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miRNAs在非小细胞肺癌应用中的研究进展
肺癌位列全球癌症相关死亡因素之首,五年生存率小于15%.其中,约85%的肺癌患者为非小细胞肺癌(NSCLC)患者[1].miRNAs是一类小的、非蛋白编码的RNA,主要生理功能包括调控细胞和器官的生长、发育,调节细胞增殖和凋亡,参与代谢和应激反应等[2].随着分子水平研究的发展,临床已逐步开始对非小细胞肺癌患者进行分类靶向治疗,并取得部分成效.然而,潜在的肿瘤异质性相关机制依旧为人所知甚少[3].本文简要概括了miRNAs与肺癌的研究历史及研究成果;全面叙述了miRNAs在正常细胞和NSCLC细胞中可能存在的作用机制;强调了miRNAs在非小细胞肺癌的早期诊断和预后判断中起的作用;总结了miRNAs对NSCLC患者的治疗做出的贡献;客观地评价了miRNAs在NSCLC中广阔的临床应用前景及现今其科学研究仍旧存在的问题.
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microRNA与肿瘤关系的研究
微小RNA(microRNA,miRNA)作为一类广泛存在的非蛋白编码的小分子RNA,通过转录后水平调节基因的表达而参与调控一系列的生命活动,包括细胞增殖、凋亡、脂肪代谢、神经元发育、激素分泌,并在肿瘤血管生成、干细胞分化、浸润及转移等多种生理和病理过程中发挥重要作用.
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microRNA在膀胱尿路上皮癌中的研究进展
microRNA是一类约18~26个核苷酸构成的单链小分子非蛋白编码RNA,通过和位于mRNA的靶点结合而在基因转录后调节中起着重要作用.目前膀胱肿瘤的发病机制尚未完全阐明,多项研究表明microRNA与膀胱肿瘤的发生发展密切相关.
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应用抑制性消减杂交技术克隆HCV NS3蛋白反式激活基因2的上调基因
目的:应用抑制性消减杂交(SSH)技术构建丙型肝炎病毒(HCV)NS3蛋白反式激活相关基因差异表达的cDNA消减文库,克隆HCV NS3蛋白反式激活相关基因.方法:以HCV NS3表达质粒pcDNA3.1(-)-NS3转染HepG2细胞,以空载体pcDNA3.1(-)为对照;制备转染后的细胞裂解液,从中提取mRNA并合成cDNA,经RsaI酶切后将实验组cDNA分成两组,分别与两种不同的接头衔接,再与对照组cDNA进行两次消减杂交及两次抑制性PCR,将产物与T/A载体连接,构建cDNA消减文库,并转染大肠杆菌进行文库扩增,随机挑选克隆PCR后进行测序及同源性分析.结果:成功构建人HCV NS3蛋白反式激活相关基因差异表达的cDNA消减文库.文库扩增后得到61个白色克隆,进行菌落PCR分析,均得到100-1 000bp插入片段.挑取30个插入片段测序分析,得到30个已知功能基因序列.结论:筛选到的cDNA全长序列,包括一些与细胞生长调节、物质代谢、免疫及细胞凋亡密切相关的蛋白编码因,推测了NS3TP2可能存在的调控机制的线索.
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微小RNA介导的基因沉默与神经退行性疾病
微小RNA(microRNA,miRNA) 是一类内源性的22个核苷酸左右的非蛋白编码单链短序列RNA,介导同源序列依赖的基因沉默.目前,miRNA数据库miRBase(16.0版)已收录了人类miRNA 1048个.miRNA及其靶基因构建了细胞内全方位多层次的基因表达调控网络系统,参与众多生命活动的调节并与人类疾病密切相关.miRNA的功能失常在多种神经退行性疾病的发生发展中均具有重要作用.
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miRNAs和内分泌疾病研究进展
小RNA(miRNAs)是新近发现的、高度保守的、非蛋白编码小RNAs,在转录后水平潜在负性调节基因表达.miRNAs调节细胞的分化、增殖及凋亡,在内分泌代谢性疾病及肿瘤等疾病的发生、发展等许多生物学过程中起重要作用.
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HPV E2蛋白及其在宫颈癌演变中的作用机制
宫颈癌及其癌前病变的发生是多种因素协同作用的结果,高危型人乳头瘤病毒(HPV)感染是宫颈癌演变的始动因素,而HPV与宿主染色体的整合则是推动宫颈癌变进展的重要事件.病毒基因组的整合破坏了E2基因完整性,E2蛋白断裂使宫颈细胞更易于永生化,促进癌变发展.下面就E2基因的功能及病毒基因组整合后癌变发生的机制进行阐述.E2蛋白是一种序列特异性DNA结合蛋白,可调节DNA复制、转录,在HPV感染及感染后病毒生活周期的正常维持中具有关键作用.宫颈癌的演变与高危型别HPV感染不可分割,以HPV16、HPV18两型感染常见.HPV16 E2蛋白编码基因序列位于基因组第2 755~3 852位;HPV18 E2蛋白编码基因序列位于基因组第2 817~3 914位.
