大鼠脑缺血诱导脑组织中SUMOylation修饰变化的研究

目的:研究大鼠脑缺血组织中SUMO-1、SIRT-1和SUMO-1/SIRT-1的变化,探讨SUMO化修饰对大脑缺血的保护机制.方法:将25只Wistar大鼠随机分为2h组、6h组、12h组、24h组和对照组各5只.对照组不进行处理,2h组、6h组、12h组、24h组建立局灶性脑缺血模型,分别2h、6h、12h、24h处死大鼠,对照组在2h处死,研究组取大鼠缺血部位皮质组织,对照组取相应部位皮质组织,Western-Blot法测定脑组织中的SUMO-1、SIRT-1和SUMO-1/SIRT-1蛋白质水平.结果:缺氧2h后SUMO-1、SIRT-1、SIRT-1/SUMO-1复合物开始升高,和对照组比有统计学差异(P＜0.05),缺氧12h达到SUMO-1表达达到高峰,24h后降低,但仍较对照组和2h、6h表达为高(P＜0.05).结论:SUMO-1、SIRT-1和SUMO-1/SIRT-1参与了脑缺血中保护脑组织的过程,其机制可能与SUMO修饰上调SIRT-1的去乙酰化水平与关,详细机制还有待进一步研究.

SUMO化修饰在流感病毒感染中的作用研究进展

流感病毒与宿主相互作用的过程中,病毒利用各种手段去排除对自身不利的因素,逃逸宿主的免疫系统,而宿主同时会启动免疫系统去监视、清除病毒.在这一系列过程中,小泛素相关修饰物(SUMO)修饰作为泛素化修饰后又一种主要的蛋白质翻译后修饰,在流感病毒复制中起重要作用.本文综述了SUMO化修饰在流感病毒复制过程中的作用研究,有助于理解流感病毒对宿主细胞感染的机制,为抗流感病毒的治疗提供一些新的策略.

SUMO化修饰对高糖诱导的大鼠肾系膜细胞IκB/NF-κB信号的影响

目的 探讨小泛素相关修饰物(SUMO)修饰对高糖诱导的肾系膜细胞IκB/NF-κB信号的影响.方法 体外培养正常大鼠肾小球系膜细胞,设对照组、不同浓度高糖干预组和渗透压对照组,用免疫共沉淀检测SUMO1,SUM02/3蛋白与IκBα蛋白的相互作用;免疫印迹检测IκBα、NF-κB P65蛋白表达.结果 高糖特异性地减弱肾系膜细胞SUMO2/3与IκBα蛋白间的相互作用(P＜0.05);高糖呈浓度-时间依赖性促进IκBα泛素化降解(P＜0.05),同时上调NF-κB P65表达(P＜0.05).结论 高糖特异性减弱IκBα的SUMO化修饰,可能介导了肾系膜细胞、NF-κB信号的激活,参与了糖尿病肾病的发病.

SUMO对NF-κB信号通路的调控作用

核转录因子NF-κB是一种广泛存在于真核细胞内的,具有多向性、多功能的重要调节蛋白,与机体免疫应答、炎症反应,以及肿瘤的发生发展等多种生理病理过程相关.蛋白质翻译后修饰对NF-κB信号通路能起调控作用,而小泛素相关修饰物(small ubiquitin-related modifier,SUMO)是近年报道的参与调控NF-κB信号通路的一种非常重要的小分子蛋白,本文就SUMO对NF-κB信号通路的调节作用做一介绍.

SUMO化修饰与DNA损伤修复

蛋白质的翻译后修饰在很大程度上决定了蛋白质的活性、细胞定位、稳定性及蛋白质之间的相互作用.而在DNA损伤修复过程中,通过调控不同修复蛋白的翻译后修饰来影响他们的活性及细胞定位,进而导致DNA损伤修复途径的不同和修复结果的差异.新近研究表明,蛋白质的SUMO化修饰在DNA损伤修复和基因组稳定性的维护方面发挥重要作用.本文将对SUMO化修饰对DNA损伤修复的调控的新研究进展做一综述.

