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河南省肠道病毒Echo6型脑炎病毒分离株全基因组序列分析
2008年7-9月河南省多个地区出现以儿童为主的中枢神经系统感染性疾病暴发,证实为肠道病毒Echo6型感染[1].本研究筛选2株脑脊液分离株进行全基因组序列测定.1.材料与方法:(1)标本及毒株:2008年河南省开封市、洛阳市各1例病毒性脑炎患儿的脑脊液标本,经人横纹肌肉瘤细胞分离得到病毒,并经肠道病毒VP1区通用引物扩增,测序后鉴定为Echo6病毒,分别命名为Echo6/Henan/116/2008和Echo6/Henan/127/2008.
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病毒性脑炎病例中Echo6河南分离株VP1基因特征分析
本研究对2008年Echo6河南分离株VP1区全基因序列进行分析,并在此基础上对Echo6的基因特征和分子流行病学进行初步分析.1.材料与方法:
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人埃可病毒20型KM/EV20/2010分离株的全基因组序列分析
目的 对人埃可病毒20型(ECHO20) KM/EV20/2010分离株全基因组进行序列测定,并分析其分子变异和进化特点.方法 设计针对KM/EV20/2010引物,提取病毒RNA,RT-PCR扩增和序列测定获得全基因序列.利用Mega 4.1、RDP3和SimPlot 3.5.1软件分析全基因序列.结果 KM/EV20/2010病毒株基因组全长7 395 bp个核苷酸(nt),5’端和3’端分别为744 nt和96 nt的非编码区,5’和3’非编码区间为一个6 549 nt长的开放阅读框,编码一个含2 183个氨基酸的多聚蛋白,编码区内未见核苷酸的插入或缺失.与GenBank中现有唯一1株ECHO20 JV-l原型株全基因组序列相比对,核苷酸同源性为80.1％,氨基酸同源性为96.7％;构建基于全长VP1基因序列的进化树图并进行基因分型分析,ECHO20可分为6个基因型,中国分离株分属Ⅲ和Ⅳ基因型,其中KM/EV20/2010属于基因型Ⅳ,且6个基因型之间核苷酸的差异为9.4％～21.7％.基于全基因组序列的种系进化分析提示KM/EV20/2010分离株与ECHO20原型株JV-1遗传距离很远,未与原型株JV-1聚簇分布,而与ECHO30病毒株遗传距离较近.分析发现KM/EV20/2010序列在非结构区可能存在重组.结论 中国ECHO20可分为6个基因型,KM/EV20/2010分离株属于Ⅳ基因型.
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福建省龙岩市2011年病毒性脑炎病例埃可病毒30型分析
目的 分析龙岩市2011年病毒性脑炎病例埃可病毒[人肠道致细胞病变孤儿病毒,Enteric Cytopathogenic Human Orphan (ECHO) Virus] 30型(ECHO30型)特征.方法 对龙岩市2011年某医院病毒性脑炎住院病例采集脑脊液(Cerebrospinal Fluid,CSF)进行病毒分离、血清中和试验定型;选取4株ECH030型分离株,测定VP1编码区序列,与国内外其他病毒株进行比较.结果 从142份患者CSF标本中分离到ECH030型20株、ECHO11型7株、ECHO6型10株.4株ECHO30型VP1编码区序列长度为606个核苷酸,编码202个氨基酸.4株的核苷酸和氨基酸同源性分别为97％～100％和88％～100％.与2000年Bastianni原型株的核苷酸和氨基酸同源性分别为81％～82％和81％～93％.与2010年山东省、2011和2012年福州市流行毒株核苷酸和氨基酸同源性分别为96％～ 100％和87％～100％.系统进化树分析显示,4株龙岩分离株同属基因型(Genotype)Ⅱ.结论 龙岩市2011年病毒性脑炎病例的ECHO30型为GenotypeⅡ.
