组蛋白甲基转移酶MLL1促进肾小管上皮细胞转分化

目的 检测组蛋白甲基转移酶MLL1在单侧输尿管梗阻(UUO)所导致的肾间质纤维化过程中的表达,探讨其在肾小管上皮细胞间质转分化(EMT)中的作用.方法 将42只雄性SD大鼠随机分为正常组,假手术组,UUO术后1d、1周、2周、3周和4周组,利用实时荧光定量PCR和Western印迹法分别检测大鼠肾组织MLL1、Ⅲ型胶原纤维(Col3α1)的表达及EMT的情况.利用siRNA-MLL1质粒抑制HK-2细胞中MLL1基因的表达后,以TGF-β1进行诱导处理,Western印迹法检测细胞中MLL1、EMT相关指标、Col3α1及组蛋白H3第4位赖氨酸三甲基化(H3K4me3)的蛋白水平;同时利用染色质免疫共沉淀(CHIP)对EMT相关基因启动子区域H3K4me3水平进行检测.结果 (1)与正常和假手术组相比,UUO术后大鼠的肾功能随着梗阻时间的增加不断丧失(P＜0.05).(2)与正常和假手术组相比,UUO术后1周和2周时大鼠肾组织肾间质纤维化为显著(均P＜ 0.05),MLL1及EMT相关指标的表达量也高(均P＜ 0.05).(3)与对照组相比,3 ng/ml的TGF-β1作用细胞后MLL1的表达量高(P＜0.05),而在此浓度下HK-2细胞发生EMT也为显著(P＜0.05).(4)将MLL1敲除后,3 ng/mlTGF-β1所诱导的HK-2细胞EMT被显著抑制(P＜0.05),α-SMA和Vimentin启动子区域的H3K4me3水平也显著下降(P＜0.05).结论 MLL1能够促进TGF-β1所诱导的HK-2细胞EMT的发生,其机制可能是使α-SMA和Vimentin启动子区的组蛋白H3第4位赖氨酸发生三甲基化(H3K4me3).

氟非尼酮减缓糖尿病肾病模型小鼠肾纤维化

目的 观察氟非尼酮(AKF-PD)对糖尿病肾病模型db/db小鼠的疗效,并初步探讨其可能的作用机制.方法 (1)14只野生型8周龄小鼠为正常对照组.42只8周龄db/db小鼠采用完全随机的方法分为模型组、AKF-PD (250 mg· kg-1·d-1)治疗组及氯沙坦(20 mg·kg-1·d-1)治疗组,每组14只,雌雄各半.从10周龄起治疗组分别给予相应剂量的药物连续灌胃18周,正常组及模型组给予等量药物溶媒(0.5％羧甲基纤维素钠)灌胃.尾静脉采血测血糖,ELISA测定24 h尿白蛋白量,PAS染色观察各组小鼠肾脏组织病理改变,免疫组织化学检测Ⅳ型胶原及纤连蛋白(FN)在肾组织的表达.(2)体外培养小鼠肾小球系膜细胞(MES-13),分为正常糖组(5.5 mmol/L葡萄糖)、高渗组(5.5 mmol/L葡萄糖+19.5 mmol/L甘露醇)、高糖组(25.0 mmol/L葡萄糖)、AKF-PD组(25.0 mmol/L葡萄糖+400 mg/L AKF-PD)及氯沙坦组(25.0mmol/L葡萄糖+2 μmol/L氯沙坦).药物作用72 h后,实时定量PCR检测细胞Ⅰ型胶原、Ⅳ型胶原、转化生长因子β1 (TGF-β1)mRNA的表达,ELISA检测细胞培养液上清中的TGF-β1蛋白含量.结果 (1)与野生型小鼠比较,db/db小鼠体型肥胖,血糖明显升高,伴有大量白蛋白尿,发生肾小球肥大、系膜区扩张等病理改变,肾小球硬化指数升高(P＜0.01),肾组织Ⅳ型胶原和FN表达均增加(均P＜0.01);与db/db小鼠比较,AKF-PD及氯沙坦治疗组小鼠24h尿白蛋白量降低(均P＜ 0.01),肾小球肥大及系膜区扩张减轻,肾小球硬化指数降低(均P＜0.01),肾组织中Ⅳ型胶原及FN的表达减少(均P＜0.01).(2)与正常糖组比较,高糖组小鼠肾小球系膜细胞Ⅰ型胶原、Ⅳ型胶原mRNA表达及TGF-β1 mRNA和蛋白表达均升高(均P＜0.01).与高糖组比较,AKF-PD组、氯沙坦组小鼠肾小球系膜细胞Ⅰ型胶原、Ⅳ型胶原mRNA表达,及TGF-β1 mRNA和蛋白表达均降低(均P＜0.05).结论 AKF-PD可能通过作用于肾小球系膜细胞,减少TGF-β1的表达,减少胶原合成,从而抑制db/db小鼠肾纤维化.

