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长链非编码RNA SPRY4-IT1对髓母细胞瘤增殖及侵袭转移的影响
目的:探讨长链非编码RNA SPRY4-IT1 (LncRNA)对髓母细胞瘤增殖及侵袭转移的影响.方法:髓母细胞瘤Daoy细胞分为对照组和si-SPRY4-IT1组,分别利用脂质体Lipofectamine 2000将阴性对照荧光序列和SPRY4-IT1-siRNA转入细胞中,采用Real-time PCR检测转染后各组细胞中SPRY4-IT1的表达情况,CCK-8实验及平板克隆形成实验检测细胞增殖能力的变化,以细胞体外侵袭、迁移实验分别检测细胞侵袭、迁移能力的变化,Westem blot检测SPRY4-IT1对基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9蛋白的影响.结果:si-SPRY4-IT1组SPRY4-IT1 mRNA表达水平、细胞体外增殖能力、细胞侵袭、迁移能力、细胞MMP-2蛋白表达均较对照组明显降低(P＜0.05),而MMP-9蛋白表达未见明显变化.结论:干扰长链非编码RNA SPRY4-IT1在髓母细胞瘤Daoy细胞中的表达能显著抑制细胞的增殖、侵袭和迁移能力.
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长链非编码RNA SPRY4-IT1在食管鳞癌中的表达及对细胞生长的影响*
目的：探讨长链非编码RNA SPRY4-IT1与食管鳞状细胞癌（ESCC）的临床病理及预后的相关性，以及对细胞生长的影响。方法：收集2008年1月至2009年12月南京医科大学附属南京医院肿瘤外科50例ESCC手术切除标本（包括癌组织和癌旁组织），荧光实时定量PCR（qRT-PCR）检测50例ESCC中SPRY4-IT1的表达情况，分析其与临床病理及预后的关系，用小干扰RNA（siRNA）干扰SPRY4-IT1后MTT法检测其对细胞生长的影响，流式细胞检测对细胞凋亡和周期的影响。结果：45例（90%）标本中SPRY4-IT1呈阳性表达，SPRY4-IT1在癌组织中的表达量显著高于癌旁组织（t=5.377，P<0.01）。SPRY4-IT1的相对表达水平与肿瘤大小、临床分期相关（P均<0.05）。SPRY4-IT1在ESCC细胞株中表达量高于正常食管上皮细胞。KYSE30细胞中干扰SPRY4-IT1的表达后可明显减慢细胞生长，阻滞细胞周期并促进细胞凋亡（P<0.01）。结论：SPRY4-IT1在ESCC组织中显著高表达，并且能促进ESCC细胞生长，可能成为ESCC诊断和判断预后的重要分子标记物。
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沉默长链非编码RNA SPRY4-IT1对宫颈癌细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响
目的 探究长链非编码RNA SPRY4-IT1在宫颈癌中的表达水平及其对宫颈癌细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响.方法 20对宫颈癌组织和癌旁组织取自2016年2月-2017年2月到该院就诊的20例宫颈癌患者,qRT-PCR检测长链非编码RNA SPRY4-IT1在宫颈癌组织和宫颈癌HeLa细胞中的表达水平;通过小RNA干扰技术检测沉默长链非编码RNA SPRY4-IT1,CCK-8实验检测沉默长链非编码RNA SPRY4-IT1对HeLa细胞增殖能力的影响;划痕愈合实验和Transwell迁移侵袭实验检测沉默长链非编码RNA SPRY4-ITI对HeLa细胞迁移及侵袭能力的影响.结果 长链非编码RNA SPRY4-IT1的表达水平在宫颈癌组织和HeLa细胞中显著高于癌旁组织和人永生化表皮细胞HaCaT,差异有统计学意义(t=3.21,P＜0.01;t=4.58,P＜0.001).HeLa细胞转染si-SPRY4-IT1 48 h后,HeLa细胞的增殖能力明显降低,差异有统计学意义(t=2.75,P＜0.01);迁移距离显著减少(t=4.19,P＜0.001);迁移和侵袭能力明显降低,差异有统计学意义(t=3.84,P＜0.001;t=3.96,P＜0.001).结论 长链非编码RNA SPRY4-IT1的表达水平在宫颈癌中显著上调,沉默长链非编码RNA SPRY4-IT1抑制HeLa细胞的增殖、迁移和侵袭能力.