SUMO化修饰与血液系统疾病

小泛素相关修饰物(SUMO)修饰为继泛素化修饰后又一种主要的蛋白翻译后修饰,参与调控多种细胞生命活动,如蛋白质间相互作用、胞内定位、DNA修复、转录因子的活化,以及细胞周期和转录的调控等,并与多种疾病的发病密切相关.近年来的研究表明,SUMO化修饰也参与了多种血液系统疾病的发病.本文综述了SUMO化修饰对血液系统疾病发病及治疗的影响.

2型糖尿病核因子κB信号通路相关微血管内皮损伤与SUMO化修饰

NF-κB通路的持续激活在血管的炎性反应和内膜的过度增生中起关键的作用,可能是糖尿病血管内皮细胞损伤及随后的糖尿病血管病变的始动机制之一,2型糖尿病微血管病患者NF-κB相关外周血淋巴细胞DNA氧化损伤及其下游影响因子信号的不同,为2型糖尿病微血管病理变化的早期干预提供依据.SUMO化很可能通过对NF-κB信号通路的复杂性调控,正性调节胰岛素受体信号来阻止糖尿病的发生.

PKR通过SUMO化修饰调控胰岛β细胞P53功能上调

目的:探讨PKR通过SUMO化修饰上调P53功能,阐明胰岛β细胞增殖抑制的分子机制.方法:转染wt-PKR质粒并结合BEPP刺激,诱导PKR在胰岛β细胞特异性激活.免疫印迹和免疫共沉淀技术检测P53及P53-SUMO-1蛋白结合水平变化;并给予SUMO化抑制剂SpectomycinB1,分析其相关分子机制.结果:免疫印迹和实时定量PCR检测表明:PKR特异激活能诱导P53蛋白水平而不是mRNA水平上调;免疫共沉淀分析显示:PKR促进了SUMO-1与P53蛋白结合水平的增加;而SpectomycinB1能抑制PKR诱导的P53蛋白水平及其与SUMO结合的增加.结论:PKR能通过促进P53的SUMO化修饰,上调其功能,诱导胰岛β细胞增殖抑制,可能参与2型糖尿病的发生和病程发展.

人肺癌细胞系中SENP3介导p53的de-SUMO2/3修饰对其活性的调控作用

目的·探索SENP3介导的去SUMO化修饰(de-SUMO修饰)对p53的定位和活性的影响.方法·选取肺癌细胞系A549(p53野生型)和H1299 (p53缺失型)分别作为内源表达p53和强制表达p53的细胞模型;野生型及SUMO修饰位点突变型p53转染细胞,比较SUMO化修饰的效应.免疫共沉淀技术检测静息或氧化应激时p53的SUMO2/3修饰及SENP3的去除作用;免疫荧光技术检测上述修饰及SENP3的调控对p53定位的影响;双荧光素酶报告基因和定量实时PCR方法检测p53促进21转录的活性;生长曲线检测细胞增殖,探讨上述修饰和调控的生物学效应.结果·SENP3可介导p53的de-SUMO2/3修饰,且氧化应激时更为明显.p53的de-SUMO2/3修饰不影响p53定位,但抑制其促转录活性,并且取消其增殖抑制功能.结论·人肺癌细胞系中SENP3介导p53的de-SUMO2/3修饰可能是p53失活的机制之一.

SUMO特异性蛋白酶家族的结构、分布、功能和调控

蛋白质的翻译后修饰对调节蛋白质的功能活性和定位以及调控细胞周期进程和细胞分化都起着非常重要的作用,其中小泛素样修饰蛋白(SUMO)化修饰是一个可以由SUMO特异性蛋白酶(SENPs)家族逆转的高度动态的过程.SENPs能够从与SUMO连接的靶蛋白上催化去除SUMO,以及从它的前体蛋白上裂解SUMO;同时,此家族部分成员还参与SUMO的成熟活化过程;因此,去SUMO化修饰对于调节SUMO连接蛋白的功能及活性与SUMO化同样重要.本文就SENPs家族的结构及生物学特性作一综述.

