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2011-2014年河北省急性弛缓性麻痹病例中脊髓灰质炎病毒同源性分析
目的 检测2011-2014年河北省急性弛缓性麻痹(AFP)病例粪便标本中的脊髓灰质炎(脊灰)病毒,并对其VP1基因核苷酸序列进行同源性分析.方法 收集2011-2014年河北省AFP监测系统中登记的15岁以下出现AFP症状的1 504例病例的粪便标本,每份5 g,共3 001份(1 497例采集双份标本,7例采集单份标本).采用Real-time PCR对分离到的脊灰病毒进行核酸提取及RNA检测,采用逆转录PCR扩增脊灰病毒VP1基因片段,并对扩增产物进行核苷酸序列测定,以构建系统进化树,与Sabin疫苗株进行同源性比较.采用x2检验比较不同年份脊灰病毒阳性率的差异.结果 3 001份粪便标本共分离到脊灰病毒50株,阳性率为1.7％,其中Ⅰ型10株,Ⅱ型15株,Ⅲ型16株,混合型9株;2011-2014年脊灰病毒阳性率分别为1.0％ (9/890)、1.4％ (12/824)、2.2％ (17/770)和2.3％(12/517)(x2=2.24,P=o.525).VP1基因核苷酸和氨基酸序列同源性分析显示,脊灰病毒Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型株核苷酸序列与Sabin疫苗株的同源性分别为98.8％ ～ 100％、99.1％～ 100％和99.2％～ 100％,氨基酸序列同源性分别为98.6％～100％、98.3％ ～ 100％和98.6％～ 100％.VP1基因进化分析显示,脊灰病毒Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型株的变异率分别为0.66％、0.66％和0.55％.结论 2011-2014年河北省检测出的脊灰病毒除1份为Ⅱ型疫苗衍生脊灰病毒外,其余均为脊灰疫苗类似株,均与Sabin疫苗株具有较高的同源性.
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宁夏首例免疫缺陷疫苗衍生脊髓灰质炎病毒感染者连续性监测分析
2011年2月,笔者从宁夏中宁县急性弛缓性麻痹(AFP)监测系统报告的1例AFP患者标本中分离到1株脊髓灰质炎(简称脊灰)Ⅲ型疫苗衍生脊灰病毒(VDPV),并对该患者进行了病原学的连续性监测,现将结果报告如下.
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青海省1994～1999年急性弛缓性麻痹病例流行病学分析
1994～1999年共报告脊髓灰质炎急性弛缓性麻痹病例113例，其中年龄小的5个月，大的13岁，年龄不详者2例。4岁以下儿童 92例，占病例总数的82.9%；5～9岁12例，占病例数的10.8%；10～14岁7例，占病例数的6.3%。男性65例，女性48例，男女之比为1∶0.74。病例分布在全省30个县（区），占全省总县（区）数的63.83%。大通县14例，乐都县14例，平安县9例，互助县8例，湟中县7例，循化县6例。以地（市）为单位，病例相对集中在西宁市（26.55%）及海东地区（46.02%）。 1994～1999年报告病例数分别为4、21、21、22、22、23例，共113例，报告发病率(1/10万)分别为0.27、1.38、1.33、1.33、1.31、1.35，总报告发病率为1.17/10万。 除1994年外，1995～1999年共采集粪便标本109份，合格粪便采集率为74.3%。共分离出19株病毒，阳性率为17.43%，其中脊髓灰质炎病毒6株，13株为其他肠道病毒。经国家实验室复核鉴定Ⅱ型、Ⅲ型为疫苗相关株，Ⅰ型为非本土野毒株。 我省虽然经过了4次强化免疫和常年的基础免疫，在这113例急性弛缓性麻痹病例中仍有14例从未进行过脊髓灰质炎疫苗的免疫。尽管我省在急性弛缓性麻痹病例监测系统的敏感性、及时性和完整性方面取得了一定的成绩，但在后的证实阶段出现了1名脊髓灰质炎野毒株（非本土）病例。这告诫我们，我省的计划免疫工作，在全面提高并维持高质量监测的同时，必须以高危地区为重点，进一步加大工作力度。
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云南省德宏州1995～2000年急性弛缓性麻痹病例监测及流行病学分析
为了消灭脊髓灰质炎(脊灰),1993～2000年进行了7次全国统一的强化口服疫苗(服苗)工作.本州服苗累计79.78万人次,用州统计局的人口数推算和CMR法测算,每年4岁以下儿童服苗率平均达到94.98%,流动儿童服苗50 966人次,缅甸儿童服苗3 395人次.现将我州1995～2000年急性弛缓性麻痹(AFP)病例流行病学情况分析如下.
