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中药清毒栓对宫颈上皮内瘤变Ⅰ、Ⅱ级患者血清SccAg的影响
目的:探讨中药清毒栓对宫颈上皮内瘤变(CIN)Ⅰ、Ⅱ级患者血清SccAg的影响.方法:92例CIN-Ⅰ、Ⅱ确诊患者随机分为治疗组和对照组各46例,两组均分别给予清毒栓和α-2b干扰素塞阴治疗20天、40天及60天,分别抽取以上患者的用药前及用药各阶段后晨起空腹血,MEIA法测定血清中SccAg值.结果:1、用药20天时患者两组血清SccAg的含量与用药前比有降低趋势,但无统计学意义.2、用药40天时患者两组血清SccAg的含量与用药前比有明显降低(P＜0.05).3、用药60天后两组患者血清SccAg的含量与用药40天比有降低的趋势,但效果不显著(P＞0.05),无统计学意义.4、清毒栓组比α-2b干扰素组血清SccAg的含量略见降低,但无统计学意义.结论:中药清毒栓对CIN-Ⅰ、Ⅱ级患者有一定的预防和治疗作用,可体现在对血清SccAg的含量变化上,值得临床医生推广应用.
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清毒栓对高危型HPV感染患者阴道免疫微环境调节作用的研究
目的 研究中药清毒栓及干扰素α-2b对宫颈高危型HPV感染的疗效,及对阴道局部免疫环境的调节作用,探讨其可能的免疫调节机制.方法 对符合宫颈高危型HPV感染诊断标准患者按照其治疗意愿,分为清毒栓治疗组(清毒栓组)、干扰素α-2b治疗组(干扰素组)、随访组,治疗3个疗程,在完成治疗后的第1个月随访,于治疗前及随访时收集阴道灌洗液.ELISA法检测阴道灌洗液中干扰素-γ(IFN-γ)、细胞因子白介素-10(IL-10)含量.分析药物治疗HR-HPV感染的临床疗效,探讨药物治疗、疗效及阴道免疫微环境改变三者的相关性.结果 清毒栓组、干扰素组及随访组,HPV转阴率分别为38.46％、30.00％、20.00％,疗效差异无统计学意义(P＞0.05).清毒栓及干扰素α-2b治疗后,阴道灌洗液中IFN-γ水平升高(P＜0.05),治疗前后IL-10比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 中药清毒栓可使HPV感染转阴,并可能通过上调阴道免疫微环境IFN-γ水平起到抗病毒的作用.
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中药清毒栓对宫颈癌SiHa细胞P53泛素化降解途径的实验研究
目的 从细胞生物学及分子生物学水平探讨中药清毒栓对宫颈癌SiHa细胞增殖抑制及P53泛素化降解途径中各个蛋白表达的情况.研究中药清毒栓对宫颈癌SiHa细胞生长的调节作用.方法 以4%含药血清培养液作用于SiHa细胞,设立正常对照组、空白血清组、清毒栓组及保妇康组、安达芬组.通过MTT法检测含药血清对细胞增殖抑制的影响;同时运用Western-Blot的方法检测HPV16E6、P53、UBcH8、E6-AP蛋白的表达情况.结果 经含药血清培养液作用后各组细胞数量减少,其中以4%浓度含药血清作用72 h时对细胞抑制作用强,与空白血清组比较,差异有统计学意义(P＜0.01);同时含药血清可升高P53、UBcH8蛋白的表达,降低HPV16E6、E6-AP的表达.结论 清毒栓含药血清可能是通过调控P53泛素化降解途径而达到抑制肿瘤的目的.
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中药清毒栓对HeLa细胞MHC-Ⅰ抗原呈递通路相关分子表达的影响
目的:探讨中药清毒栓治疗宫颈高危型人乳头瘤病毒(HPV)感染的分子机制.方法:以HPV18阳性的宫颈癌细胞系HeLa为细胞模型,清毒栓水提醇沉液、β-榄香烯、干扰素α-2b进行干预;分别采用Western blot 及Real-time PCR检测主要组织相容性复合物-Ⅰ (MHC-Ⅰ)抗原呈递通路相关分子TAP1、TAP2、LMP2、LMP7的蛋白及基因表达差异.结果:与对照组相比,清毒栓及β-榄香烯均可显著上调HeLa细胞内抗原呈递通路相关分子TAP1、TAP2、LMP2、LMP7的蛋白表达(P＜0.05),清毒栓可上调4种分子的基因表达(P＜0.05),β-榄香烯仅能可上调TAP2的基因表达(P＜0.05),干扰素q-2b对该4种分子的基因表达无影响.结论:中药清毒栓可通过调节抗原呈递通路相关分子的蛋白及基因表达,起到促进抗原呈递的作用,这可能是该方疗效的作用机制之一.
