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  • 人参蛋白研究进展

    作者:王逸;鲍勇刚;贾韦国;刘新民

    人参作为一种名贵中药材,拥有悠久的药用历史.长期以来除对人参皂苷等少数几种物质进行广泛研究外,对人参蛋白也进行了一定研究.已从人参根中分离纯化出具有重要生物学活性的多肽及蛋白质,以及重要生物合成酶蛋白并开展了相应的人参代谢工程研究.人参根中差异蛋白的发现为人参蛋白研究、品质鉴定及质量控制提供参考.目前人参蛋白的研究已逐渐成为人参研究的热点之一,就人参蛋白的研究进展进行了整理归纳,以期对人参蛋白的研究提供帮助.

  • 人参蛋白对β淀粉样蛋白1-40和H2O2损伤神经元的保护作用及其机制

    作者:李红艳;曹阳;白雪媛;赵丹;张晓丹;杨静娴;康廷国

    目的:探讨人参蛋白(GP)对β淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)和过氧化氢(H2O2)诱导神经元损伤的影响,阐明GP对神经元的保护作用及其机制.方法:从新生乳鼠大脑皮层中分离纯化神经元,培养12 d后,分别采用Aβ1-40 (30 μmol·L-1)和H2O2(200 μmol·L-1)诱导神经元损伤,并随机分为模型组(Aβ1-40模型组与H2O2模型组,不加药物)、GP组和GP含药血清组.采用MTT法检测各组神经元存活率;试剂盒法检测细胞培养上清液中一氧化氮合酶(NOS)活性和一氧化氮(NO)水平;Hoechst 33342/PI荧光染色检测细胞凋亡与坏死率.结果:倒置荧光显微镜,Aβ1-40和H2O2处理后,神经元数量明显减少,轴突缩短或消失,胞体变圆、缩小,大小不等,核固缩,核染色质聚集;Heochst 33342染色呈现高蓝光;部分细胞PI染色呈现高红光.加入GP及其含药血清后,神经元数量增多,胞体增大,细胞核着色形态为圆形、淡蓝色,PI阳性细胞数量减少.MTT法,GP组细胞存活率明显高于模型组(P<0.05或P<0.01),GP含药血清组与模型组无显著差异(5%GP含药血清组除外,P>0.05);试剂盒法,GP组细胞培养上清液中NOS活性与NO水平明显低于模型组(P<0.05或P<0.01);Hoechst 33342/PI法,GP及其含药血清组细胞凋亡率低于模型组,以GP组差异更明显(P<0.05或P<0.01),GP及其含药血清组细胞坏死率与模型组比较差异无统计学意义(P>0.05).结论:GP具有神经保护作用,作用机制与减少NOS活性、降低NO水平、抑制神经元凋亡有关.

  • 人参蛋白的提取和体外免疫调节活性研究

    作者:王钰莹;闫福源;闫凯丽;王任晶;许宁;王丹阳;汪莹;何慧楠;刘莉

    目的 提取人参蛋白,并研究其对小鼠巨噬细胞的免疫调节活性.方法 采用中性盐缓冲溶液提取人参蛋白,用lowry法测定蛋白含量并利用SDS-PAGE电泳法测定人参蛋白的亚基分子量分布.以小鼠巨噬细胞RAW 264.7为模型研究人参蛋白对细胞吞噬能力的影响,刺激产生NO含量,释放PGE2、TNF-α来考察其对巨噬细胞免疫活性的影响.结果用lowry法测定人参蛋白的蛋白含量为1.95 mg/mL,人参蛋白的亚基分子量从8 kD到66 kD.结论人参蛋白可通过增强巨噬细胞吞噬能力,释放免疫因子等方面增强巨噬细胞免疫活性.

  • 利用快速溶剂萃取方法提取人参蛋白的研究

    作者:汪树理;李晓红;张秋;王艳梅

    目的 该研究采用快速溶剂萃取装置(ASE)萃取人参蛋白,并与传统浸提法进行比较研究,建立了人参蛋白质的佳提取工艺.方法 加入捣碎的鲜人参10g,萃取溶剂为低浓度的KOH溶液,温度50℃,静态萃取时间5min,循环3次,萃取体积100ml.结果 人参蛋白的提取率为84.08%.而采用传统浸提法,人参蛋白提取率为72.77%.结论 采用快速溶剂萃取方法提取人参蛋白要大大优于传统的浸泡提取方法.