托伐普坦治疗肾病综合征患者水肿的疗效与安全性

目的 观察与评价托伐普坦治疗肾病综合征(NS)患者水肿的近期疗效与安全性.方法 纳入非低血容量、血钠正常的NS水肿12例患者为研究对象.吲哚菁绿-脉搏染料光密度法检测血容量.口服托伐普坦利尿治疗,起始剂量15 mg/d,渐加量至30 mg/d,疗程7d,观察托伐普坦的利尿效果及电解质紊乱(高钠血症)、血栓栓塞并发症、低血压和(或)急性肾损害等不良反应.结果 与治疗前相比,托伐普坦治疗后患者尿量显著增加(F=5.792,P＜ 0.001),体重显著下降(F=24.086,P＜0.001);血钠上升[(141.1±0.5) mmol/L比(139.1±0.6)mmol/L,P＜0.001],有3例次(3.6％)患者出现轻度高钠血症(高146.5 mmol/L),停服托伐普坦1d后血钠恢复正常,恢复用药.治疗过程中无血栓栓塞、低血压和(或)急性肾损害等不良反应发生.结论 托伐普坦15～ 30 mg/d短期治疗非低血容量、血钠正常的NS水肿可获得良好利尿效果,无严重不良反应发生.

肾移植术后急性排斥反应相关的T细胞受体免疫组库变化

目的 为评估肾移植术后急性排斥患者的免疫状态,提高受者及移植物术后早期及远期存活率,本研究动态地检测急性排斥患者T细胞受体(TCR)的免疫组库变化.方法 结合多重PCR扩增和高通量测序技术,动态分析肾移植过程中不同时间点的TCR β链互补决定区3(CDR3)的多样性和图谱特征.结果 急性排斥患者的TCR CDR3的多样性在肾移植术后1d降至低,在急性排斥发生前其多样性较术后1d上升,甚至超过术前水平.急性排斥反应发生前受者特异性上调的CDR3氨基酸序列被筛选出来.此外,急性排斥反应发生前存在TRB V、TRB J基因亚家族的偏向取用,这可能与T细胞介导的对移植肾抗原的免疫识别和应答有关.结论 肾移植术后急性排斥患者的免疫图谱的多样性降低,且TCR β链V和J亚家族呈现偏向取用的现象.

血液透析相关性发热一例

发热是维持性血液透析(MHD)患者常见的并发症,发热原因包括感染、热原反应、输血反应、高温透析和原因不明等[1].感染部位以呼吸道感染多见,血管通路次之,其中自体动静脉内瘘(AVF)感染率约为2％ ～ 3％[2].现将1例血液透析相关性发热病例报告如下.患者男,42岁.因高血压12年,MHD 3年,发热2个月余,于2015年11月27日入院.患者2002年因头晕发现血压220/130 mmHg,未坚持服降压药.尿蛋白反复(1+～3+).2009年发现Scr逐渐升高,2012年9月查Scr＞ 1000 μmol/L,遂建立左前臂AVF并接受MHD治疗(5次/2周).2015年9月在当地透析结束后出现高热伴寒战,体温高达40℃,持续5～6h后热退,透析间期无不适.当地医院查血培养正常,血白细胞正常,中性粒细胞比率稍高,胸部CT未见明显异常.曾口服头孢类药物1周后热退,停药后再次出现发热.11月16日转至另一家血液净化中心透析后仍发热,体温高达40℃,于2015年11月27日转入本院.既往有甲型肝炎及输血史.入院查体:体温37.3℃,血压142/98 mmHg,慢性病容,睑结膜稍苍白,心肺腹无异常,左前臂AVF处伤口愈合良好,可触及明显震颤,内瘘旁1～2cm处组织有硬结,无明显压痛.患者诊治经过见表1,入院后的体温变化见图1.

