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脂肪来源干细胞对光老化成纤维细胞的治疗作用
目的 探讨脂肪来源干细胞(ADSCs)对光老化成纤维细胞的治疗作用.方法 分离培养小鼠ADSCs,并进行表面标志物鉴定;ADSCs与成纤维细胞(FBs)共培养48h后,单次UVB 120mJ/cm2照射后30min检测细胞内活性氧(ROS)生成量;采用UVB 120mJ/cm2反复照射4次,照射间隔时间12h,诱导产生细胞光老化模型,继续培养48h后检测细胞增殖能力、合成弹性蛋白原等变化.结果 体外培养ADSCs呈成纤维细胞样,活力良好,表面标志物CD29、CD90.2和sca-1阳性,CD34和CD45阴性;ADSCs可减轻单次UVB照射引起的氧化应激损伤,保护细胞免受细胞周期阻滞的影响,同时可促进光老化FBs合成弹性蛋白原.结论 ADSCs对光老化FBs具有保护作用,可作为对抗光老化的新手段.
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TE、LOXL-1和Elastase在腹股沟疝患者腹横筋膜中的表达及意义
目的 探讨弹性蛋白原(TE)、类赖氨酰氧化酶-1(LOXL-1)和弹性蛋白酶(Elastase)在腹股沟疝患者腹横筋膜中的表达及意义.方法 选择佛山市第一人民医院行择期疝修补术的腹股沟疝患者60例,分为腹股沟直疝组(A组)和腹股沟斜疝组(B组),每组30例;另外选取同期行腹部手术的30例患者(非疝、非炎性疾病)作为对照组(C组),分别采用免疫组化和Western blot方法检测各组腹横筋膜中TE、LOXL-1和Elastase的表达.结果 三组患者一般资料比较差异无统计学意义(P＞0.05);免疫组化和Western blot方法均显示TE和LOXL-1在腹横筋膜中的表达为:C组＞B组＞A组(P＜0.05);Elastase在腹横筋膜的表达为A组＞B组＞C组(P＜0.05).结论 腹股沟疝患者弹性蛋白合成减少,弹性蛋白酶降解增强影响了腹横筋膜的强度,并进一步影响腹股沟疝的发生和发展,尤其在直疝中更为明显.
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吻合术后动脉弹性蛋白原的表达
采用寡核苷酸探针原位杂交的方法了解吻合动脉的弹性蛋白原mRNA表达的变化.Wist ar大鼠60只,手术显微镜下,常规消毒铺单将大鼠右股动脉剪开并重新端端吻合,术后分笼标记饲养.实验动物分成6个时相点组和未吻合侧为对照组.于吻合后3,7,14,2 1,28,90天,切取吻合动脉和对侧动脉,冰冻切片后,以地高辛标记的寡核苷酸探针作原位杂交.根据大鼠tropoelastin cDNA序列设计出长度为26bp的反义寡核苷酸5′-GGC TCT CGG TGG TAT TGG TGG CAT CG-3′,经同源性查询,该序列与大鼠血管平滑肌细胞tropoelastin cDNA同源性高.采用MAS图像分析系统,检验各组原位杂交切片比面积,在吻合后3天的标本中可见有蓝紫色的细胞,细胞分布在吻合口周围,吻合后7天的标本可见篮紫色的细胞较多,靠近内膜,吻合14天组、21天组、30天组均可见篮紫色的细胞.吻合90天组为阴性,从统计分析可知股动脉吻合术后3d、7d、14d、21d、30d弹性蛋白原m RNA表达阳性细胞数量与正常对照组相比较(p＜0.01)相差非常显著,90d组与正常对照组比较弹性蛋白原mRNA表达阳性细胞数量并无显著的升高(p＜0.05).阳性细胞表达数量的高峰期在3～7d,从7d开始表达阳性细胞数量逐渐减少,在90d组与正常对照组无显著性差异.实验证明肌性动脉与弹性动脉一样,在损伤后也有tropo elastin-mRNA的表达,表达的高峰在损伤后3-7天,在30-90天后逐渐减少到不可检出的水平.此基因表达时间的长短与血管损伤的严重程度及内膜增生的程度有无相关性,目前并不清楚.血管损伤及血管手术造成了内皮细胞及中膜平滑肌细胞的损伤, 血管对损伤的后果是平滑肌细胞的移行、增殖、分泌、结果是产生血管内膜增生.从实验中可知血管平滑肌细胞具有产生tropoelastin的能力.新生内膜一方面可以重建并修复血管,另一方面它也是造成血管移植及管吻合后影响血管通畅的重要因素.弹性蛋白等基质蛋白的表达在内膜增生中起着重要的作用.
