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酸性成纤维细胞因子复合部分脱蛋白骨修复免早期股骨头缺血性坏死的影像学评价
背景:前期研究表明,酸性成纤维细胞因子复合部分脱蛋白骨具有很好的促进早期股骨头缺血坏死动物模型血管化的作用,而X射线也是评价骨愈合很重要的指标.目的:应用X射线评估酸性成纤维细胞因子复合部分脱蛋白骨对兔股骨头缺血性坏死的修复作用,并与单纯生物衍生骨进行比较.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2008-01/2009-01在南华大学生命科学院完成.材料:取健康成年新西兰大白兔肋骨,经脱脂、脱蛋白、部分脱钙和冻干等一系列的物理、化学方法处理后制备部分脱蛋白骨.将酸性成纤维细胞生长因子用无菌蒸馏水稀释后加入部分脱蛋白骨粒,得到复合人工骨.方法:健康成年新西兰大白兔24只,双侧股骨头颈交界处开窗,挖除股骨头内约50%松质骨,加用体积分数为95%乙醇灌注30 min,建立双侧股骨头坏死骨缺损模型.按随机数字表法,随机分为空白组,单纯部分脱蛋白骨组,复合人工骨组,并将部分脱蛋白骨、复合人工骨同期手术植入.主要观察指标:分别于术后2,4,8周取材,进行X射线照片观察.结果:空白组整个过程都呈低密度影:8周时缺损区仍呈X射线低密度影,有2只出现股骨头塌陷.单纯部分脱蛋白骨组2周和4周时植骨区与周围正常骨组织清晰可见,8周时1只股骨头X射线表现正常,2只缺损区与周围正常骨组织仔细辨别可区分,但已模糊不清.复合人工骨组4周时移植物与周围正常骨组织界限不清,需仔细辨别才能区分;8周时所有股骨头缺损区与周围正常骨组织融合,与宿主骨界限不清.X射线评分结果显示,复合人工骨组优于空白组(P<0.05),单纯部分脱蛋白骨组和复合人工骨组之间差异无显著性意义(P>0.05).结论:X射线显示酸性成纤维细胞生长因子与部分脱蛋白骨复合构建组织工程化人工骨对兔早期股骨头缺血坏死具有较好的修复作用,与单纯部分脱蛋白骨表现相似.
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酸性成纤维细胞因子/部分脱蛋白骨修复免早期股骨头缺血性坏死的血管化作用
背景:酸性成纤维细胞因子具有较好的促进血管形成作用以及成骨作用,能否有效地促进早期股骨头缺血性坏死动物模型的血管化有待研究.目的:探讨酸性成纤维细胞因子复合部分脱蛋白骨对兔股骨头缺血性坏死修复的血管化作用.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2008-01/2009-01在南华大学生命科学院完成.材料:取健康成年新西兰大白兔肋骨,经脱脂、脱蛋白、部分脱钙和冻干等一系列的物理、化学方法处理后制备部分脱蛋白骨.将酸性成纤维细胞生长因子用无菌蒸馏水稀释后加入部分脱蛋白骨粒,得到复合人工骨.方法:健康成年新西兰大白兔24只,双侧股骨颈交界处开窗,挖除股骨头内约50%松质骨,加用体积分数为95%乙醇灌注30 min,建立双侧股骨头坏死骨缺损模型.按随机数字表法,随机分为空白组,单纯部分脱蛋白骨组,复合人工骨组.分别于相应股骨头骨缺损区植入部分脱蛋白骨、复合人工骨,空白组不植入材料.主要观察指标:分别于术后2,4,8周取材,制备墨汁灌注标本,进行微血管计数以及血管面积分析.结果:2,4,8周时血管计数和血管面积显示,空白组血管数和血管面积少,单纯部分脱蛋白骨组次之,复合人工骨组多.复合人工骨组与空白组和单纯部分脱蛋白骨组比较,差异有显著性意义(P＜0.05).结论:酸性成纤维细胞生长因子与部分脱蛋白骨复合构建组织工程化人工骨具有较好的促进血管生成作用,对兔早期股骨头缺血坏死具有较好的修复作用.
