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家蚕制品的急性毒性及微核试验
我国的养蚕业已有5 000多年历史.家蚕一直被认为是对人类有益无害的重要经济昆虫.随现代科学技术的发展,通过基因操作,已将家蚕核型多角体病毒作为新型表达载体,用其宿主家蚕用为生物反应器生产重要的医药产品.验证这个表达环境对人体的安全性及对系统的推广应用具有重要的意义.为此,我们参照了国家药物评价指南,对家蚕幼虫和蛹的体液、蚕卵的急性毒性试验,致突变性进行评价,为该系统的环境和人体危险度评估,也为家蚕的综合利用提供参考依据.
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传统中药蝉花的活体家蚕人工培养
目的:为实现蝉花的家蚕活体人工培养,为蝉花的培养开辟一条新的思路.方法:采集分离自我国8个自然保护区及韩国济洲岛的共20株蝉拟青霉菌株,采用浸渍法感染家蚕五龄期幼虫及蚕蛹,观察它们对家蚕的感染及产生孢梗束的情况.结果与结论:20株蝉拟青霉对家蚕幼虫和蚕蛹都有不同程度的感染,感染后期部分菌株能产生孢梗束.从感染率和产生孢梗束情况来看,蚕蛹效果比幼虫更好.
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僵蚕的药月价值
僵蚕是家蚕幼虫在吐丝前因感染白僵菌、发病致死的僵化虫体,又名白僵蚕、"天虫".僵蚕性味:性平,味成、辛;入肝,心、脾、肺四经.
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家蚕幼虫化学成分初步研究
目的:采用系统预试法对家蚕幼虫可能的化学成分进行预试验,初步探索家蚕幼虫的化学成分.方法:采用圆形滤纸层析预试法和试管预试法对家蚕幼虫的水提取液、95%乙醇提取液、乙醚提取液进行研究,通过多种指示剂和显色剂的显色反应或沉淀反应,对家蚕幼虫可能含有的化学成分进行初步研究.结果:家蚕幼虫含有生物碱类、黄酮类、酚类、内酯及香豆素类、鞣质、氨基酸、蛋白质、有机酸、糖及苷类、挥发油及油脂类成分.结论:初步确定家蚕幼虫含有多种有效成分,为进一步研究家蚕幼虫的生物活性成分及开发利用提供了实验基础.
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昆虫核型多角体病毒在寄生虫学中的应用
利用核型多角体病毒(nuclear polyhedrosis virus,NPV)作为载体在昆虫细胞或昆虫个体中表达外源基因是近年发展起来的新型表达系统.自从1983年Smith等[1]报道了人β-干扰素基因在此系统的成功表达后,至今已有许多实验室从事这一表达系统的研究[2~4].目前常用的系统有苜蓿银纹夜核型多角体病毒(Autographa californica nuclear polyhedrosis virus,AcNPV)/草地夜蛾细胞和家蚕核型多角体病毒(Bombyx mori nuclear polyhedrosis virus,BmNPV)/家蚕细胞或家蚕幼虫.
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重组人胰岛素样生长因子-1纯化及其鉴定的研究
目的:利用亲和层析法将家蚕幼虫中高效表达的重组人胰岛素样生长因子(recombinant human insulin-like growth factor-1,rhIGF-1)纯化并鉴定,以得到具有免疫学活性和生物学活性的rhIGF-1生物制品.方法:蚕血淋巴中rhIGF-1初步提纯去除杂质,采用亲和层析法纯化rhIGF-1.以ELISA法测定纯化产物中rhIGF-1含量,用SDS-PAGE和Western-blot分析鉴定rhIGF-1纯度及免疫学活性,4-甲基偶氮唑蓝(tetrazolium salt,MTT)法观察其对MCF-7细胞增殖的影响.结果:纯化后rhIGF-1纯度约为40%,Western blot分析发现,主要纯化产物相对分子质量为7.5 ku的成熟hIGF-1,所含非目的产物与hIGF-1无免疫交叉反应.细胞活性刺激实验显示,rhIGF-1纯品对MCF-7细胞有较好的刺激活性,促增殖能力优于来源于大肠杆菌的rhIGF-1产品.结论:蚕血淋巴中的rhIGF-1经亲和层析后初步得到纯化,并显示良好的免疫学活性和生物学活性.
关键词: 重组人胰岛素样生长因子-1 家蚕幼虫 亲和层析 纯化产物 活性