Kif18A 的 SUMO 化修饰及其调控机制

目的：探讨 Kif18A 的 SUMO 化修饰及其调控机制。方法在 HEK293T 细胞中共转染 Flag －Kif18A、HA －SUMO1或 His －SUMO1质粒，免疫沉淀富集 Flag －Kif18A，免疫印迹检测 HA －SUMO；用 TALON 树脂富集His －SUMO1蛋白，免疫印迹检测 Flag －Kif18A 考察 Kif18A 的 SUMO 化水平。利用 SUMOsp 2．0软件预测Kif18A 可能发生 SUMO 化的潜在位点，将 Flag －Kif18A 质粒中的相应位点上的编码序列由 Lys 突变成 Arg，在HEK293T 细胞中表达突变体后再检测 Kif18A 的 SUMO 化水平的变化来确定 Kif18A 的 SUMO 化位点。通过在HEK293T 细胞中共染转 Flag －Kif18A、HA －SUMO1以及 SENP1野生型（WT）或 SENP1酶活位点突变型（Mut）质粒，再采用免疫沉淀和免疫印迹检测 Kif18A 的 SUMO 化水平，来证明 SENP1是 Kif18A 的去 SUMO 化蛋白酶。后，用 Nocodazole 处理 HeLa 细胞，使其同步化在 G2／M 阶段，再考察 G2／M 期 HeLa 细胞中 Kif18A 的 SUMO 化水平。结果Kif18A 能被 SUMO1或者 SUMO2修饰，K47和 K148是 Kif18A 发生 SUMO 化的两个主要位点，SENP1催化 Kif18A 的去 SUMO 化修饰。 HeLa 细胞同步化在 G2／M 期后，Kif18A 的 SUMO 化水平显著下降。结论Kif18A 能发生 SUMO 化修饰，且其 SUMO 化受到细胞有丝分裂进程的调控。

SUMO化修饰在NF-κB信号通路中的作用

小泛素相关修饰物(small ubiquitin related modifier,SUMO)修饰是与泛素化修饰类似的蛋白质翻译后修饰,在细胞信号转导、核质运输与转录调控等方面发挥重要作用.核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)通路是公认的参与炎症和免疫反应的重要调节通路.近年来研究发现,SUMO通过各种机制广泛参与NF-κB信号通路的调节.研究两者的关系,可能为相关疾病的防治找到新的思路.

SUMO化修饰在恶性血液病中的意义

SUMO化修饰在病毒感染中的作用研究进展

Small ubiquitin-related modifier (SUMO)是一类重要的类泛素蛋白,其修饰过程与泛素类似,但功能不尽相同,SUMO通过对底物蛋白的修饰来调节蛋白间的相互作用、定位及稳定性等功能.近年来,包括一些病毒蛋白在内的大量底物蛋白陆续被发现,SUMO化作为一种重要的蛋白质翻译后修饰,在病毒对宿主细胞的感染中既可发挥促进病毒感染的作用,也可发挥抑病毒感染的作用.

人RhoA发生了SUMO化修饰

目的 探讨人RhoA是否发生SUMO化修饰.方法 运用重叠延伸PCR和双酶切连接方法构建pcDNA3-3flag-RhoA真核表达载体,测序验证.将重组RhoA质粒转染进HEK293T细胞中,免疫印迹检测质粒的表达.将重组RhoA质粒分别和SUMO各型质粒共转染进HEK293T细胞中,细胞免疫荧光检测RhoA与SUMO之间是否存在共定位.免疫共沉淀方法检测RhoA是否发生SUMO化修饰.结果 成功构建pcDNA3-3flag-RhoA重组质粒,测序结果提示存在一个同义突变,其余完全正确;免疫印迹检测重组RhoA质粒能高效表达融合蛋白;免疫细胞化学检测到RhoA与SUMO2/3存在共定位,RhoA与SUMO1不存在共定位;免疫共沉淀检测SUMO2/3对RhoA发生修饰作用,SUMO1对RhoA未发生修饰作用.结论 人RhoA发生了SUMO2/3参与的SUMO化修饰,可能参与神经系统损伤后轴突再生的调控.

翻译后修饰在病毒感染过程中的作用

病毒在与宿主相互作用的过程中,利用多种方式去排除对自身不利的因素,从而逃避宿主免疫系统的攻击;而宿主同时也会启动免疫系统去监视、清除病毒.其中,蛋白质翻译后修饰在病毒感染过程中起重要作用.本文从宿主与病毒两种角度综述了蛋白质翻译后修饰在病毒复制过程中的作用,有助于理解宿主如何进行抗病毒反应及病毒对宿主细胞的感染机制,为抗病毒的治疗提供一些新的策略.