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一氧化氮抑制剂对金黄地鼠体外囊胚培养中囊胚孵出的影响
目的 观察一氧化氮合酶抑制剂(L-NAME)对金黄地鼠的囊胚孵出的影响. 方法 将金黄地鼠受精卵分为两组,对照组将受精卵置入M199培养液中,实验组在M199培养液中添加L-NAME,培养96 h后比较对照组和实验组囊胚的孵化率及囊胚总细胞数、NO产生量、组织蛋白酶cathepsin L和cathepsin P mRNA的表达量. 结果 与对照组相比,实验组中囊胚孵化率[(23.5±4.7％) vs.(78.2±2.6％)]、NO的产生量[(4.5±0.5)μmol/L vs.(7.2±0.7) μmol/L]以及囊胚的总细胞数[(31.0±4.1) vs.(47±3.5)]均显著降低(P＜0.05).实验组中cathepsin L[(0.25±0.07) vs.(0.70±0.08)]和cathepsin P mRNA[(0.35±0.05) vs.(0.86±0.12)]的表达量明显低于对照组(P＜0.05). 结论 L-NAME抑制NO的产生,降低cathepsin L和cathepsin P mRNA的表达水平,终导致囊胚孵化率的降低.
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哺乳动物囊胚孵化调控机制的研究进展
哺乳动物囊胚在植入前，需从透明带中孵化出来才具有侵入子宫内膜的能力。囊胚孵化失败将引起女性不孕。囊胚孵化是一个受多因素精确调控的复杂过程，目前已发现的参与囊胚孵化的调控分子和信号通路，包括蛋白酶、环氧合酶-2、p38丝裂原活化蛋白激酶、激活素A和Wnt信号通路等。该文综述了有关因素对囊胚孵化的调控机制以及目前常用的囊胚辅助孵化的方法，为进一步阐明囊胚的孵化机制，为临床上对由于囊胚孵化失败引起女性不孕的治疗提供理论基础。
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一氧化氮在小鼠囊胚发育和孵化中的调控作用
目的 研究一氧化氮(N0)在小鼠囊胚发育和孵化中的调控作用和机制.方法 从妊娠第2.5天雌鼠子宫角获取桑葚胚进行体外培养48 h.胚胎培养液中分别添加不同浓度N-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)或硝普钠(SNP),以及L-NAME与SNP联合添加.分别于第4天和第5天统计囊胚发育率和孵化率,激光扫描共聚焦显微镜观察统计囊胚总细胞数和活化型含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(caspase 3)表达.结果 随着L-NAME和SNP浓度增加,囊胚发育率、孵化率和囊胚总细胞数显著降低.在5 mmol/L L-NAME培养液中添加10 nmol/L SNP可显著提高囊胚发育率和孵化率;但随着SNP浓度增加,囊胚发育率和孵化率显著降低.L-NAME对囊胚细胞中活化型caspase 3表达没有显著影响,而500nmoL/L以上浓度SNP可显著提高囊胚细胞中活化型caspase 3表达,促进囊胚细胞凋亡.结论 NO在小鼠囊胚发育和孵化中可发挥重要的调控作用,囊胚细胞中NO浓度过低或过高都将会影响卵裂球分裂,降低囊胚发育率和孵化率,且过高浓度NO会引起囊胚细胞凋亡.
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由囊胚内细胞团分离人胚胎干细胞
胚胎干(Embryonic stem,ES)细胞是由着床前胚胎内细胞团(Inner cell mass,ICM)或原始生殖细胞(Primordialgerm cells,PGC)经体外分离培养而建立的克隆细胞系.ES细胞的特点是只生长、不分化,并保持早期胚胎发育的多能性.本文比较了人囊胚在G22培养液和含DMEM培养液的鼠STO饲养层上孵化及ICM生长、传代情况.
