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慢性乙型重型肝炎患者外周血单个核细胞TRAIL mRNA水平的临床研究
目的:探讨慢性乙型重型肝炎患者外周血单个核细胞(PBMC)可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)mRNA的水平变化及其临床意义.方法:采用实时荧光定量PCR反应检测实验组和健康对照组外周血单个核细胞TRAIL mRNA的水平,比较实验组和健康对照组之间TRAIL mRNA水平差异.结果:慢性乙型重型肝炎患者PBMC TRAIL mRNA的水平明显高于健康对照组(P＜0 01),实验存活组PBMC TRAIL mRNA水平明显高于实验死亡组(P＜0 01).结论:TRAIL在慢性乙型重型肝炎病理损害过程中起着重要的作用.
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TRAIL增强低剂量阿霉素高效诱导人骨肉瘤细胞凋亡的实验研究
目的探讨可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)与阿霉素(ADM)联用是否存在协同性杀伤人骨肉瘤细胞的作用以及分子机制.方法 TRAIL、ADM或两药联用24 h,MTT法测试细胞毒作用,吖啶橙染色荧光显微镜和透射电镜下观察细胞及亚细胞结构形态,流式细胞术检测细胞凋亡比例.RT-PCR和Western blot分别检测药物作用前后cFLIP mRNA和cFLIP蛋白的表达.结果 (1)人骨肉瘤U2OS细胞对TRAIL不敏感,IC50>1 mg/L.U2OS细胞对ADM相对敏感,存在剂量依赖性细胞毒效应.(2)TRAIL与ADM联用呈现高效协同作用,表现为亚毒性浓度TRAIL(0.1 mg/L)与亚毒性浓度ADM (1.0 μmol/L)联用可杀伤49.54%±2.79%的U2OS细胞.(3)流式细胞术、透射电镜及荧光显微镜观察证实,协同性杀伤作用主要通过诱导细胞凋亡实现.(4)cFLIP mRNA和cFLIP蛋白的表达下调促进了药物协同诱导凋亡的发生. 结论 TRAIL与亚毒性浓度ADM联用表现出的高效杀灭肿瘤细胞作用主要由凋亡介导实现,cFLIP mRNA下调和cFLIP蛋白的表达减少可能参与这一过程.
关键词： 细胞凋亡 可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 阿霉素 骨肉瘤 -
强直性脊柱炎患者血清可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体的表达及其临床意义
目的:探讨血清可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(sTRAIL)在强直性脊柱炎(AS)患者、类风湿性关节炎(RA)患者及健康对照间的表达差异及其临床意义.方法:60例AS患者按HLA-B27抗原测定结果分为阳性38例,阴性22例;按Bath活动指标分为活动组41例,非活动组19侧;另设20例RA患者和30例健康体检者作为对照.应用ELISA法检测上述研究对象血清sTRAIL的浓度,应用ESR自动化分析仪和特定蛋白分析仪测定红细胞沉降率(ESR)和血清C反应蛋白(CRP)含量.结果:HLA-B27阳性和阴性AS患者血清sTRAIL无统计学差异,均明显高于RA组和健康对照组(P＜0.01);活动组AS患者血清sTRAIL水平明显高于非活动组(P＜0.01);HLA-B27阳性AS患者血清sTRAIL水平与CRP呈明显相关(r=0.609,P=0.000),而阴性患者无显著相关;HLA-B27阳性和阴性AS患者血清sTRAIL与ESR均无明显相关.结论:血清sTRAIL水平在AS中明显上调,且与HLA-B27状态无关,但AS患者血清sTRAIL与CRP的相关性受HLA-B27状态的影响.
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慢性乙型重型肝炎患者血清sTRAIL的检测及临床意义
目的:探讨慢性乙型重型肝炎患者血清可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(sTRAIL)的变化及其临床意义.方法:采用双抗体夹心酶联免疫吸附法对50例慢性乙型重型肝炎患者和30例正常人血清sTRAIL水平进行测定.对50例慢性乙型重型肝炎患者用荧光定量PCR法检测HBV DNA载量、全自动生化分析仪检测肝功能.结果:慢性乙型重型肝炎患者血清sTRAIL水平明显高于健康对照组(P<0.01).存活组血清sTRAIL水平明显高于死亡组(P<0.01);慢性乙型重型肝炎患者血清sTRAIL水平与血清总胆红素呈显著正相关(r=0.32.P<0.01),与丙氨酸氨基转移酶正相关性r=0.78,P<0.05):29例HBV DNA<1×105 copies/mL者与21例HBVDNA≥1×105 eopies/mL者血清sTRAIL水平差异无显著性(P>0.05).结论:sTRAIL参与了慢性乙型重型肝炎的肝损伤过程,并与患者病情程度有一定的相关性,但与乙型肝炎病毒的复制水平无相关.
关键词： 肝炎 乙型 慢性 可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 血清 -
自拟芪参通络汤对缺血性中风患者脑保护机制的研究
目的 研究自拟参芪通络汤对缺血性中风患者脑保护机制.方法 将236例气虚血瘀兼水湿停滞型缺血性中风患者随机分为治疗组和对照组(治疗组116例、对照组117例).对照组予临床基础治疗,治疗组在基础治疗的基础上给予自拟参芪通络汤口服,总疗程为14 d,检查两组治疗前及治疗后血可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(sTRAI)、骨保护素(OPG)、血浆超敏C反应蛋白(hs-CRP)、血清过氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA),治疗前及治疗后2d、7d、14d血清基质金属蛋白酶-9等,并进行统计学处理.结果 治疗组治疗后血sTRAI、OPG、hs-CRP、SOD、MDA改善明显高于对照组(P＜0.01),治疗后2d、7d、14 d血MMP-9改善程度也显著优于对照组(P＜0.01).结论 自拟芪参通络汤治疗缺血性中风,能够多途径、多靶点的进行脑保护.
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慢病毒载体介导人sTRAIL对胃癌SGC-7901细胞凋亡的诱导作用
目的 构建携带人可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(sTRAIL)基因的自身失活型慢病毒载体,观察sTRAIL对人胃癌SGC-7901细胞的诱导凋亡作用,探讨其基因治疗功效.方法 构建含人sTRAIL基因及内部核糖体进入位点序列(IRES)和绿色荧光蛋白(GFP)基因的双顺反子慢病毒载体.采用脂质体转染法将慢病毒三质粒包装系统包装出的携带人sTRAIL的重组慢病毒,在体外感染人胃癌SGC-7901细胞、正常人肝细胞HL-7702、人胚肺成纤维细胞HLF-1.应用流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡率,酶联免疫吸附实验(ELISA)评价sTRA IL蛋白在胃癌细胞中的表达.结果 成功构建了慢病毒表达质粒pXZ208-sTRAIL,包装的重组慢病毒滴度可达106 IU/mL,可有效感染体外培养的细胞；含sTRAIL的重组慢病毒感染SGC-7901细胞,细胞凋亡率随病毒感染复数(MOI)的增加而升高,呈剂量依赖性；在MOI为6.0、作用24 h时,细胞凋亡率高,可达(29.12±2.87)％,细胞上清中sTRAIL表达量为(34.08±3.43) ng/mL；而在HL-7702、HLF-1等人正常细胞未见明显细胞凋亡.结论 含有sTRAIL基因的重组慢病毒载体在体外能够有效地感染胃癌SGC-7901细胞并使其分泌有生物活性的sTRAIL蛋白,可诱导SGC-7901细胞的凋亡,而对正常细胞无显著影响.
关键词： 慢病毒载体 可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 基因治疗
