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结核分支杆菌ESAT6基因克隆与表达质粒构建
目的:为获得纯品的结核分支杆菌基因工程抗原,克隆结核分支杆菌(MTB)ESAT6分泌蛋白基因到T载体,并构建表达质粒pGEX-ESAT6.
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汉坦病毒核壳蛋白重组抗原的制备和基因分型研究
根据肾综合征出血热病毒(HFRSV)抗原检测、分型和流行病学目前还存在许多待解决的问题,研制了HFRSV的核衣壳基因工程抗原,建立了逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和逆转录-聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析(RT-PCR-RFLP)分型方法.
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人巨细胞病毒UL57基因原核表达克隆的构建、表达及初步纯化
现有的IgM血清学试验对HCMV的诊断存在敏感性和特异性较差问题,其主要原因是迄今采用的抗原仍为从纯化的病毒颗粒中提取的病毒抗原性物质或粗提的病毒全抗原成分。近几年来人们致力于探讨能替代HCMV全病毒抗原的基因工程抗原,以完善IgM特异性血清学试验。本文通过构建HCMV DNA结合蛋白的一段基因的原核表达克隆,从而对表达产物的抗原性进行初步分析。 通过Oligosis软件设计UL57基因(aa540~604)两端引物,并在引物的5′端分别引入BamHⅠ和EcoRⅠ内切酶识别序列及保护位点。引物序列如下:P1:CTGGGATCCCCCAAAGGTGACGAC P2:GTGAATTCTCAGCGATTGAGGA。从感染的人胚肺成纤维细胞中提取和纯化HCMVAD169基因组,以纯化的核酸为模板,加入PCR反应体系进行UL57基因的扩增。
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类风湿因子阳性血清对酶免法丙肝抗体检测结果影响分析
第二代、第三代丙肝抗体酶免疫试验(抗-HCV EIA)诊断试剂的出现,提高了HCV抗体的检出率.由于现用的试剂盒所用包被抗原为合成多肽抗原和基因工程抗原(包括HCV病毒结构区核心抗原和非结构区抗原),增加了试验的敏感性和特异性.类风湿因子(RF)阳性血清对现用试剂盒是否有干扰,是否造成假阳性结果,为此我们进行了初步检测,结果如下.
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抗HPV16检测对诊断乳腺癌的临床应用
据文献报道[1~2],人乳头状瘤病毒HPV是诱发乳腺癌的主要原因之一,而其中16亚型具有极大的危害性.我们利用基因工程抗原HPV16[3]发现酶免法检测人体内是否存在HPV16的抗体.从而为临床判断是否存在乳腺癌的可能提供依据.经过初步的临床应用,证实实验结果与乳腺癌的发生有一定的相关性.现将结果报道如下.