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A型流感病毒M2蛋白疫苗的研究进展
目前用于免疫人群的流感疫苗多为三价灭活疫苗,包含A型流感病毒H1N1亚型、H3N2亚型和B型流感病毒.多年来的实践表明,三价灭活疫苗是有一定保护效果的.但是,由于流感病毒血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)经常发生抗原转变和抗原漂移,使其抗原性表现出很大的变异,所以根据流感疫情监测预测的疫苗株也很难产生理想的保护效果.但流感病毒基质蛋白M2的膜外区氨基酸序列高度保守,有可能发展成为具有交叉保护能力的流感疫苗的候选抗原.该文就A型流感病毒基质蛋白M2疫苗的研究作一综述.
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可溶性TNF受体在大肠杆菌中表达
TNF受体(TNFR)通过介导TNF的信息而在炎症、肿瘤坏死、细胞增殖、分化及凋亡中发挥着重要作用.TNFR信号传导机理及其在诱导细胞凋亡和激活核因子 NF-KappaB之间的平衡是目前研究的热点.为了探索TNFR在炎症及肿瘤细胞中的作用,我们克隆并表达了TNFR膜外区蛋白(sTNFR).
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日本血吸虫29000膜外蛋白的表达和纯化及功能初步鉴定
随着血吸虫病防治工作的不断深入及血防形势的改变,血吸虫病流行的特点对本病的诊断提出了更高的要求.因表膜蛋白更易接触机体的免疫系统,刺激机体产生相对应的抗体,大多研究都支持虫体的表膜蛋白较其他蛋白有较好的诊断价值.本课题组将日本血吸虫(Schistosoma japouicam,Sj)中国大陆株29 000表膜蛋白的膜外区基因体外重组并表达,纯化后初步鉴定其免疫原性和免疫反应性,希望可用于日本血吸虫病的免疫诊断和疗效考核.
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人ICAM-1膜外Ⅰ-Ⅲ功能区基因在原核系统中表达,人血清sICAM-1 RIA建立和临床应用
人细胞间粘附分子-1(intracellular adhesion molecule-1,ICAM-1)是一种细胞表面单链跨膜糖蛋白,参与抗原识别、补体结合、细胞粘附功能.其膜外区脱落入血称为可溶性细胞间粘附分子-1(sICAM-1),在甲状腺滤泡上皮细胞的异常表达与Graves' disease(GD)的发病相关,其血清水平对判断GD的疗效、停药和复发具有重要意义,目前国内尚无重组sICAM-1和sICAM-1 RIA建立的报道,国外仅有sICAM-1酶免试剂盒,但价格较高,不易推广.
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大鼠钠泵α2亚单位M1~M2膜外区多肽体外活性鉴定
本文旨在研究含大鼠钠泵α2亚单位M1~M2膜外区的多肽片段(peptide contmning rat sodium pump α2 subunit M1-M21extramembrane fragment,RES2衍生物)是否具有与内源性钠泵抑制因子结合以及改善钠泵α亚单位活性的作用.采用Fmoc固相合成法合成多肽(Leu-Ala-Ala-Met-Glu-Asp-Glu-Pro-Ser-Asn-Asp-Asn-Gly-Gly-Gly-Ser),产物经高效液相色谱技术纯化,并进行质谱分析.采用放射性配体.受体结合法检测其与哇巴因的结合能力,进而采用人红细胞86Rb摄取实验检测其生物学活性.结果显示,RES2衍生物与3H-哇巴因具有一定的结合能力,其平衡解离常数(Kd)为38.46 nmol/L,IC50为6.353nmol/L.RES2衍生物可以阻断哇巴因对红细胞膜Na+,K+-ATPase的抑制作用,使红细胞86Rb摄取率从38.53%上升到83.69%左右,并呈一定的剂量依赖关系.因此,RES2衍生物不仅具有体外结合活性,而且具有改善钠泵活性的生物学效应,为其成为有效的抗高血压药物提供科学依据.
