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大鼠胚胎脑膜组织细胞分离培养及其生物学特性观察

买霞;陈莉;徐瑞成;扎拉嘎胡

摘要: [目的]分离和培养大鼠胚胎脑膜组织细胞,并观察其生物学特性.[方法]在无菌条件下取妊娠14.5~16.5 d大鼠的胚胎脑膜组织,培养传代,在倒置光显微镜和电镜下对细胞形态变化进行动态观察;流式细胞仪检测细胞周期变化;用四唑盐(MTT)法测定细胞生长活力.在细胞传至第4代时加入10 μmol/L 5-aza,并观察其对细胞增殖和行为的影响;免疫细胞化学方法检测Desmin、GFAP的表达.[结果]在透射电镜下观察对照组多数细胞为未分化细胞,而实验组可见有成纤维样细胞和胶质样细胞的形态变化;流式细胞仪分析经5-aza诱导3 d后,处于增殖状态的S期细胞比率为8.1%,较对照组9.7%为低;经MTT法检测表明5-aza明显抑制胚胎脑膜组织细胞的增殖.免疫细胞化学检测结果表明,胚胎脑膜组织细胞经5-aza诱导8 d Desmin和GFAP的表达均较对照组显著增高,阳性率分别达51.2%和52.3%.[结论]5-aza对胚胎脑膜组织细胞生长有明显抑制作用,并诱导其分化成纤维样细胞和胶质样细胞.

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