血液透析血管通路研究的动物模型

血管通路相关并发症是慢性血液透析(血透)患者住院的主要原因.近年来,尽管临床上已开展诸多策略致力于解决这一重要问题,但迄今减少动静脉内瘘(AVF)相关并发症的方法并没有显著改善AVF通畅率.AVF丧失功能(失功)的潜在病理生理学机制仍有待于进一步的研究阐明.各种刺激因素,包括:局部血气因素、重复穿刺、先天性血管变异、内皮功能障碍、炎症和血小板活化等,都可导致AVF和移植内瘘(AVG)内膜增生(IH)、血栓形成Ⅲ,而上述因素在AVF失功中的影响程度仍存在争议.

慢性肾脏病患者不安腿综合征诊治的研究进展

不安腿综合征(restless leg syndrome,RLS)又称不宁腿综合征,是指静息状况下出现的难以名状的肢体不适感,从而迫使肢体发生不自主的运动,在健康人群发病率较低.本病由英国医生Thomas Willis在1685年首先报道.1945年瑞典学者Ekbom首次使用了RLS这一术语,并对本病的临床表现进行详细的描述,因此国际上也将RLS称为Willis-Ekbom disease(WED).国际不安腿综合征研究小组(International Restless Legs Syndrome Study Group,IRLSSG)曾多次修订诊断标准,新诊断标准为2014年版[1].慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)患者RLS的发病率高达20％,远高于健康人群,而且随着肾功能下降患病的风险逐渐增高[2].

白细胞介素18及其在肾脏疾病中的研究进展

白细胞介素18(interleukin-18,IL-18)是近年来新发现的一种细胞因子,于1995年由Okamura等[1]从热灭活痊疮丙酸杆菌和脂多糖共处理的小鼠肝脏提取物中纯化出来,起初命名为γ干扰素诱生因子(IGIF).在1996年Ushio等[2]以鼠IGIF为探针克隆出人IGIF的cDNA并在大肠杆菌中表达后,被命名为IL-18.它是IL-1超因子家族中的成员之一,以非活性前体存在于健康人和动物的几乎所有细胞中,需要通过含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶1(caspase-1)处理转化为活性细胞因子[3].IL-18可增强自然杀伤细胞(natural killer cell,NK)和T淋巴细胞的细胞毒效应,诱导γ干扰素(IFN-γ)产生,加强Fas/FasL介导的Th1细胞、NK细胞的细胞毒作用,从而发挥极强的防御功能、抗感染、抗超敏反应等生物学活性,并与自身免疫疾病、炎症性疾病、代谢性疾病等多种疾病的发生发展密切相关.

前臂远端动静脉内瘘头静脉手背属支结扎对通畅率的影响

远端桡动脉-头静脉自体动静脉内瘘(radio-cephalic arteriovenous fistula,RCAVF)可以提供较多的穿刺部位,且内瘘丧失功能(失功)后较易翻修,已成为血液透析患者血管通路的第一选择.起源于拇指和食指之间的手背静脉网,在腕横纹近侧4～5厘米处的腕部头静脉手背支汇入主干[1].不同的透析中心对于是否结扎手背属支有不同的实践方法.主张结扎的一方认为,手背属支分叉处不可避免的有血流动力学异常,容易增加该处狭窄的发生率,预防性结扎可提高内瘘的通畅率[2].而另一方认为手背属支可作为一个备用通路,当主干闭塞后,可以通过侧支代偿循环而增加通畅率[3].我们采用随机对照非盲的方法,比较了腕部内瘘头静脉手背属支结扎与否对内瘘1年初始通畅率及二级通畅率的影响.