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用于成骨细胞支架材料的部分脱蛋白骨细胞相容性的研究
目的探讨部分脱蛋白骨的细胞相容性 . 方法将猪肋骨用理化方法制得部分脱蛋白骨 ( PDB) , 检测其性能后 , 与成骨细胞体外复合培养 , 了解细胞相容性及细胞毒性 . 结果 PDB的主要成份为羟基磷灰石 , 蛋白质含量仅有原骨组织的 1/5, 具有原骨组织的网状孔隙结构系统 , 原骨组织骨盐支架的三维多孔结构存在 , 对人胚骨膜成骨细胞的形态特征、细胞周期、倍体水平无有害影响 . 结论 PDB具有原骨组织的网状孔隙结构系统 , 良好的细胞相容性 .
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部分脱蛋白骨复合成骨细胞体内植入后形成软骨或骨的实验研究
目的探讨部分脱蛋白骨 ( PDB) 作为成骨细胞支架材料体内植入的成骨作用 . 方法将 PDB与人胚骨膜成骨细胞体外复合培养 1周后植入裸鼠体内 , 于术后 4周及 8周取出材料行聚乳酸 (ALP)活性及常规组织学检查 . 结果植入 8周时 ALP活性比 4周时强 , 并比单纯植入的材料强得多 ; 实验侧 4周见有多个软骨团块形成 , 8周时有片块状或条索状新骨形成 , 且软骨或新骨形成增多 , 而对照侧未见软骨或骨形成 . 结论 PDB复合成骨细胞体内植入后能形成软骨或骨 , 并随植入时间的延长 , 软骨或新骨形成增多 ; PDB可用于成骨细胞的支架材料 .
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股骨头缺损模型的建立及评估
目的：模拟临床上治疗Ⅱ期股骨头坏死的手术过程，制备兔股骨头缺损模型，并植入部分脱蛋白骨，评估股骨头缺损模型在Ⅱ期股骨头坏死治疗方面的应用价值。方法：成年健康新西兰白兔16只，切开关节囊，在头颈交界处开窗，建立股骨头缺损模型。32侧股骨头随机分为2组：(部分脱蛋白骨)PDPB组植入部分脱蛋白骨；另一组为空白对照。术后2，4，8周处死动物，标本行X射线及病理学观察。
结果：X射线、病理学观察及图像分析结果表明：PDPB组在术后2，4，8周股骨头缺损区修复组织存在新生骨组织，而空白对照组至术后8周仍修复组织以纤维为主。
结论：所建立的缺损模型在评价组织工程方法治疗Ⅱ期股骨头坏死的疗效方面具有可行性。 -
碱性成纤维细胞生长因子复合部分脱蛋白骨修复兔股骨头骨缺损的作用机理及相关性分析
目的:探讨bFGF/PDPB在修复兔股骨头骨缺损过程中成骨与再血管化作用的相关性及其作用机理.方法:成年健康新西兰白兔24只48髋随机分为3组,每组16髋,建立股骨头骨缺损模型,A组植入bFGF/PDPB、B组植入PDPB、C组为空白对照.动物于术后2、4、8周分批处死,并制备墨汁灌注标本,进行组织学和微血管观察及血管密度图像分析,计数成骨细胞数和破骨细胞数,测定骨钙含量,并进行相关性分析.结果:A组骨缺损修复早于B和C组,C组术后8周缺损区仍存在;A组术后8周骨钙含量和血管密度高于B和C组;术后各时点血管密度与成骨细胞数成正相关;与破骨细胞于术后2周成正相关;与骨钙含量于术后2周呈负相关,术后8周呈正相关.结论:bFGF具有成骨和再血管化作用,促进移植材料的爬行替代,在治疗股骨头坏死方面具备一定的潜能和优势.