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一例与口服脊髓灰质炎疫苗相关的病例报告分析
2005年7月成宁市某县报告1例"高危急性弛缓性麻痹(AFP)病例",此病例经湖北省疾病预防控制中心(CDC)和国家脊髓灰质炎实验室检测证实,为Ⅱ型疫苗相关株引起.
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手足口病防治建议
手足口病(Hand-foot-mouth disease,HFMD)是由多种肠道病毒引起的常见传染病,以婴幼儿发病为主.大多数患者症状轻微,以发热和手、足、口腔等部位的皮疹或疱疹为主要特征.少数患者可并发无菌性脑膜炎、脑炎、急性弛缓性麻痹、呼吸道感染和心肌炎等,个别重症患儿病情进展快,易发生死亡.少年儿童和成人感染后多不发病,但能够传播病毒.引起手足口病的肠道病毒包括肠道病毒71型(EV71)和A组柯萨奇病毒(CoxA)、埃可病毒(Echo)的某些血清型.EV71感染引起重症病例的比例较大.肠道病毒传染性强,易引起暴发或流行.
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许昌市2010年急性弛缓性麻痹病例监测系统运转状况评价
目的:了解许昌市急性弛缓性麻痹病例(AFP)监测系统运转状况,提高监测系统敏感性和监测质量,继续保持无脊髓灰质炎状态.方法:对AFP病例进行流行病学分析.结果:许昌市2010年共报告AFP病例30例,15岁以下儿童非脊灰AFP病例报告发病率为3.95/10万,麻痹后14天内报告率为73.33％,14天内双份合格大便标本采集率66.67％,其它监测指标均达到国家要求.结论:需进一步加强AFP监测技术培训,提高AFP病例首诊病例识别与报告率,粪便样本采集率和常规免疫接种率,确保我市AFP病例监测系统敏感性和监测质量得到有效提高.
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274例手足口病的护理体会
手足口病是由多种肠道病毒主要由柯萨奇A16和肠道病毒71型引起的常见传染病,本病好发于夏秋季节,常在婴幼儿造成暴发流行,3岁以下婴幼儿发病率高.临床表现以出疹、发热为特征,斑丘疹常发生于口腔黏膜及手足远段部位,少数患儿会出现恶心、呕吐、腹痛、腹泻,个别患者可并发无菌性脑膜炎、脑炎、急性弛缓性麻痹、呼吸道感染和心肌炎等.个别重症患儿病情进展快、易发生死亡.
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人类肠道病毒B组73、75和97型山东地方株的鉴定及其基因特征分析
本研究对3例急性弛缓性麻痹患者标本的阳性病毒分离物进行了分子生物学定型.按照文献报道的方法,用扩增人类肠道病毒(Human Enterovirus,HEV)VP1完整编码区通用引物008-013、011-012进行逆转录-聚合酶链反应,反应产物纯化后进行序列测定.所得序列通过BLAST程序进行基因定型,显示3株病毒分别为HEV B组中新型病毒HEV73、HEV75和HEV97.将获得的序列与GenBank数据库中已有的各型病毒株VP1基因序列进行同源性分析并构建系统发生树,结果显示与各自的原型株相比有较大的变异,提示本次发现的HEV B组73、75、97型山东地方株与各型原型株相比具有不同的基因特征,这是在国内首次发现HEV97.