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033 与TPA信号序列融合的JEV包膜蛋白编码质粒DNA在小鼠脑内病毒攻击模型中的保护效力研究
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猪囊尾蚴蛋白水解酶的初步研究
猪带绦虫病是人畜共患病.迄今国内外对囊虫病的研究主要报道特异性的诊断方法[1,2]和诊断抗原[3,4]Manoutcharian等[5]克隆了肥头绦虫囊尾蚴囊液蛋白编码56、74和78 kDa的保护性抗原基因.孙树汉等[6]以囊虫病患者血清和病猪血清为探针筛选猪囊尾蚴cDNA文库,克隆了用于诊断的人特异性抗原、猪特异性抗原及人、猪共同抗原.关于猪囊尾蚴蛋白水解酶,目前尚未见研究报道.本文从猪囊尾蚴体内提取蛋白酶,研究其对各种底物的分解活性及酶抑制剂和二价阳离子对酶活性的影响.
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miR-155和miR-146a在2型糖尿病患者中的表达及临床意义
糖尿病是临床常见的代谢性疾病,在我国发病率为9.7%,其中2型糖尿病>90%,病因及发病机制目前仍不完全清楚[1]。microRNA(miRNA)是近年来发现的能够在转录后水平调节基因表达的一类非蛋白编码小RNA 分子。miRNA的主要功能是调节与个体生长、发育、疾病发生过程有关的基因的表达,在包括糖尿病在内的多种疾病的发生和发展中发挥着重要作用[2,3]。本文检测2型糖尿病患者外周血单个核细胞miR-155和miR-146a的表达水平,同时探讨其临床意义。现报道如下。
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miRNA 与泌尿系恶性肿瘤的研究进展
微小核糖核酸(microRNA,miRNA)是一段高度保守非蛋白编码的单链小分子 RNA,在真核生物中广泛存在,可调控基因的表达。miRNA 通过与目的 mRNA 的3曚端非编码区(3'-UTR)互补配对,致使 mRNA 降解或抑制其翻译,在转录后水平对基因表达进行调控[1]。正常情况下,miRNA参与机体基本生命活动的调控,但当 miRNA 发生突变或表达水平明显改变时,机体也会随之发生异常。人们通过大量研究,对 miRNA 认识逐渐深入,发现它在肿瘤发生、肿瘤相关信号转导、肿瘤血管生成、肿瘤转移过程中均发挥重要作用。Catto 等[2]曾回顾总结了40余种 miRNA 在泌尿系肿瘤中的作用。本文主要就近年来相关研究的新进展综述如下。
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哺乳动物长非编码RNA的生物学功能研究新进展
哺乳动物以及其他生物体的基因组产生成千上万没有明显蛋白编码能力的长转录物,即长(或大型)非编码RNA(lncRNAs),在基因表达的调控、剂量补偿、基因组印记、核组装与分割以及核细胞质转运等许多生物学过程中发挥重要的作用[1-2]。尽管lncRNAs与疾病的症状或因果关系还不清楚,但在各种人类疾病和机体紊乱中许多lncRNAs异常调节[3]。因此,哺乳动物中功能性 lncRNAs 被转录的数目、lncRNAs的生物学功能与作用机制以及lncRNAs在人类疾病中的潜在作用都是急待解决的问题[4]。
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从中医角度探讨微小RNA调控造血机制
微小RNA(microRNA,miRNA)的研究已成为当前生物学、医学领域的一大热点。自从Lee等[1]首次发现miRNA后,各国学者不断对其深入研究,发现miRNA在发育调控、细胞增殖和死亡、造血过程以及肿瘤的发生等方面发挥着重要作用。
1生物特性
miRNA是一种大小约19-25个碱基的单链非编码小分子RNA,通过其"种子序列"与靶mRNA 3'端非翻译区(UTR)的序列完全互补或不完全互补结合,导致靶mRNA降解或翻译抑制,从而在转录后水平负调控靶基因的表达。研究表明miRNA调控了体内超过1/3的蛋白编码序列表达,几乎参与了所有的生物学过程。由于miRNA属于非编码因子,非编码RNA自身不能编码蛋白质,但它可调控下游靶基因mRNA的表达,进而影响蛋白的表达情况。