2013-2015年山西省维持性血液透析患者的流行病学调查

慢性肾脏病(CKD)已成为严重影响人类健康的公共卫生问题[1].血液透析(HD)是一种终末期肾脏病(ESRD)患者的主要肾脏替代治疗方式.本研究对我省2013年至2015年间维持性血液透析患者的发病率及年底点患病率、原发病、透析龄、首次透析血管通路、透析频率等情况进行流行病学调查,初步了解山西省血液透析患者现状,对研究危险因素、预后分析等提供数据基础,也为血液净化的质量控制提供数据支持.

维持性血液透析患者的透后疲乏及相关因素分析

目的 调查维持性血液透析(maintenance hemodialysis,MHD)患者透析后疲乏感(post-dialysis fatigue,PDF)的现状,分析影响MHD患者透析后疲乏感的相关因素,提供可能有效的干预措施.方法 选取南京医科大学第二附属医院血液净化中心的MHD患者120例,采用开放式的问卷调查获取临床资料,记录透析前后的相关指标,采集患者的血常规、生化及血气等结果进行统计分析.结果 本研究回收有效问卷109例,超过半数的研究对象存在透析后疲乏,疲乏需要恢复的时间不同,中位数(四分位数间距)为2.0(0.0,3.0)h.本研究中,30.3％患者无明显的透析后疲乏感,35.8％患者的疲乏在透析后0.5～ 2.0 h恢复,22.0％在透析后3～4h恢复,11.0％在透析后5～12h,0.9％需要更长时间来恢复.根据疲乏恢复时间的不同分组,3组的超滤量、超滤率、体重增长的百分比以及透后的血钠、乳酸、碳酸氢根水平、乳酸的变化差异均有统计学意义.Logistic回归分析显示,透析后疲乏恢复时间与超滤量增加(OR=2.35,95％CI 1.44～ 3.83)、透后的血钠降低(OR=0.75.95％CI 0.65～ 0.88)、乳酸的升高(OR=3.16,95％CI 1.32～ 7.55)有关.结论 MHD患者的透后疲乏感发生率高,大部分需要睡眠或休息来缓解,透析后疲乏的恢复时间与乳酸的升高密切相关,因此,乳酸可能是引起透析后疲乏的重要因素.透析过程中乳酸升高的原因值得进一步研究.

维持性血液透析患者静息能量代谢率与人体测量参数的相关性

目的 探讨生物电阻抗法评估血液透析患者静息能量代谢(REM)的可行性,分析REM与人体测量参数的相关性.方法 病例来自贵州省11家血液透析中心接受维持性血液透析(MHD)的成年患者.用生物电阻抗分析仪测量765例MHD患者的静息代谢率(RMR)及人体参数.由同一研究员采用标准方法测量患者身高、体重、上臂围、皮褶厚度、左小腿围和握力等人体测量指标,计算上臂肌围.比较不同性别MHD患者REM及人体测量指标差异;按RMR水平四分位分组,比较各组间人体测量指标的差异;Spearman相关性分析及多元线性回归分析RMR与人体测量指标的相关性.结果 男性MHD患者RMR水平明显高于女性[1591(1444,1764) Rcal/d比1226(1104,1354) Rcal/d,P＜0.001].与低RMR组相比,高RMR组患者上臂围、上臂肌围、左小腿围和握力值较高,差异有统计学意义(均P＜0.05).多元线性回归分析结果显示,身高(β=0.572)、小腿围(β=0.273)、上臂肌围(β=0.092)和有蛋白质能量消耗(PEW) (β=-0.184)是RMR的独立影响因素(均P＜0.05).结论 小腿围、上臂肌围与RMR呈正相关,后者可作为评估MHD患者蛋白质能量消耗的新指标.