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清毒栓对宫颈炎模型大鼠部分炎性细胞因子的影响
目的:观察清毒栓对宫颈炎模型大鼠血清IL-1、IL-6、IL-8、TNF-α水平的影响作用,初步探讨清毒栓在抗宫颈炎中的作用机制.方法:试验使用苯酚胶浆致大鼠宫颈炎模型,连续阴道给药12d后,采用放免法测定各组大鼠血清IL-1、IL-6、IL-8、TNF-α水平.结果:清毒栓大剂量组大鼠血清IL-1β水平较模型组显著提高(P<0.05),清毒栓大、中剂量组血清TNF-α水平均较模型组显著提高(P<0.05).结论:清毒栓可能通过提高机体ILs和TNF水平,而提高体内的免疫应答水平,并影响到炎性反应相关细胞因子的表达,减轻宫颈局部炎症反应,改善临床症状.
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清毒栓对宫颈癌SiHa细胞及PTEN-MDM2-p53网络环路的影响
目的 从细胞生物学及分子生物学水平探讨清毒栓对宫颈癌SiHa细胞增殖抑制及对PTEN-MDM2-p53网络中各个蛋白表达的影响.方法 以4%含药血清培养液作用于SiHa细胞,设立正常对照组、空白血清组、清毒栓组、保妇康栓组及干扰素组,通过MTT法检测含药血清对细胞增殖抑制的影响;同时运用Western blot法检测PTEN-MDM2-p53蛋白的表达情况.结果 经含药血清培养液作用后各组细胞数量减少,其中以4%浓度含药血清作用72 h时对细胞抑制作用强,与空白血清组比较,差异有统计学意义(P<0.01);同时,含药血清可升高PTEN、P53抑癌蛋白的表达,降低癌蛋白MDM12的表达.结论 清毒栓含药血清可能是通过调控PTEN-MDM2-P53网络环路而达到抑制肿瘤的目的 .
关键词： 清毒栓 宫颈癌 SIHa细胞 PTEN-MDM2-p53网络 -
清毒栓治疗宫颈人乳头瘤病毒感染的临床研究
目的:观察清毒栓治疗宫颈人乳头瘤病毒(HPV)感染的临床疗效,并探讨其作用机理.方法:对符合纳入标准的52例患者以清毒栓宫颈上药治疗,观察治疗前后临床症状、宫颈细胞学、病理学的变化.结果:52例HPV感染患者,亚临床型36例,总有效率86.11%;临床型16例,总有效率87.50%;清毒栓对两型总有效率86.53%.结论:清毒栓可逆转宫颈HPV感染的细胞学、病理学特征,能有效治疗宫颈HPV感染.
关键词： 宫颈人乳头瘤病毒感染 清毒栓 宫颈细胞学 病理学 -
清毒栓及β-榄香烯对宫颈癌HeLa细胞HLA-Ⅰ类抗原表达的影响
目的 研究清毒栓及β-榄香烯对宫颈癌细胞系HeLa人类白细胞抗原(human leukocyte antigen,HLA)Ⅰ类抗原表达的调节作用,探讨其抗病毒的作用机制.方法 水提醇沉法制备清毒栓提取物.体外培养人类宫颈癌细胞HeLa,分为4组:空白对照组、清毒栓组、β-榄香烯组及干扰素α-2b组.MTT法确定3种药物合适的干预浓度,药物干预48 h后,用流式细胞术检测各组细胞表面HLA-Ⅰ的荧光强度,免疫印迹法分析各组细胞内HLA-Ⅰ的蛋白表达,实时荧光定量PCR检测各组细胞HLA-Ⅰ基因表达.结果 与空白对照组相比,3种药物均可上调细胞表面HLA-Ⅰ的蛋白表达(P＜0.05)；且与干扰素α-2b相比,清毒栓及β-榄香烯的上调作用更为显著(P＜0.05)；此外,3种药物还可上调细胞内HLA-Ⅰ的蛋白表达.与空白对照组相比,清毒栓及β-榄香烯可使HLA-A、B的基因表达增加,而干扰素α-2b只能上调HLA-A的基因表达.结论 清毒栓及β-榄香烯可以上调HLA-Ⅰ蛋白及基因表达,从而加强宫颈癌细胞系HeLa表面的抗原呈递,可能是这2种药物帮助机体清除人乳头瘤病毒(HPV)感染及癌变细胞的机制之一.
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中药对SiHa-CTL-Treg共培养体系中CTL细胞CTLA-4、PD-1蛋白的影响
目的 通过检测细胞毒T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4)、程序性死亡配体-1(PD-1)的蛋白表达情况,了解清毒栓是否可以抑制调节型T细胞(Treg)的功能来改变局部免疫微环境而达到抑制肿瘤.方法 免疫磁珠分选Treg、细胞毒T淋巴细胞(CTL);Western-Blot法检测CTLA-4、PD-1蛋白表达.结果 CTL与Treg共培养组,CTLA-4、PD-1的蛋白表达量明显增加,β-榄香烯及清毒栓干预后CTLA-4、PD-1的蛋白表达量显著降低,且清毒栓组蛋白表达量降低的更加明显.结论 β-榄香烯、清毒栓都可以抑制Treg对CTL中CTLA-4、PD-1蛋白的上调作用.