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用ELISA方法检测埃可病毒感染的特异性IgM抗体
目的研究埃可病毒感染的无菌性脑膜炎的诊断方法.方法采用埃可病毒混合抗原包被酶标板,用抗人γ链处理人脑脊液标本,通过酶标二抗及底物显色,建立了抗埃可病毒IgM的间接ELISA检测方法;并用特异性试验、对照和重复性试验证实方法的可靠性和实用性.结果在临床诊断为无菌性脑膜炎的78例患者脑脊液中有14例阳性(17.9%),而细菌性脑膜炎的36例患者脑脊液中仅有1例阳性(2.8%),28例脑外伤患者脑脊液均为阴性.ELISA阳性的5份脑脊液中和试验4例阳性,而ELISA阴性的5份脑脊液中和试验均为阴性;该方法与脊髓灰质炎病毒、柯萨奇A组病毒7型和柯萨奇B组病毒1～6型无交叉反应;ELISA阳性的6份标本经特异性IgM破坏和阻断试验均全部转为阴性.结论本方法快速、简便、可靠,适合于临床早期特异性诊断.
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埃可病毒30型重组蛋白VP1表达及其在病原检测中的应用
目的 表达埃可病毒30型VP1重组蛋白,建立埃可病毒特异性抗体的检测方法.方法 采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法获得埃可病毒VP1cDNA,克隆至原核表达载体pET44a中表达,并用纯化的重组蛋白检测血清中埃可病毒抗体.结果 表达的重组蛋白VP1相对分子质量约为95 000,经Western blot和酶联免疫吸附试验证实其具有良好的抗原性.结论 基因工程重组融合蛋白VP1可以作为诊断用抗原.
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小儿手足口病的中医诊断与中药治疗
手足口病(Hand-foot-mouth disease,Hfmd)是由多种肠道病毒引起的常见传染病,以婴幼儿发病为主,大多数患者症状轻微,以发热和手足口腔等部位出现皮疹或疱疹为特征的疾病.少数患者可并发无菌性脑膜炎、脑炎、急性迟缓性麻痹、呼吸道感染和心肌炎等,个别重症患儿病情进展快,易发生死亡.少数儿童和成人感染后多不发病,但能传播病毒.引起该病的肠道病毒包括肠道病毒71型(EV71) 和A组柯萨奇病毒(CoxA)、埃可病毒(Echo)的某些血清型.其中EV71及CoxA16型为常见,感染引起重症病例的比例较大.此病五明显的地区性,一年四季均可发病,以夏秋季节多见.该病传染性强、隐性感染比例大、传播途径复杂、传播速度快,在短时间内可造成较大范围的流行,疫情控制难度大.笔者对近年来临床上多例手足口病患儿进行中医药治疗,收效显著,谨对其辨证,施治规律作如下探讨.
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小儿病毒性脑膜炎低钠血症与脑电图、CT的变化及其临床意义
目的:分析小儿病毒性脑膜炎急性期低钠血症与脑电图、CT以及与病情的关系.方法:2002年1～7月扬州地区流行的肠道病毒性脑膜炎(主要是柯萨奇病毒B5,少数为埃可病毒23)收治本院的76例进行临床分析,均在入院后1d内测血清电解质的浓度以及脑电图的检查,其中发病3～5d左右行脑CT检查共46例.结果:入院1d内发生电解质紊乱36%,其中低钠血症26%.惊厥或意识障碍组的低钠血症发生率高于非惊厥组.脑电图100%异常,其中中、重度异常21例中低钠血症发生率明显增加达43%.脑CT46例中有17例提示脑实质不同程度存在低密度影,占37%,脑损害的病人中有70%的患者存在低钠血症.结论:柯萨奇病毒和埃可病毒性脑膜炎早期即存在电解质紊乱,尤其是低钠血症,低钠血症的患儿发生惊厥或意识障碍的可能性较大,脑电图中、重度异常以及脑CT有脑实质损害时低钠血症发生率增加.本组病例提示低钠血症的发生可能是病毒性脑炎发生时机体的保护性病理生理反应有关,往往提示病情相对较重.柯萨奇病毒与埃可病毒引起的小儿脑膜炎预后较好,无明显后遗症.