结核菌特异性γ干扰素检测在腹膜透析相关结核性腹膜炎诊断中的应用价值

尿毒症透析人群由于细胞免疫受损、贫血、营养不良等,其结核感染率是普通人群的6～ 25倍[1-4].结核性腹膜炎(tuberculous peritonitis,TBP)是腹膜透析患者好发的结核感染形式[5].由于TBP确诊周期长,误诊率高,常延误治疗时机,导致腹膜功能受损,腹透技术失败.因此,早期、快速诊断TBP一直是肾脏病医师所面临的挑战.

信息动态

维持性血液透析患者疲乏发生率及其影响因素

目的 调查维持性血液透析(MHD)患者的疲乏发生率,分析其相关影响因素.方法 选取2016年1月至2017年3月间于新疆医科大学第一附属医院、新疆伊犁哈萨克自治州友谊医院和伊犁州中医院3家透析中心接受MHD患者289例为研究对象.用国际标准疲乏评定量表(FAI)评估疲乏状况,计算MHD患者疲乏发生率;用主观综合性营养评估(SGA)评定量表评估患者蛋白能量消耗(PEW)状况.按照FAI评分将患者分为疲乏组和非疲乏组,比较两组患者临床资料、血生化指标的差异;用Logistic回归法分析MHD患者发生疲乏的危险因素.结果 MHD患者疲乏发生率为83.0％,蛋白能量消耗发生率为62.6％.疲乏组患者的血总胆固醇值低于非疲乏组(P＜0.05),两组间SGA评分值间的差异亦有统计学意义(P＜ 0.001).单因素Logistic回归分析结果显示,高SGA评分(OR=1.312,95％CI为1.163～1.481,P＜ 0.001)、低血总胆固醇(OR=0.661,95％CI为0.496～ 0.880,P=0.005)是疲乏发生的危险因素.多因素Logistic回归分析结果显示,高SGA评分(OR=5.286,95％CI为2.078～ 13.442,P＜ 0.001)是疲乏的独立危险因素.结论 MHD患者疲乏和蛋白能量消耗的发生率高,蛋白能量消耗是疲乏发生的独立危险因素.

长透析龄腹膜透析患者腹膜钙化发生率及影响因素

目的 探讨长透析龄腹膜透析(PD)患者腹膜钙化的发生率及相关影响因素,分析腹膜钙化与血管钙化的相关关系.方法 选择在北京大学人民医院肾内科接受腹膜透析4年以上并规律随访的患者进行横断面研究.应用腹部CT平扫判断患者腹膜钙化及腹主动脉钙化的发生情况.按照是否存在腹膜钙化和透析龄分组.收集患者人口学及临床资料、钙磷代谢[包括血钙、磷、碱性磷酸酶(ALP)、甲状旁腺激素(iPTH)等]、透析充分性等指标.用Logistic回归模型法分析腹膜钙化的影响因素;用Spearman相关分析分析腹膜钙化与血管钙化的相关性.结果 共79例PD患者被纳入研究,男32例(40.5％),平均年龄(58.7±13.1)岁,中位透析龄77.25(58.00,88.00)个月,主要原发病为慢性肾小球肾炎(46.8％),其次为糖尿病肾病(30.4％).6例患者存在腹膜钙化,占7.6％,77例患者伴有不同程度的腹膜增厚(97.5％).腹膜钙化在透析龄4年以上者中的发生率为7.6％,6年以上者为10.3％,8年以上者为18.8％,10年以上为40.0％,呈逐年上升趋势.与无腹膜钙化组相比,腹膜钙化组患者服用维生素D剂量较大(P＜ 0.001),血三酰甘油水平较低(P=0.041).与透析龄＜9年组相比,透析龄≥9年组患者腹膜钙化患者比例较高(P=0.013).Logistics回归分析结果显示,服用大剂量活性维生素D是腹膜钙化发生的独立危险因素(B=2.667,OR=14.394,95％ CI 1.655～125.165,P=0.016).腹主动脉钙化发生率为93.7％.Spearman相关分析结果显示,腹膜钙化与血管钙化间无相关性(r=0.70,P=0.542).结论 腹膜钙化在长透析龄PD人群中发生率较低,可能与服用大剂量活性维生素D、长透析龄相关.