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长链非编码RNA SPRY4-IT1在恶性肿瘤中的研究进展
SPRY4-IT1是转录自SPRY4基因的长度为708个核苷酸的转录产物,许多恶性肿瘤的发生、发展与其密切相关,如黑色素瘤.在这些肿瘤中,SPRY4-IT1表达量大致增高,主要通过染色体甲基化、细胞周期蛋白调控以及脂质蛋白表达途径对于肿瘤细胞增殖、转移、凋亡等过程进行调节,在转移过程中主要通过上皮细胞-间质化途径引导.同时,随着临床研究的进展,其未来有望成为潜在的肿瘤标志物.
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长链非编码 RNA SPRY4－IT1对膀胱癌生长的影响
目的：研究长链非编码 RNA（LncRNA） SPRY4内含子转录本1（SPRY4－IT1）对膀胱癌生长的影响。方法使用qRT－PCR 法检测 SPRY4－IT1标本和细胞表达水平并分析其临床病理特征之间的关联；使用特异性小干扰 RNA （ si－SPRY4－IT1）转染两种膀胱癌细胞，使用 qRT－PCR 法检测 si－SPRY4－IT1效果，再分别以 CCK－8实验、MTT 实验、划痕实验、ELISA 实验和流式细胞术检测 SPRY4－IT1对膀胱癌细胞在增殖、迁移和凋亡等方面的影响。结果SPRY4－IT1在膀胱癌组织中高表达（68．33％，P ＝0．0263）。 SPRY4－IT1表达水平与病理分级（P ＜0．05）和 TMN 分期（P ＜0．001）有关。 SPRY4－IT1在5637（P ＝0．00229）和 T24（P ＝0．00012）细胞中明显高表达。 si－SPRY4－IT1可显著降低 SPRY4－IT1表达（P ＜0．001）； si－SPRY4－IT1可显著抑制两种细胞的增殖、迁移和增加凋亡（P ＜0．01）。结论SPRY4－IT1在膀胱癌标本组织和细胞水平中高表达，有促进膀胱癌细胞生长的作用，在膀胱癌中起着癌基因的作用。
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长链非编码RNA SPRY4-IT1对结直肠癌细胞HT-29增殖凋亡的影响及机制
目的 探讨长链非编码RNA(LncRNA) SPRY4-IT1对结直肠癌细胞HT-29增殖、凋亡的影响及机制.方法 采用qRT-PCR方法检测LncRNA SPRY4-IT1在结直肠癌细胞株(HT-29、HCT-116、SW-480、SW-620、Caco-2)和正常肠上皮细胞(FHC)的表达.选择其相对表达高的HT-29细胞,以慢病毒载体介导构建SPRY4-IT1过表达(上调组)和干扰的(下调组)稳转细胞株,并设立无义转染组和空白对照组;qRT-PCR检测各组HT-29细胞中SPRY4-IT1 mRNA的表达量;CCK-8法检测细胞增殖活力;克隆试验检测细胞的克隆形成率;流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞周期.Western blotting法检测凋亡蛋白Bax、Bcl-2的表达量.结果 LncRNA SPRY4-IT1在结直肠细胞株(HT-29、HCT-116、SW-480、SW-620、Caco-2)相对FHC的表达增高,以HT-29细胞株中的表达高(P均＜0.05).相对于空白对照组、无义转染组,上调组SPRY4-IT1 mRNA表达量升高,HT-29细胞增殖活力增强,克隆形成率升高,凋亡率降低(P＜0.05或＜0.01);而下调组SPRY4-IT1 mRNA表达量下降,细胞增殖活力减弱,克隆形成率降低,凋亡率升高(P＜0.05或＜0.01);在各组细胞间,细胞周期分布比较,P均>0.05.相对于空白对照组、无义转染组,上调组细胞Bcl-2蛋白表达量增多,Bax蛋白表达量减少(P＜0.05或＜0.01);下调组Bcl-2蛋白表达量减少,Bax蛋白表达量增多(P均＜0.01).结论 LncRNA SPRY4-IT1可能通过促进Bcl-2表达,抑制Bax表达而促进结直肠癌细胞增殖、抑制其凋亡.
