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巨噬细胞是正常成人真皮中主要的细胞成分
巨噬细胞是皮肤免疫系统的主要组成成分,执行抗原提呈和效应功能.许多组织中都有丰富的巨噬细胞,但是这些细胞的分布和密度并没有得到充分的研究.我们采用免疫组化的方法对真皮内的巨噬细胞进行研究.
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养血活血解毒及其拆方对PMA诱导人真皮微血管内皮细胞增殖、迁移、管腔形成及相关信号转导通路的影响
目的:通过佛波酯诱导内皮细胞增生体外模拟银屑病新生的病理状态,比较养血活血解毒方及其组分药物血清对人皮肤微血管内皮细胞及相关信号转导通路的干预效应。方法:佛波酯诱导内皮细胞24 h造模,10%中药含药血清作用细胞24 h。采用CCK-8比色法检测全方及拆方药物血清对内皮细胞增殖的影响;Transwell小室法检测药物血清对细胞迁移的影响;Ma-tril胶法用于检测药物血清对内皮细胞管腔形成的影响;采用real-time PCR和Western blot法分别观察药物血清对血管新生相关信号转导通路及产物的影响。结果:养血活血解毒方及其养血活血、解毒组分含药血清均可显著抑制PMA诱导的HDMEC细胞增殖及迁移,其中全方作用强,拆方组均具有一定的抑制作用,但不及全方。仅全方组药物血清可显著抑制细胞的管腔形成,拆方组均无作用。全方可明显降低血管新生相关的VEGF/VEGFR及Ang/Tie2通路蛋白及mRNA表达;而拆方组效果不一,总体趋势不如全方。结论:临床优化组方养血活血解毒方可通过干预银屑病血管新生的病理环节发挥其治疗作用,且中药组方药效作用优于单个拆方组分,为临床科学组方用药提供实验依据。
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心锚重复蛋白与心力衰竭的研究进展
心锚重复蛋白(cardiac ankyrin repeat protein,CARP)是1995年由CHU等在体外培养的人真皮微血管内皮细胞cDNA文库中鉴定到的一种细胞因子诱导的核蛋白.近年人们研究发现该CARP蛋白在哺乳动物心脏中特异性地高表达,尤其在继发于各种心肌疾病的心力衰竭(简称心衰)动物模型和心衰患者的心肌中.
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人真皮微血管内皮细胞的体外分离和原代培养
目的:建立体外分离及培养人真皮微血管内皮细胞的方法,为进一步开展创面愈合及相关领域的细胞和分子生物学研究提供物质基础和实验模型.方法:健康成人中厚皮组织经中性蛋白酶消化后去除表皮;然后,采取薄片真皮组织胰蛋白酶低湿慢速灌注法消化微血管内皮细胞;将获取的微血管内皮细胞于不同条件的培养基内连续培养5~15 d,观察其基本生物学生长特征,并采用免疫细胞化学方法行Ⅷ因子相关抗原染色鉴定.结果:①采用中性蛋白酶及胰蛋白酶分步消化法,所分离获得的细胞体外具有很强的增殖能力;该细胞呈现Ⅷ因子相关抗原阳性,说明为真皮微血管内皮细胞;②细胞单层培养时显示活跃的形成类管腔状结构的生物学特征;③真皮微血管内皮细胞在不同培养基内生长状态不同,含8%胎牛血清、2%人分娩前母体血清及适量cAMP等添加物的IMDM为其较理想的培养基.结论:经体外分离及培养获得了生长性良好的人真皮微血管内皮细胞.