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2011～2012年河北省急性弛缓性麻痹病例中非脊髓灰质炎肠道病毒血清型的分布
为了解2011～2012年河北省急性弛缓性麻痹(Acute flaccid paralysis,AFP)病例中非脊髓灰质炎肠道病毒(Non-polio enterovirus,NPEV)的血清型分布,探讨这些病毒与AFP的关系,本研究按照世界卫生组织要求,对河北省AFP病例粪便标本利用人横纹肌肉瘤(Human rhabdomyosarcoma,RD)细胞和转入脊髓灰质炎病毒受体的小鼠肺(Mouse cell line expressing the gene for the human cellular receptor for poliovirus,L20B)细胞进行病毒分离.筛检出NPEV毒株后,进行VP1区核苷酸序列测定,使用分子定型方法对NPEV进行血清型别鉴定.结果显示,在2011～2012年AFP病例中分离到的82株NPEV中共鉴定出A组人肠道病毒(HEV-A)42株(55.3％),包含4个血清型;B组人肠道病毒(HEV-B) 34株(44.7％),包含13个血清型别,未鉴定出C组和D组人肠道病毒.另外还有2株腺病毒,4株未定型NPEV.HEV-A组中又以肠道病毒71型(EV-A71)为主要型别,在HEV-A中比例高达85.7％.2011～2012年河北省AFP病例中分离到的NPEV以HEV-A居多,尤其是EV-A71,为AFP病例中的优势毒株.
关键词： 河北省 急性弛缓性麻痹 非脊髓灰质炎肠道病毒 血清型 -
人类肠道病毒74、80和87型山东地方株的鉴定及基因特征分析
随着基于VP1序列分析的分子定型方法的推广应用,许多新型人类肠道病毒(Human enterovirus,HEV)陆续被发现.本研究通过对1989～2010年山东省急性弛缓性麻痹(Acute flaccid paralysis,AFP)监测系统分离到的非脊髓灰质炎肠道病毒进行VP1完整编码区的序列扩增及分子定型,共发现1株EV74,3株EV80和1株EV87.同源性分析显示EV74、EV80和EV87山东分离株与原型株的核苷酸同源性分别为81.4％,76.4％～81.7％以及80.3％.系统发生学分析显示山东地方株与国内外其他分离株的亲缘关系均较远.这是在中国大陆地区首次发现EV74和EV87,其中EV87山东分离株为全球第2个鉴定出的分离株.这3种新型HEV在AFP监测系统中的分离率较低,提示尚未在我国导致大规模流行.
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柯萨奇病毒A组2、6、8、12型山东地方株型别鉴定及其基因特征分析
在前期研究中,对山东省1989～2011年急性弛缓性麻痹(Acute flaccid paralysis,AFP)和手足口病(Hand,foot and mouth disease,HFMD)患者标本中分离到的部分人类肠道病毒(Human enteroviruses,HEVs)进行分子定型,发现了8个HEV-A血清型.为进一步探究HEV-A组病毒在山东省的基因型分布及分子进化特征,本研究继续对剩余分离株进行核酸提取,以HEV-A组特异性引物对VP1完整编码区进行序列扩增、测序和分子定型,又鉴定出4个血清型,分别为柯萨奇病毒A组(Coxsackievirus A,CVA)2、6、8、12型,共7株病毒.同源性分析显示,7株HEV-A山东分离株与其原型株核苷酸同源性介于80.8％～85.0％之间.系统进化树表明,CVA8、12型山东分离株与国内分离株存在一定亲缘关系,而CVA2、6型山东株同国内外分离株亲缘关系均较远,并且CVA2、6型在山东省内可能存在多个传播链.本研究将我省HEV-A组的血清型别增加至12个,进一步丰富了HEV-A山东地方株的遗传进化特征,并且发现CVA2、6、8、12血清型在山东省甚至全国范围内存在不同基因特征的传播链的共循环.