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一起埃可病毒9型所致感染性疾病的暴发调查
目的：了解金坛市某幼儿园埃可病毒9型所致感染性疾病暴发疫情的临床特征、流行病学特征及病原学病因，为疫情防控工作提供参考。方法对金坛市某幼儿园暴发疫情开展现场流行病学调查和病原学检测。结果共发现病例28例，儿童罹患率为19．31%。病例发病主要集中在6月2-5日，以3~5岁儿童为主，男女各14例。病原学检测确定为埃可病毒9型感染。结论此次暴发疫情是由埃可病毒9型感染所致，可能与幼儿园日常消毒工作不严及儿童个人洗手习惯不良有关。建议加强幼托机构日常卫生监督管理与肠道传染病防治宣传。
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儿童埃可30型病毒性脑炎140例临床分析
目的 了解儿童埃可30型病毒性脑炎的临床特点.方法 对2006年6月-8月间确诊的140例儿童埃可30型病毒性脑炎的临床资料进行回顾性分析.结果 临床表现为发热、头痛、呕吐,脑膜刺激征多阳性,重症病例也可出现抽搐等表现,无偏瘫、颅神经损伤等局限性病变.140例中89例痊愈,49例恢复期好转出院,2例自动出院失访,4例出现继发性癫疒间.结论 儿童埃可30型病毒性脑炎临床表现以无菌性脑膜炎多见,病情相对较轻微,少数可遗留癫疒间后遗症.除常规诊断方法外,病毒病原学检测十分重要.
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埃可30型肠道病毒引起病毒性脑膜炎的暴发调查
目的 通过对一起病毒性脑膜炎暴发的流行病学调查,为病毒性脑膜炎防控提供依据.方法 采用描述性流行病学方法,疫情资料运用EpiData软件录入,采用SPSS 17.0软件进行整理分析.结果 病例标本核酸检测证实是埃可30型肠道病毒所致病毒性脑膜炎,疫情持续达28 d,罹患率为10.44%,76.32%的病例发生在中(2)和中(3)班,这2个班的罹患率分别是45.24%和23.81%.结论 本起暴发可能与早期病例没有及时隔离,通过日常接触传播引起有关.对托幼机构等儿童聚集单位,应加强因病学生及时追踪和隔离,是防止传染病蔓延、减少暴发的关键.
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龙岩市2011年病毒性脑炎131例分析
目的 分析龙岩市病毒性脑炎的流行特征及肠道病毒感染情况,为防控和临床诊治积累经验.方法 对2011年发生的病毒性脑炎131例开展个案调查,对其脑脊液标本进行病毒分离、中和试验和病原确认.结果 病毒性脑炎发病具有明显季节性,6、7月为发病高峰.131份标本肠道病毒阳性26株(19.8％),均为埃可病毒(ECHO);型别为ECHO 30、ECHO 6和ECHO 11,以ECHO 30为常见血清型.临床上,患者多有发热、头痛和呕吐等症状,且以中高热为主,部分表现为咳嗽、腹痛、腹泻及皮疹等;大部分脑脊液外观正常,压力增高,白细胞增多,糖和氯化物基本正常.有63.9％的病例脑电图异常,76.0％的病例头部MRI异常.结论 病毒性脑炎肠道病毒的主要型别有一定规律,新型肠道病毒传入或病毒发生变异,可发生感染或发病.因此,必需加强对肠道病毒的进一步监测.
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132例儿童埃可病毒脑炎脑脊液和脑电图改变
目的 对132例确诊埃可病毒脑炎患儿的脑脊液和脑电图改变进行分析.方法 分析患儿临床体征,行脑脊液白细胞、蛋白定性、糖、氯化物检验及细菌培养,行脑电图检查.结果 所有患儿均有发热、头痛症状,多有呕吐(94.7％),头晕、烦躁不安和腹泻较少；脑脊液白细胞总数均增高,63.6％为(100～499)×106/L,(10～99)×106/L和(500～999)×106/L各占17.4％,以淋巴细胞为主；有87例(65.9％)脑电图显示异常,其中轻度异常占34.5％,中度48.3％,重度17.2％.结论 对临床疑似埃可病毒脑炎患儿,如果脑电图正常,应尽早做脑脊液检查,进行综合诊断,以免延误治疗.
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手足口病的流行病学特征
手足口病(hand foot mouth disease,HFMD)是由多种肠道病毒(其中以71型病毒为严重)引起的常见传染病,以婴幼儿发病为主.主要由小RNA病毒科肠道病毒属柯萨奇病毒A16型(CoxA16)及肠道病毒71型(EV71)感染引起.主要临床表现为手、足、口腔等部位斑丘疹、疱疹,重症病例可出现脑炎、脑脊髓炎、脑膜炎、肺水肿、循环衰竭等.近几年来其并发症发生率与病死率有增高趋势,对其治疗,国内外学者进行了大量临床研究,现综述如下.
