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釉基质蛋白在牙髓细胞增殖中的作用
目的 探讨釉基质蛋白对牙髓细胞增殖的作用及其机理.方法 分离培养人的牙髓细胞,加入不同浓度的Emdogain,采用化学发光免疫测定方法 比较牙髓细胞的生长情况,采用Superarray方法 研究加入Emdogain对细胞周期相关因子的影响.结果 牙髓细胞在不同浓度的Emdogain作用下呈现不同的生长速率.Emdogain促进牙髓细胞生长的佳浓度为300μg/ml.细胞周期相关因子的Superarray分析显示,Emdogain通过上调cyclin D1,p21,E6-AP,SUMO-1基因达到对细胞生长的促进作用.结论 适宜浓度的Emdogain(45～600μg/ml)能够促进牙髓细胞的增殖.
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Emdogain在牙周引导再生术中的应用
牙周组织再生技术已成功应用于牙周附着的重建,但是据报道,这种新的附着在强度上及连续性上不同于原有的附着.由Hertwig′s上皮鞘分泌的釉质基质蛋白在根面牙骨质的形成及牙周附着器官的发育中起着重要作用.Emdogain(EMD)是由发育的猪牙齿中提取的釉质基质蛋白,可诱导真正的牙周组织再生.2000-03～2001-03本文用Emdogain治疗牙周病患者15例,取得了良好的效果.
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Emdogain对共培养成骨样细胞及内皮细胞成骨及成血管基因表达的影响
目的:评价emdogain对直接与间接共培养条件下成骨样细胞和内皮细胞成骨及成血管基因表达的影响以及其间的相关性.方法:将人脐静脉内皮细胞(HUVEC)和成骨样细胞(MG63)按2∶1比例于12孔板内进行直接及间接共培养,并使用不同浓度(0、0.1、1、10、50上g/mL)的emdogain共培养细胞72 h.采用细胞计数仪结合流式细胞仪评价细胞增殖情况,并通过荧光激活流式细胞分选技术分选共培养细胞.对分选后的成骨样细胞及内皮细胞采用实时荧光定量PCR分别检测成骨相关基因碱性磷酸酶(ALP)、Ⅰ型胶原蛋白(Col-1)及成血管相关基因血管内皮细胞生长因子(VEGF)、VEGF酪氨酸激酶受体1(Flt-1)、VEGF酪氨酸激酶受体2(KDR)、von Willebrand因子(vWF)、内皮细胞C蛋白受体(EPCR)、E选择素(E-Selectin)、促血管生成素2(Ang-2)的表达水平.采用SPSS24.0软件包对数据进行统计学处理.结果:在直接与间接共培养条件下,Emdogain对MG63及HUVEC细胞增殖的作用具有浓度依赖性.随着emdogain浓度增加,细胞增殖率逐渐下降.50 μg/mL浓度的emdogain对MG63及HUVEC细胞增殖抑制作用为明显.随着emdogain浓度增加,MG63表面ALP和Col-1表达水平逐渐增加;50 μg/mL浓度条件下,表达水平高且与其他组基因表达水平差异显著(P＜0.01).同一emdogain浓度条件下,直接共培养MG63表面ALP及Col-1表达水平均显著高于间接共培养(P＜0.01).除10 μg/mL组外,直接共培养条件下,VEGF表达水平均显著高于间接共培养(P＜0.01).50 μ,g/mL组直接共培养的HUVEC表面Flt-1、KDR、vWF、E-selectin基因表达水平显著高于间接共培养及直接共培养的其他各组(P＜0.01).间接共培养条件下,HUVEC表面EPCR及Ang-2基因表达水平显著高于直接共培养(P＜0.05).结论:Emdogain对共培养MG63和HUVEC增殖的作用具有浓度依赖性,50 μg/mL可能是emdogain作用的关键浓度.在直接共培养条件下,50 μg/mL emdogain抑制MG63及HUVEC细胞增殖,但能同时促进MG63及HUVEC细胞相关基因表达;且该条件下emdogain的作用显著强于其他实验条件,细胞间直接交联可能在其中发挥重要作用.
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釉基质蛋白衍生物治疗牙周组织再生进展的研究
Emdogain的主要成分是釉基质蛋白衍生物(enamel matrix derivative,EMD),是通过乙酸法、纯化层析法从猪恒牙胚提取获得.EMD不仅能促进无细胞性牙骨质再生,还能促进牙周膜细胞的增殖及分化,其用于牙周组织再生治疗已成为近年来牙周病领域研究的热点.文中就EMD促进牙周组织再生方面的研究及其口腔临床应用概况进行综述.
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Emdogain对人牙周膜细胞增殖、分化及合成Ⅰ型胶原能力的影响
目的:观察Emdogain对人牙周膜细胞(HPLC)增殖、分化及合成Ⅰ型胶原能力的影响,进一步探讨Emdogain促进牙周组织再生的机制.方法:体外培养人牙周膜细胞,在培养液中加入不同浓度的Emdogain,然后用MTT法、碱性磷酸酶试剂盒、羟脯氨酸试剂盒检测人牙周膜细胞的增殖、分化及合成Ⅰ型胶原能力.结果:EMD在100、50、25 mg/L各浓度时对HPLC细胞有明显的促增殖作用,且50 mg/L作用强;25、50、100 mg/L浓度可增加HPLC细胞的ALP活性,且以50 mg/L浓度作用效果佳,而200 mg/L浓度组在实验期间不能提高HPLC细胞的ALP的活性;25、50、100、200 mg/L 4个浓度梯度EMD可增强HPLC形成Ⅰ型胶原的能力.结论:Emdogain对人牙周膜细胞的生物学活性有明显的促进作用,提示这可能是Emdogain促进牙周组织再生的重要机制.
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Emdogain和辛伐他汀联合应用对人牙周膜细胞碱性磷酸酶活性的影响
目的 观察Emdogain、辛伐他汀联合应用对人牙周膜细胞碱性磷酸酶活性的影响.方法 取培养至第五代的人牙周膜细胞,分别用含50 μg/mL Emdogain、含0.125 μmol/L辛伐他汀、同时含50 μg/mL Emdogain和0.125 μmol/L辛伐他汀以及不含上述药物的4组无血清DMEM培养液培养,3 d后酶标仪检测各组细胞的碱性磷酸酶活性.结果 仅含Emdogain、仅含辛伐他汀以及不含上述药物的培养液培养的人牙周膜细胞碱性磷酸酶光密度值分别为0.193±0.002、0.197±0.003及0.166±0.002.同时含Emdogain和辛伐他汀的培养液培养的细胞碱性磷酸酶光密度值为0.325±0.002,与其他3组比较差异均有统计学意义(P<0.05).结论 Emdogain和辛伐他汀联合应用对牙周膜细胞碱性磷酸酶活性有促进作用,提示可能有利于牙周组织的再生.
