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不同融合参数对小鼠圆形精子细胞与卵母细胞融合胚胎发育的影响
目的 利用手工克隆(handmade cloning,HMC)技术对小鼠圆形精子细胞与去透明带卵母细胞进行电融合,以研究电融合参数对融合胚胎发育潜能的影响. 方法 选取549枚卵母细胞与圆形精子细胞融合,根据电融合参数分为三组:A组(n=186)采用电场强度60 V/mm、脉宽30μs、脉冲次数为2次的直流电脉冲;B组(n=188)采用电场强度80 V/mm、脉宽20 μs、脉冲次数为2次的直流电脉冲;C组(n=175)采用电场强度100 V/mm、脉宽10 μs、脉冲次数为2次的直流电脉冲.观察记录不同电融合参数下圆形精子细胞与无透明带卵母细胞的融合率、融合胚胎卵裂率以及囊胚形成率. 结果 (1)A组圆形精子细胞与去透明带卵母细胞的平均融合率为(84.87±3.84)%,与其他两组[(74.93±5.46)%、(73.60±5.48)%]相比平均融合率显著升高(P<0.05);(2)A组融合胚胎的平均卵裂率为(77.37±3.97)%,与B组、C组融合胚胎的卵裂率[(67.74±7.32)%、(66.17±9.87)%]相比显著升高(P<0.05);(3)A组的平均囊胚形成率为(41.28±6.50)%,显著高于C组[(31.03±6.09)%](P<0.05). 结论 A组采用电场强度60 V/mm、脉宽30μs、脉冲次数为2的直流电脉冲是圆形精子细胞与去透明带卵母细胞融合的佳方案,有利于提高胚胎的发育潜能.