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大豆异黄酮和玉米赤酶烯酮对乳腺癌细胞株T47D细胞增殖的影响
环境中天然存在或污染的各类化学物质能够模拟或干扰人和动物内分泌功能,称为环境内分泌干扰物,环境雌激素是其中的一大类.外源性的天然或合成的雌激素一旦摄入体内,在达到一定浓度时,都能够与靶细胞上的ER结合,模拟E2或拮抗E2的生理作用,改变靶器官的生长、发育及生理功能[1-3].
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高效液相色谱-二极管阵列检测器同时测定中药中玉米赤酶烯酮和α-玉米赤霉烯醇
目的:建立同时测定不同中药中真菌毒素玉米赤酶烯酮(ZON)和α-玉米赤霉烯醇(α-ZOL)的高效液相色谱法,并采用高效液相色谱-串联质谱法( HPLC-ESI-MS/MS)对阳性结果进行确证.方法:样品经甲醇-水溶液( 80:20,v/v)提取,免疫亲和柱净化,C18分析色谱柱分离,以水-乙腈(50:50,v/v)为流动相,检测波长236nm,测定结果采用HPLC-ESI-MS/MS进行确证.结果:在0.02-2.50μg/mL范围内,ZON和α-ZOL的线性相关系数均为0.9998.通过添加回收试验,ZON 3个添加水平的回收率为83.8％-98.1％,相对标准偏差为0.9％-7.3％;α-ZOL 3个添加水平的回收率为88.4％-95.5％,相对标准偏差为1.9％-6.2％.ZON和α-ZOL的定量限(S/N=10)分别为18μg/kg和15μg/kg.结论:该方法简便,准确,适用于中药中微量真菌毒素ZON和α-ZOL的检测.
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玉米赤霉烯酮抗独特型单抗的制备及特异性分析
目的 制备并鉴定玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEN)抗独特型单抗Ab2β-1D5.方法 将ZEN单抗1G4与载体蛋白KLH偶联作为免疫原,免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞,与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0融合后,以ZEN单抗Fab片段作为包被抗原,间接ELISA法筛选阳性杂交瘤细胞.经小鼠腹腔注射杂交瘤细胞,制备腹水型单抗,并经Protein G亲和层析柱进行纯化.间接ELISA法检测ZEN抗独特型单抗的抗体效价及特异性;间接竞争ELISA法检测ZEN抗独特型单抗类型、灵敏度及其与ZEN毒素间的相关性.结果 共获得6株稳定分泌ZEN抗独特型单抗的杂交瘤细胞株,腹水型抗体效价为1∶1.2×105～ 1∶2.0×105;6株单抗均为β型抗独特型抗体(Ab2β),其中Ab2β-1D5抗体灵敏度高,对ZEN的IC50值达10.09 ng/ml,其与ZEN毒素呈线性相关(r=0.990);ZEN抗独特型单抗与莱克多巴胺、重金属铅、铬及虾过敏原单抗均无交叉反应,特异性良好.结论 已成功制备玉米赤霉烯酮抗独特型单抗,该抗体与ZEN间存在“内影像”关系,可以替代ZEN毒素标准品,用于建立ZEN的无毒免疫学检测技术.
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高效液相色谱-串联质谱法同时测定中药中的玉米赤酶烯酮和α-玉米赤霉烯醇
目的:建立同时测定中药中真菌毒素玉米赤酶烯酮(ZON)和α-玉米赤霉烯醇(α-ZOL)的高效液相色谱-串联质谱法,对市售中药材及其制品中的ZON和α-ZOL进行检测.方法:样品经甲醇-水溶液(80:20,v/v)提取,免疫亲和柱净化,C<,18>分析色谱柱分离,以0.1%(v/v)甲酸-水/0.1%(v/v)甲酸-乙腈为流动相,采用梯度洗脱方式进行液相色谱分离,多反应监测模式,以染料木素为内标进行定量.结果:在0.1 ng·ml<'-1>～500 ng·ml<'-1>范围内,ZON和α-ZOL的线性相关系数分别为0.9981和0.9988.通过添加回收试验,两种毒素的定量限(S/N=10)均为0.12 μg·kg<'-1>,ZON三个添加水平的回收率为74.4%～96.5%,相对标准偏差为1.7%～5.0%;α-ZOL三个添加水平的回收率为89.3%～98.3%,相对标准偏差为1.5%～8.1%.结论:该方法简单快速、灵敏度和选择性高,适用于中药中微量真菌毒素ZON和α-ZOL的检测.
关键词： 高效液相色谱-串联质谱 中药 玉米赤酶烯酮 α-玉米赤霉烯醇 -
高效液相色谱法和超高效液相色谱-串联质谱法测定玉米油中玉米赤酶烯酮的比较
目的 比较高效液相色谱法(HPLC)和超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)2种方法测定玉米油中玉米赤酶烯酮的优点、缺点.方法 分别以HPLC和UPLC-MS/MS进行测定,考察2种方法测定结果的相关性,比较2种方法的性能指标.结果 2种方法的定量结果差异无统计学意义(P＞0.05),具有良好的相关性;采用高效液相色谱法时,对于检出限≥5.0 μg/kg的样品,2种方法的检出率基本相符;对于检出限＜5.0 μg/kg的样品,由于UPLC-MS/MS具有更高的灵敏度,该方法的检出率高于HPLC.结论 2种方法均能应用于玉米油中玉米赤酶烯酮的测定.高效液相色谱法因具有准确、实用和配置成本相对低的优点,更适合推广,可用于玉米油中玉米赤酶烯酮的常规监测;超高效液相色谱-串联质谱法的灵敏度高,但配置成本高,更适用于确认验证.
关键词： 高效液相色谱法 超高效液相色谱-串联质谱法 玉米油 玉米赤酶烯酮