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人类肠道病毒74型山东地方株的全基因组序列分析
人类肠道病毒(H EV) 74型是人类肠道病毒B组(HEV-B)的新成员.为了解其进化和重组特性,本研究对2005年山东省急性弛缓性麻痹(Acute flaccid paralysis,AFP)监测系统分离到的人类肠道病毒74型山东地方株05293/SD/CHN/2005进行了全基因组序列测定和分析.与GenBank中的另2株HEV74全基因组序列比对,发现在5'NTR和3’NTR区有核苷酸缺失和插入；核苷酸序列的同源性分别为80.8％和80.6％,氨基酸同源性为96％和95.9％.山东株与原型株USA/CA75-10213间P1、P2和P3区核苷酸同源性分别为81.5％、80.0％和79.7％,氨基酸同源性分别为95.9％、96.0％和96.2％；山东株与西藏株Rikaze-136间P1、P2和P3区核苷酸同源性分别为81.9％、78.8％和79.5％,氨基酸同源性分别为95.9％、96.1％和95.7％.通过系统发生树和同源重组分析,发现该病毒可能与其他HEV-B组肠道病毒间发生重组.
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肠道病毒A组山东地方株的基因型分布
为研究肠道病毒A组山东地方株的基因型及分子进化特征,本研究采集1998～2008年急性弛缓性麻痹(AFP)患者及2008年和2009年手足口病(HFMD)患者粪便标本,进行肠道病毒分离.来自HFMD病例的阳性病毒分离物进行肠道病毒71型(EV71)和柯萨奇病毒A16型(CVA16)特异性逆转录-聚合酶链反应鉴定,随即选取部分阳性分离株进行VP1完整编码区核苷酸序列测定和分析.EV71和CVA16特异性引物阴性者以及来自AFP病例的阳性病毒分离物采用A组肠道病毒特异性引物进行VP1完整编码区核苷酸序列测定.所获得序列与其他A组各基因型代表株进行比较并构建系统发生树.共获得293株肠道病毒A组山东地方株,分别属于CVA4、CVA5、CVA10、CVA14、CVA16、EV71、EV76、EV90共8个基因型.各基因型内山东地方分离株跟原型株相比基因序列同源性较低,系统发生学分析显示肠道病毒A组山东地方株各血清型中与原型株亲缘关系较远,提示山东省存在不同基因特征的A组肠道病毒传播.
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2015-2016年河北省急性弛缓性麻痹病例病原学检测分析
目的 分析2015-2016年河北省急性弛缓性麻痹(AFP)病例的脊髓灰质炎(脊灰)病毒检测状况,为河北省继续维持无脊灰状态提供依据.方法 收集2015-2016年河北省AFP病例粪便标本进行病毒分离和鉴定,对脊灰病毒分离株采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增VP1区基因片段,进行核苷酸序列测定和分析.结果 从665份AFP病例粪便标本中分离到脊灰病毒12株(1.80％)、非脊灰肠道病毒(NPEV) 112株(16.84％).与Sabin株相比,脊灰病毒VP1区核苷酸发生0个变异3株、1个变异6株、2个变异4株、3个变异2株、4个变异1株;在NPEV分离株中,7-8月份分离株数占47.2％.结论 2015-2016年河北省脊灰病毒分离株均为疫苗相关株,病毒核苷酸变异以低变异为主.
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河北省1997～2002年急性弛缓性麻痹病例非脊髓灰质炎肠道病毒监测分析
河北省1997～2002年急性弛缓性麻痹(AFP)病例病毒学监测中,共有202例分离到非脊髓灰质炎肠道病毒(NPEV),年均NPEV分离率10.1%.对分离到的NPEV毒株进行了型别鉴定,在明确定型的103株NPEV中,包括柯萨奇病毒(Coxsackievirus,Cox.)A组1个型;Cox.B组5个型;埃可病毒(ECHO)14个型.RD细胞对ECHO和Cox.A9敏感,HEp-2细胞对Cox.B敏感.取消HEp-2细胞的使用,会造成多数Cox.B和一些未能定型的NPEV漏检,使NPEV分离率明显降低.NPEV感染有明显的夏秋季高峰,主要集中在小年龄组儿童,以1岁和2岁为多.