关键词： 结直肠癌细胞HT-29 长链非编码RNA SPRY4-IT1 细胞增殖 细胞凋亡 -
SPRY4-IT1通过激活锌指蛋白703基因表达增强肺癌细胞增殖能力
目的 观察长链非编码RNA SPRY4-IT1在非小细胞肺癌(NSCLC)患者中的表达及其调控细胞增殖的分子生物学功能.方法 采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测32例NSCLC患者癌组织和远癌正常肺组织中SPRY4-IT1的相对表达量;肺癌A549细胞株内转染针对SPRY4-IT1序列的小干扰RNA(si-SPRY4-IT1)和无关序列(si-nc),采用细胞计数试剂盒(CCK-8)实验计数两组细胞增殖情况并绘制生长曲线;采用结晶紫染色实验观察细胞克隆形成情况.采用Western blot检测转染si-SPRY4-IT1后A549细胞中锌指蛋白703(ZNF703)蛋白表达.结果 SPRY4-IT1在NSCLC患者癌组织和癌旁组织中的相对表达量分别为3.24 ±2.01和1.12±0.78,癌组织中的相对表达量显著高于癌旁组织(t=5.560,P=0.001);非小细胞肺癌细胞株A549转染si-SPRY4-IT1后,细胞中SPRY4-IT1表达水平显著降低(P=0.001);CCK-8实验显示,转染si-SPRY4-IT1的A549细胞增殖能力显著降低(P=0.001);结晶紫染色显示,转染si-SPRY4-IT1的A549细胞克隆形成能力显著降低(P=0.001);转染si-SPRY4-IT1和si-nc的A549肺癌细胞中ZNF703 mRNA相对表达量分别为0.61 ±0.07和0.96±0.08,si-SPRY4-IT1细胞显著低于si-nc细胞(P=0.001);ZNF703蛋白相对表达量分别为0.08 ±0.02和0.12 ±0.03,si-SPRY4-IT1细胞显著低于si-nc细胞(P =0.001).结论 长链非编码RNA SPRY4-IT1在NSCLC中高表达,并可通过增强ZNF703表达促进肺癌细胞的增殖.
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长链非编码RNA SPRY4-IT1对非小细胞肺癌细胞增殖和侵袭的影响及机制
目的:探讨长链非编码RNA SPRY4-IT1在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织和细胞系中的表达水平,以及SPRY4-IT1对NSCLC细胞增殖和侵袭功能的影响及分子机制.方法:用实时定量PCR技术检测SPRY4-IT1在NSCLC组织及细胞系中的表达水平.将pCDNA-SPRY4-IT1转染SPC-A1和A549细胞,过表达SPRY4-IT1,用MTT法和克隆形成实验检测SPRY4-IT1对SPC-A1和A549细胞增殖和克隆形成能力的影响.Transwell实验评价SPRY4-IT1对细胞迁移、侵袭能力的影响.qPCR和Western blot检测过表达SPRY4-IT1对上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)标志物上皮性钙粘蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)表达水平的影响.结果:SPRY4-IT1的表达在NSCLC组织和细胞系中出现显著下调(P<0.01).过表达SPRY4-IT1能降低SPC-A1细胞和A549细胞的增殖和侵袭能力.过表达SPRY4-IT1显著上调E-cadherin的水平、抑制Vimentin的表达,从而影响肿瘤细胞EMT过程.结论:长链非编码RNA SPRY4-IT1表达下调可能通过调控EMT机制促进NSCLC细胞的增殖和侵袭.
