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氟幼灵的遗传毒性研究
氟幼灵是农业上广泛应用的一种杀虫剂.尤其对棉铃虫的防治效果显著.本实验根据<农药安全性毒理学评价程序>要求,在小鼠急性经口LD50属于低毒级研究的基础上,进行致突变毒性的初步探讨.
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有机磷与拟除虫菊酯农药联合作用的研究
目的研究有机磷与拟除虫菊酯农药的联合作用.方法用点滴法测定棉铃虫、用寇氏法测定SD大鼠的辛硫磷(Pho)与氰戊菊酯(Fen)、辛硫磷与三氟氯氰菊酯(Clo)、丙溴磷(Pro)与高效氯氰菊酯(β-Cyp)混剂及单剂的LD50及95%可信限,按谭福杰法计算混剂对棉铃虫幼虫的共毒系数(CTC),并用预期与实测LD50对比法和Logistic回归分析法判断混剂对大鼠的联合作用特征.结果3种组合的混剂对棉铃虫幼虫都有明显的增效作用,Pho+Fen、Pro+Clo和Pro+β-Cyp的CTC分别为340、797和172;Pho+Fen复配有协同作用,其预期LD50(E)与实测LD50(O)的比值--E/O值、CTC和Logistic回归分析的联合作用参数(β3)分别为2.69、285和0.001 5;Pho+Clo复配有相加作用或协同作用,其E/O值、CTC和β3分别为1.71、165和0.000 3;Pro+β-Cyp复配有协同作用,其E/O值、CTC和β3值分别为1.91、180和0.000 2.结论有机磷与拟除虫菊酯混剂增效同时也普遍存在增毒问题,理想混剂的获得取决于混剂中高比例的高效低毒单剂.
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实验棉铃虫携带微生物的检测
目的 通过对本所长期室内人工饲育的不同季节不同龄期的棉铃虫(Heliothis armigera)进行体内外的微生物分离培养和鉴定,掌握棉铃虫体内外微生物携带情况.方法 利用普通培养基和真菌培养基分别对棉铃虫体内外进行微生物分离培养、纯化,通过菌落形态观察、革兰氏染色和显微镜观察进行初步鉴定,然后应用16SrRNA和18SrDNA分析技术对分离的细菌和真菌进行进一步的鉴定.同时,利用PCR技术对棉铃虫的高度致病病毒-核型多角体病毒(HaNPV)进行扩增检测.结果 分离培养得到4株芽孢杆菌(Bacillus):分别为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis Cohn),地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis),蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)和芽孢杆菌(Bacillus).4株真菌(fungi):其中2株为酵母菌(Yeasts),1株为青霉菌(Aenicil lium Link),1株为曲霉菌(Aspergillus Micheli).检测核型多角体病毒(HaNPV)为阴性.结论 室内人工饲养的棉铃虫生长状态良好,虫体健康,未携带致病微生物,为科研提供的实验昆虫质量稳定可靠.
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逮棉虫记工分妙招
学者李怀印在其著作《乡村中国纪事:集体化和改革的微观历程》一书中提到一个有趣的历史细节——1978年夏,在一场大旱之后,其故乡秦村(即江苏东台县某大队第十一生产队)的棉田里,虫害泛滥,几乎失去控制.队里多次喷洒农药,均不见效,因为此时棉铃虫已产生了抗药性.剩下的唯一办法,是手工逮虫子.具体做法是用筷子做成的土制镊子,把虫子从花朵里夹出,放入装有盐水的瓶子里淹死.
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棉铃虫核多角体病毒在中肠及其它组织中增殖过程的电镜观察
应用电子显微镜技术观察了核多角体病毒在棉铃虫体内的增殖方式。在中肠细胞内增殖的核衣壳极少被囊膜包围，也很少形成多角体。它们能大量地释放到体腔，迅速感染其他敏感组织。在其他敏感组织内增殖的核衣壳大部分被囊膜包围形成病毒粒子，且随机包涵在多角体中形成核多角体。
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核型多角体病毒的增殖与棉铃虫血淋巴酯酶的变化
核型多角体病毒(NPV)对同源棉铃虫有很强的毒杀作用,是重要杀虫资源.病毒感染导致宿主代谢紊乱,引起一系列生化反应的变化,可通过一定方法观察到其表征,此为病毒感染的病理生化特征.昆虫血淋巴对于病毒感染引起的全身症状具有重要作用,并影响宿主物质和能量代谢的性质与水平,反映出病毒-宿主的互作关系.本文以血淋巴酯酶同工酶(EST)为感病指标,对其感染变化进行研究.
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2.5％高效氯氟氰菊酯水乳剂的急性毒性研究
高效氯氟氰菊酯是一种拟除虫菊酯类杀虫剂,同其它菊酯类杀虫剂相比,其化学结构式中增添了3个氟原子,使杀虫活性提高,并且具有较强的渗透作用,增强了耐雨性,延长了持效期.该药能有效地防治粮油作物、棉花、果树和蔬菜上的多种害虫,如棉铃虫、菜青虫、玉米螟、苹果黄蚜、小菜蛾、菜粉蝶等,也可用于卫生害虫的防治,在农业和畜牧业以及卫生杀虫中广泛应用[1,,2].目前有关2.5％高效氯氟氰菊酯水乳剂安全性方面的文献资料较少,我们对郑州某公司生产的2.5％高效氯氟氰菊酯水乳剂药进行了急性毒性试验,现报告如下.
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抗棉铃虫Ⅳ型几丁质酶(HaCHT4)小鼠多克隆抗体的制备与鉴定
目的 原核表达棉铃虫Ⅳ型几丁质酶(HaCHT4)并制备其多克隆抗体.方法 在大肠杆菌中表达组蛋白-HaCHT4融合蛋白(His-HaCHT4),镍柱纯化目的蛋白,经足垫加皮下注射免疫小鼠.4次免疫后,用ELISA检测抗His-HaCHT4多克隆抗体的效价,Western blot法检测其免疫特异性.结果 成功纯化His-HaCHT4融合蛋白,小鼠抗His-HaCHT4的多克隆抗体的滴度高于1∶204 800.Western blot结果显示该抗体能与His-HaCHT4融合蛋白及棉铃虫体中的天然HaCHT4结合,但不能与黄粉虫的蛋白结合.结论 成功原核表达和纯化了His-HaCHT4,制备了特异性的鼠多克隆抗体.
关键词： 棉铃虫 Ⅳ型几丁质酶(HaCHT4) 多克隆抗体 免疫特异性 -
活体电穿孔法辅助核酸免疫制备小鼠抗棉铃虫精氨酸激酶的抗体
目的 利用活体电穿孔法将携带有棉铃虫精氨酸激酶(HarmAK)基因的表达质粒导人昆明小白鼠制备抗体.方法 在构建重组质粒pcDNA3-HarmAK并测序验证序列的正确性后,利用活体电穿孔辅助核酸免疫的方法将重组质粒pcDNA3-HarmAK导入到小鼠体内,免疫5次后,用ELISA检测确定抗体的效价,并对抗体的特异性进行Western blot法检测.结果 小鼠抗HatmAK血清的效价达到1∶40 000,Western blot法检测的结果显示此抗血清能与融合蛋白His-HarmAK和棉铃虫总蛋白中的AK蛋白特异性结合.结论 采用活体电穿孔辅助核酸免疫的方法制备了高滴度和特异性的小鼠抗HarmAK的抗体.
