球菌刺激THP-1细胞炎性反应后,miR-146a表达随时间延长呈现不同的规律,TNF-α、IL-6的动态变化表现不同的特点.研究表明新生隐球菌、格特隐球菌诱导THP-l炎性反应可能存在不同的调控机制.
关键词： 微小RNA-146a 新生隐球菌 格特隐球菌 THP-1细胞 炎性反应 -
HOG1对格特隐球菌应对压力应激、毒力因子和抗药性的影响
目的:明确HOG1基因对格特隐球菌应对压力应激、毒力因子产生和抗药性的影响.方法:比较格特隐球菌原始株、hog1Δ菌株和重建株在含高渗透压培养基、抗真菌药物培养基中的生长差异,以及在YEPD培养基中荚膜的合成和咖啡因培养基中黑素产生的差异.结果:hog1Δ菌株在高压力和抗真菌培养基中生长受限,在YEPD培养基中荚膜合成减弱,在咖啡因培养基中黑素生成减少.结论:HOG1基因在格特隐球菌应对压力应激、毒力因子产生、抗药性中有重要作用.
关键词： 格特隐球菌 HOG1基因 HOG-MAPK通路 -
实体器官移植术后隐球菌病的研究进展
隐球菌病是实体器官移植术后主要的致死性真菌感染性疾病,大多数伴有中枢神经系统侵犯.由于临床症状缺乏特异性,可能导致延误诊断,预后不佳,而早期诊断和充分有效的抗真菌治疗是改善移植受体隐球菌病预后的主要策略.本文对隐球菌病的流行病学、发病机制、临床表现、诊断方法、防治措施,结合我国器官移植实际情况进行综述.
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隐球菌病的诊治
隐球菌病(cryptococcosis)是一种重要的世界性人兽共患的感染性真菌病,可侵犯人体的肺、脑、皮肤、骨骼等全身各脏器.因其强烈的嗜中枢性,所致的隐球菌性脑膜炎/脑膜脑炎(cryptococca meningitis/meningoencephalitis,CME)约占隐球菌感染的80％以上,具高病死率.现从流行病学、临床表现、实验室诊断及治疗几方面阐述隐球菌病诊治方面的进展.
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刀豆氨酸-甘氨酸-溴麝香草酚蓝培养基在区分格特隐球菌与新生隐球菌中的应用
目的 研究刀豆氨酸-甘氨酸-溴麝香草酚蓝培养基(CGB培养基)在区分新生隐球菌和格特隐球菌中的作用.方法 将已鉴定并报告为新生隐球菌的219株不重复的保存菌种经复苏后接种至CGB培养基进行筛选.对筛选阳性的菌株以及随机选择筛选阴性的菌株进行PCR扩增,将扩增的IGS1、URA5和GPD1基因产物进行测序,与基因库中的标准序列进行比对.结果 既往报告为新生隐球菌的219株菌中,有3株在CGB培养基上生长且使菌落周围培养基颜色变为蓝色,筛选为阳性,其余216株在CGB培养基上虽有生长,但培养基颜色无变化;3株显色阳性菌经基因扩增和测序鉴定为格特隐球菌,2株显色阴性菌基因扩增及测序鉴定为新生隐球菌格鲁比变种.结论 格特隐球菌在CGB培养基上生长产生明显的颜色变化,可用于其与新生隐球菌的鉴定.