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清毒栓治疗宫颈糜烂98例临床疗效观察
目的 观察清毒栓治疗宫颈糜烂的治疗效果.方法 98例确诊宫颈糜烂患者,于月经干净后3 d阴道用药,隔日用1次,10次为1个疗程,连续治疗2个疗程.结果 治愈32例,占32.653%;显效32例,占32.653%;有效23例,占23.469%;无效11例,占11.225%,总有效率为88.775%.宫颈糜烂程度越轻,疗效越好.结论 清毒栓治疗宫颈糜烂疗效确切,是一种安全、有效、无副反应的中药外用制剂.
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中药清毒栓对宫颈癌SiHa细胞凋亡的影响
目的 探讨中药清毒栓对宫颈癌SiHa细胞增殖抑制及凋亡的作用.方法 设立空白血清组及中药清毒栓组、保妇康栓组、西药安达芬组,以4%含药血清培养液作用于SiHa细胞,分为3个时间点,通过MTT法检测各组对细胞增殖抑制的影响;同时运用流式细胞分析技术进行TUNEL法检测晚期细胞凋亡的变化.结果 经含药血清培养液作用后各组SiHa细胞数量减少,其中以作用72 h时对细胞抑制作用强,与空白血清组比较,差异有统计学意义(P<0.01),且抑制作用安达芬组>清毒栓组>保妇康组,清毒栓组与安达芬组间差异有统计学意义(P<0.05).各含药血清组对细胞凋亡均有显著的影响,且明显优于空白血清组(P<0.05),各含药血清组凋亡率依次为清毒栓组>保妇康组>安达芬组,差异均有统计学意义(P<0.01).结论 清毒栓含药血清通过促进细胞凋亡而达到抑制肿瘤的目的 .
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中药清毒栓对宫颈癌Hela细胞抑制作用的影响
目的:观察中药清毒栓对宫颈癌Hela细胞增殖抑制及诱导凋亡的作用.方法:通过MTT比色实验及吖啶橙/溴化乙啶(AO/EB)双染法检测Hela细胞增殖及凋亡的变化.结果:不同剂量清毒栓及保妇康栓药物作用后各组Hela细胞增殖数量明显减少及凋亡率明显增加,其中以作用24 h时对细胞抑制作用为明显,清毒栓高剂量组分别与正常对照组及清毒栓中、低剂量组比较差异有统计学意义(P ＜0.05);MTT比色实验中保妇康组与清毒栓高剂量组比较差异有统计学意义(P＜0.01),中药清毒栓作用Hela细胞在48 h及72 h时各组之间的比较差异均无统计学意义(P＞0.05).结论:清毒栓对宫颈癌Hela细胞的作用可能是通过抑制肿瘤内皮细胞的增殖诱导凋亡.
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中药清毒栓对宫颈癌SiHa细胞增殖的影响
目的:探讨中药清毒栓对宫颈癌SiHa细胞增殖的影响及其诱导凋亡作用的可能机制.方法:设立空白对照组,清毒栓高、中、低剂量组(0.16、0.04、0.01 g/ml)及保妇康栓组(0.017 5 g/ml),分别以不同药液作用于宫颈癌SiHa细胞24h、48 h、72 h,采用CCK-8(Cell Counting Kit-8)法检测细胞增殖情况,采用线粒体膜电位法检测细胞凋亡情况.结果:不同剂量的清毒栓作用24 h、48 h、72 h时对宫颈癌SiHa细胞的增殖均具有一定的抑制作用,其中以清毒栓高剂量组在48 h时作用为明显.不同剂量的清毒栓均可引起宫颈癌SiHa细胞线粒体膜电位的改变,进而引起不同程度的细胞凋亡;经统计学分析显示,清毒栓各剂量组、保妇康栓组的凋亡率与空白对照组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05),清毒栓低、中剂量组与清毒栓高剂量组比较,差异亦有统计学意义(P＜0.05).结论:高剂量的中药清毒栓在48 h时对宫颈癌SiHa细胞增殖的抑制作用为明显,其作用机制可能是通过使线粒体膜电位降低来促进肿瘤细胞的凋亡.
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中药清毒栓对HeLa细胞MHC-Ⅰ抗原呈递通路相关内质网分子伴侣表达的影响
目的 探讨中药清毒栓治疗宫颈高危型HPV感染的分子机制.方法 以HPV18阳性的宫颈癌细胞系HeLa为细胞模型,清毒栓水提醇沉液、β-榄香烯、干扰素α-2b进行干预;分别采用Western blot及Real-time PCR检测MHC-Ⅰ抗原呈递通路相关内质网分子伴侣CNX、CRT、BIP的蛋白及基因表达差异.结果 与对照组相比,3种药物均可不同程度的上调内质网分子伴侣CRT与CNX的蛋白表达,但对CRT与CNX的基因表达无影响(P＞0.05);干扰素α-2b可上调BIP的蛋白表达(P＜0.05),对BIP的基因表达无影响(P＞0.05);清毒栓及β-榄香烯可上调BIP的基因表达,但对其蛋白表达无影响(P＞0.05).结论 中药清毒栓及其有效成分之一β-榄香烯可通过上调内质网分子伴侣CNX及CRT的蛋白表达,促进宫颈癌细胞系HeLa的抗原呈递.