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兰州市柯萨奇病毒、埃可病毒和EB病毒抗体检测分析
目的:探讨兰州市患者柯萨奇病毒、埃可病毒和EB病毒感染的病原学分布现状,为防治工作提供资料.方法:应用ELISA法检测患者急性期血清中3种病毒(ECHO、COX、EBV)特异性IgM抗体,以了解病原学分布.结果:本研究共检测埃可病毒(ECHO) 6412例,阳性143例(2.23％),柯萨奇病毒(COX)6435例,阳性218例(3.39％),EB病毒(EBV)6567例,阳性311例(4.74％).其中COX和EBV感染女性明显高于男性(P＜0.01).在不同年龄组中,1岁～7岁两组ECHO感染明显高于其它年龄组(P＜0.05).大于1岁的四个年龄组COX、EBV感染显著高于另外两个年龄组(P＜0.01).在不同季节中,ECHO感染在夏季高(P＜0.01).COX和EBV感染无明显季节性差异(P＞0.05).结论:三种病毒4岁～7岁组患者感染高.ECHO病毒夏季感染明显高于其他季节.COX、EB病毒在女性患者中感染较高.
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一起以急性胃肠炎为表现的埃可病毒9型感染暴发调查
目的 调查一起幼儿园不明原因发热腹痛事件的病因,采取控制措施. 方法 开展流行病学调查和病原学检测,对流行特征和流行因素进行分析. 结果 该起疫情累计发病28例,罹患率19.31％,临床表现以发热、腹痛为主,病例均为轻症,病程2～3d.检测19份病例样本,17份肠道病毒阳性,4份埃可病毒9型阳性. 结论 此次埃可病毒9型感染暴发以急性胃肠炎表现为主,不同于以往以无菌性脑膜炎为主,值得关注.
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小儿病毒性脑炎182例临床分析
1引言2002年6月～9月在山东省郯城县为中心的部分区域发生小儿病毒性脑炎流行,经检验证实为埃可病毒感染.
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637例儿童血清柯萨奇病毒埃可病毒抗体检测分析
目的:了解兰州地区柯萨奇病毒及埃可病毒感染状况.方法:选择2006年2月-2009年8月637例兰州地区各医院送检的在城关区人民医院门诊病毒免疫室做病毒抗体检测的门诊和住院患儿,其中病毒性心肌炎及疑似心肌炎患儿279例,健康儿童256例,用病毒中和抗体检测(细胞培养法)进行柯萨奇病毒COXB组C1C2C3C4C5及A组A9、埃可病毒ECHOE6E9两种病毒8个血清型的检测.结果:637例患儿中检出阳性病例315例,阳性率49.45％.COXB组病毒检出率明显高于ECHO组,3年中共检出阳性病例267例,占阳性病例84.76％,C2病毒占首位,共检出90例,占阳性病例的28.57％.其次是C3、C1,共检出病例66例、57例,占阳性病例的20.95％,18.10％.ECHO病毒共检出66例,占阳性病例的20.95％,E6为主要病毒共44例,占阳性病例的13.97％.3岁以内COX,ECHO检出率低.随着年龄的增长,COX,ECHO病毒抗体的阳性率逐渐上升,在学龄期(7～ 14岁)高,14～16岁呈下降趋势.对256例健康儿童与279例病毒性心肌炎及疑似心肌炎患儿肠道病毒比较可知健康儿童与心肌炎患儿COX病毒感染无显著差异.结论:COXB病毒感染是儿童病毒感染常见的病毒.健康儿童病毒C1、C4、ECHO感染可考虑隐性感染,做病毒中和抗体无临床意义.本文心肌炎疑似心肌炎患儿COX病毒感染阳性率随年龄增加而增加,7岁以后更容易引发可能与该病毒的嗜心肌性有关.均衡营养对预防COX病毒感染有益.
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小儿埃可病毒性脑膜炎158例临床分析
目的 提高对小儿埃可病毒性脑膜炎的认识.方法 对158例诊断为小儿埃可病毒性脑膜炎患儿的临床资料进行分析.结果 158例埃可病毒发病时间在8-10月份,发病年龄2-14岁儿童,男性多见;起病急,以发热、头痛、呕吐为主要表现,部分发病前或发病时有呼吸道或消化道症状;脑脊液异常率高.结论 此次埃可病毒性脑膜炎在同心县流行,临床症状轻、病程短,进行针对性治疗预后良好.