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碱性成纤维细胞生长因子复合部分脱蛋白骨增强兔股骨头骨缺损修复作用的研究
目的探讨碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor, bFGF)复合部分脱蛋白骨(partially deproteinised bone, PDPB)对股骨头骨缺损的修复作用. 方法成年健康新西兰白兔24只48髋,随机分为3组(n=16),切开关节囊,在头颈交界处开窗,制备骨缺损模型.A组植入bFGF/PDPB,B组植入PDPB,C组为空白对照,于术后2、4和8周分别处死动物,制备血管墨汁灌注标本,样本行X线、组织学观察和图像分析. 结果组织学观察A组于术后8周股骨头骨缺损完全修复,B组8周时修复区移植材料未被完全爬行替代,C组仍有缺损残存.墨汁灌注显示,术后2周时A组修复区新生血管丰富,8周时与B组无明显差异,C组各时相点血管稀少.术后8周X线片评价,A组3侧优,2侧良,1侧可,优良率80%;B组1侧优,2侧良,2侧可,1侧差,优良率50%;C组1侧可,5侧差.术后8周修复组织骨小梁体积分数A组优于B组,具有统计学意义(P<0.05),A和B组都优于C组(P<0.05). 结论 bFGF与PDPB复合有效促进了兔股骨头骨缺损的修复.
关键词： 碱性成纤维细胞生长因子 部分脱蛋白骨 股骨头坏死 -
纤维粘连蛋白对部分脱蛋白骨细胞相容性影响研究
目的 研究纤维粘连蛋白(fibronectin,FN)对细胞在部分脱蛋白骨(partially deproteinised bone,PDPB)支架材料上的粘附、增殖的影响,为体内构建组织工程骨提供理论依据.方法 (1)用猪椎骨制备部分脱蛋白骨,纤维粘连蛋白修饰部分脱蛋白骨的细胞相容性制成部分脱蛋白生物骨,扫描电镜观察修饰过的部分脱蛋白生物骨表面情况; (2)取5×106/mL浓度脂肪干细胞接种部分脱蛋白骨和部分脱蛋白生物骨片,MTT法检测吸光度,评价纤维粘连蛋白脂肪干细胞在PDPB生长影响.结果 (1)猪椎骨制备部分脱蛋白骨孔隙分布均匀,由大量的羟基磷灰石纤维编织而成;部分脱蛋白生物骨表面可见大量颗粒状蛋白结晶. (2)部分脱蛋白骨细胞增殖曲线呈"S"形,部分脱蛋白生物骨细胞增殖曲线失去"S"形,第10天均达到高峰,各分组之间差异有统计学意义(P<0.001).结论 纤维粘连蛋白能促进细胞在PDPB支架材料上的增殖和粘附,改善部分脱蛋白骨的细胞相容性.
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bFGF复合PDPB修复股骨头缺损的实验研究(摘要)
目的:模拟临床上治疗股骨头坏死的开窗法的手术过程制备缺损模型,并植入bFGF/PDPB(碱性成纤维细胞生长因子+部分脱蛋白骨),以探bFGF对股骨头缺损的治疗作用.方法:成年健康新西兰白兔24只,切开关节囊,在头颈交界处开窗,建立缺损模型.
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部分脱蛋白骨的生物相容性研究
目的:探讨部分脱蛋白骨的生物相容性.方法:将部分脱蛋白骨植入兔的骶棘肌及股骨骨膜下,用组织学检测观察植入材料周围淋巴细胞浸润情况、材料与周围软组织的关系及材料对骨膜成骨的影响,并用ELISA间接法检测兔血清中的抗体.结果:植入背部骶棘肌的材料周围皆有软组织长入,包裹并形成纤维囊,难以将软组织和材料分开,植入骨膜下的材料皆与股骨相融合,有的已形成新骨,植入部位股骨增粗,材料植入后1周出现抗体,4周达高峰,以后逐渐下降.结论:部分脱蛋白骨无毒性作用,且对骨膜成骨无有害影响,引起的免疫反应较弱,机体能耐受,具有良好的生物相容性.
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部分脱蛋白骨的生物相容性研究
目的:探讨部分脱蛋白骨的生物相容性.方法:将部分脱蛋白骨植入兔的骶棘肌及股骨骨膜下,用组织学检测观察植入材料周围淋巴细胞浸润情况、材料与周围软组织的关系及材料对骨膜成骨的影响,并用ELISA间接法检测兔血清中的抗体.结果:植入背部骶棘肌的材料周围皆有软组织长入,包裹并形成纤维囊,难以将软组织和材料分开,植入骨膜下的材料皆与股骨相融合,有的已形成新骨,植入部位股骨增粗,材料植入后1周出现抗体,4周达高峰,以后逐渐下降.结论:部分脱蛋白骨无毒性作用,且对骨膜成骨无有害影响,引起的免疫反应较弱,机体能耐受,具有良好的生物相容性.