关键词： 急性弛缓性麻痹 非脊髓灰质炎肠道病毒 监测 -
贵州省1992～1999年急性弛缓性麻痹病例实验室监测分析与评价
贵州省1992～1999年共报告急性弛缓性麻痹(AFP)病例1148例,采集AFP病例粪便标本975例,分离出肠道病毒287株,其中脊髓灰质炎(脊灰)病毒(PV)128株,非脊灰肠道病毒(NPEV)159株.113株PV经中国预防医学科学院国家脊灰实验室鉴定,有8株Ⅰ型野毒株,5株疫苗变异株,100株疫苗相关株.1993年以前病毒分离以PVⅠ型野毒株为主,1994年以后已连续6年未分离到PV野毒株.省卫生防疫站脊灰实验室监测工作水平显著提高,至1997年各项相关技术指标中除合格粪便标本采集率外,其余均达到了世界卫生组织(WHO)和卫生部的质量控制要求,1997年、1999年通过WHO的认证.但监测任务依然严峻和繁重,仍需作出不懈努力.
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中国2001年急性弛缓性麻痹病例监测系统现状评析
2001年中国急性弛缓性麻痹(AFP)病例监测系统报告AFP病例5*!395例,根据病毒学诊断标准,5*!376例为非脊髓灰质炎(脊灰)AFP病例,19例为临床符合脊灰病例,未发现本土或输入脊灰野病毒病例.5*!395例AFP病例覆盖31个省、自治区、直辖市的2*!070个县(市、区、旗,下同),占全国县数的72.3%(2*!070/2*!863).全年含"零"病例报告的县每月均＞90%.2001年全国<15岁儿童非脊灰AFP病例报告发病率为1.88/10万,合格粪便标本采集率为89%,各项监测系统评价指标均达到世界卫生组织和卫生部要求.更高质量的AFP病例监测系统将在今后维持无脊灰中发挥重要作用.
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河北省急性弛缓性麻痹病例肠道病毒监测分析
河北省1997～1999年急性弛缓性麻痹(AFP)病例肠道病毒监测结果显示,分离到的47株脊髓灰质炎(脊灰)病毒,经型内特征鉴定均为疫苗病毒;分离到非脊灰肠道病毒(NPEV)80株,占AFP病例病毒分离数的63%.在明确型别的毒株中,有柯萨奇病毒(Coxsackie, Cox.)A组1个型别;Cox.B组的5个型,以Cox.B1常见;有埃柯病毒(Enteric cytopathic human orphan virus, ECHO)的10个型别,ECHO15型在3年中都有分离.NPEV有明显的夏秋季高峰,主要发生在小年龄组人群,5岁以下儿童的感染占77.5%,2岁以内的占56.3%.
关键词： 急性弛缓性麻痹 脊髓灰质炎病毒 非脊髓灰质炎肠道病毒 -
湖北省1999年急性弛缓性麻痹病例实验室监测分析
湖北省1999年共收检急性弛缓性麻痹(AFP)病例粪便标本208例;脊髓灰质炎(脊灰)病毒(PV)检出率为6.25%,较往年显著上升;非脊灰肠道病毒(NPEV)检出率3.37%,较往年显著下降;肠道病毒(EV)总检出率显著下降.分析原因认为,PV检出率的上升可能与麻痹后突击服疫苗再采集粪便标本,以及环境接触染毒等因素有关.以L20B细胞置换Hep-2是EV总阳性率显著下降的主要原因,也是NPEV检出率下降的重要原因.NPEV检出率下降还可能与多种因素,如细胞形态、毒性反应及粪便标本的贮运温度等有关.
关键词： 急性弛缓性麻痹 脊髓灰质炎病毒 非脊髓灰质炎肠道病毒 检出率