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Graves病患者治疗前后血清甲状腺过氧化物酶抗体的变化
本研究以自制人甲状腺过氧化物酶(human thyroid perox-idase,hTPO)膜外区抗原决定簇热点区基因表达产物,经纯化的融合蛋白谷胱苷肽转移酶(glutathione S transferase,GST)-hTPO为抗原包被96孔板建立的检测hTPO抗体(hTPO anti-body,hTPOAb)的酶联免疫吸附测定法,对健康人及Graves病(Graves disease,GD)患者治疗不同时期进行临床检测,以了解TPOAb在GD治疗过程中的意义,现报道如下.
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Fas系统、细胞凋亡与移植免疫
Fas系统介导的细胞凋亡在移植免疫中起着十分重要的作用,它参与淋巴细胞的发育、自我耐受的形成、T淋巴细胞克隆的限制、免疫应答的实现等诸多免疫过程。本文就Fas系统与T淋巴细胞凋亡、移植排斥和移植耐受的研究进展予以综述。 一、Fas、FasL的结构和分布 在第五届人白细胞分型国际会议上Fas被正式命名为CD95。Fas抗原的天然配体FasL则是Suda于1993年从大鼠细胞毒性T淋巴细胞(CTL)中纯化确定的[1]。 Fas属于肿瘤坏死因子受体(TNFR) 和神经生长因子受体(NGFR) 超家族,其分子结构由三部分组成:膜外的N末端区、跨膜区和膜内的C末端区。膜外区相对保守,具有膜受体特性,膜内区有一段67~70个氨基酸序列与TNFR膜内区高度同源,具有凋亡信号传导作用,称为死亡域。
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人Na+、K+-ATPaseα1亚单位M1~M2膜外区片段结合活性的研究
目的 研究包含人Na+、K+-ATPaseα1亚单位M1~M2膜外区的多肽片断(HES1衍生物),是否具有与哇巴因结合的能力.方法 采用Fmoc固相合成法进行多肽合成,产物经HPLC纯化,并进行质谱分析.然后采用放射性配体受体结合法检测其与哇巴因的结合能力.结果 人Na+、K+-ATPase HES1衍生物与3H-哇巴因具有一定的结合能力.3H-ouabain与Na+,K+.ATPase HES1衍生物结合的平衡解离常数为24.58 nmol·L-1,受体密度为492.43 fmol·mg-1蛋白.IC50=3.078×10-7mol·L-1.结论 人Na+、K+-ATPase HES1衍生物具有与哇巴因结合的活性,为其作为一种新型药物奠定实验基础.
关键词: Na+ K+-ATPaseα1亚单位 膜外区 哇巴因 -
表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂抗肿瘤治疗的临床进展
表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)是一种糖蛋白受体,是原癌基因c-erbB-1 (HER-1)的表达产物,定位于细胞膜上,所编码的蛋白质属于Ⅰ型跨膜酪氨酸激酶生长因子受体.除血管外,它广泛分布于哺乳动物的上皮细胞膜上,包括膜外区、跨膜区、膜内区3个部分.
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β细胞素与2型糖尿病相关性研究
1 β细胞素的分子生物学特征β细胞素(Betacellulin,BTC)属于表皮生长因子家族,1993年首先由Shing[1]克隆成功.β细胞素的基因位于人类染色体的4q13±q21,DNA序列包括6个外显子和5个内含子,mRNA序列有1271个碱基组成.Sasada等[2]发现前体BTC是由178个氨基酸组成的,它包括许多区域如信号肽、短的前多肽;成熟BTC是由80个氨基酸组成的糖蛋白,分子量为32kD,主要包括表皮生长因子(EGF)的共有序列、膜外区、疏水跨膜区、胞浆区;BTCe,即BTC的EGF样结构,是β细胞素消化后的EGF样结构,是成熟BTC的后50个氨基酸,其促增殖作用与全长BTC无明显差异.整个BTCe结构被3个二硫键、1个疏水核和23个氢键来稳定.