  • 人参蛋白协同H2O2诱导SH-SY5Y细胞氧化损伤

    作者:程璐;李红艳;孔亮;杨静娴;康廷国;张江华

    目的:探讨人参蛋白(GP)协同H2O2诱导人神经母细胞瘤(SH-SY5Y)氧化应激损伤的作用,并筛选二者的佳联合浓度.方法:首先采用不同浓度H2O2诱导SH-SY5Y细胞氧化损伤,然后采用不同浓度GP联合200 μmol·L-1H2O2诱导SH-SYSY细胞氧化损伤;采用倒置荧光显微镜观察细胞形态,MTT法检测细胞存活,Hoechst 33342染色法检测细胞凋亡.结果:SH-SY5Y细胞经GP-H2O2作用后,细胞数量减少,轴突缩短或消失,胞体变圆、缩小,大小不等;细胞存活率降低;Heochst 33342染色呈现高蓝光;GP 60 mg·L-1+H2O2 200 μmol·L-1为联合诱导氧化应激损伤的佳浓度.结论:GP有协同H2O2诱导SH-SY5Y细胞氧化损伤的作用,抑制细胞增殖、促进细胞凋亡是其可能的作用机制.

  • 人参蛋白对过氧化氢致神经元损伤的保护作用

    作者:李红艳;代永霞;张江华;孔亮;康廷国;杨静娴

    目的:采用H2O2诱导小鼠神经元损伤,研究人参蛋白(GP)对神经元的保护作用.方法:从新生乳鼠大脑皮层中分离纯化神经元,通过倒置荧光显微镜观察细胞形态,β-半乳糖苷酶试剂盒检测细胞衰老,MTT法检测细胞存活,Hoechst 33342/PI双染色法检测细胞凋亡与坏死,荧光定量RT-PCR实验检测凋亡基因Bcl-2、Bax mRNA表达.结果:H2O2致细胞出现轴突缩短或消失,胞体变圆缩小,大小不等,核固缩,核染色质聚集等形态学变化,细胞存活率降低,Hoechst33342及β-半乳糖苷酶染色阳性;人参蛋白可改善细胞形态,增加细胞存活率,减少细胞凋亡与坏死,降低细胞衰老率.结论:人参蛋白对H2O2致神经元损伤具有保护作用,其机制与促进Bcl-2 mRNA表达,抑制Bax mRNA表达有关.

  • 人参蛋白对小鼠免疫功能影响的研究

    作者:李红艳;赵雨;孙晓迪;白雪媛;邢楠楠;赵大庆

    目的:探讨人参蛋白对小鼠免疫功能的影响.方法:选用昆明小鼠,分别进行对二硝基氟苯(DNFB)致小鼠迟发性超敏(DTH)K应实验、小鼠炭廓清实验、耐缺氧实验及常温游泳实验,并测定肝脏SOD、MDA含量.结果:人参蛋白对DNFB致小鼠耳肿胀具有明显增强作用(P<0.01),可明显提高碳廓清实验小鼠吞噬指数,增加小鼠脾和胸腺脏器指数(P<0.01),延长小鼠游泳时间及耐缺氧时间(P<0.05).提高肝脏SOD含量并降低MDA含量(P<0.05).结论:人参蛋白具有增强小鼠细胞免疫、单核-巨噬细胞功能、增加免疫器官重量、耐缺氧、抗疲劳、抗氧化作用.

  • 人参化学成分的免疫作用及其机制的研究进展

    作者:赵莉;郜玉钢;姬庆

    人参是我国传统名贵中药材,具有良好的免疫药理作用,对其免疫作用及机制的研究已成为热点.因此,文章综述了人参中人参总皂苷、人参皂苷单体、人参多糖和人参蛋白的免疫作用及其作用机制.旨在为人参产业化发展及应用提供一定的科学依据.

  • 人参蛋白对高脂血症模型大鼠的降血脂作用

    作者:徐云凤;赵雨;幺宝金;王涵;杨士慧

    目的 探讨人参蛋白对高血脂模型大鼠的降血脂作用.方法:采用高脂饲料喂养建立高血脂大鼠模型,以低、中、高三个剂量人参蛋白灌胃,测定大鼠体重和血清总胆固醇(TC)、甘油三醋(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的含量,同时对大鼠进行肝功能检查结果:给予高脂饲料后大鼠体重和血脂显著升高,人参蛋白能够明显降低高血脂模型大鼠血清TC及rG含量,有升高模型大鼠肝脏谷丙转氛酶(ALT),谷草转氨酶(AST)含量和降低碱性磷酸酶(ALP)含量的作用.结论:人参蛋白对高脂血症大鼠具有降血脂的作用,部分剂量有改善模型动物肝脏功能的作用.

  • 人参蛋白对Hep-2细胞增殖影响的比较

    作者:李红艳;赵雨;张惠;幺宝金;王伟楠

    目的:比较人参蛋白对人喉癌细胞(Hep-2)增殖的影响.方法:采用中性缓冲液浸提法制备人参蛋白Ⅰ,蛋白Ⅰ经沸水浴处理、等电点沉淀,分别制备得到蛋白Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ;采用MTT法检测细胞活性.结果:人参蛋白Ⅰ及人参蛋白Ⅲ对Hep-2细胞增殖具有明显抑制作用(P<0.01),人参蛋白Ⅱ及人参蛋白Ⅳ对Hep-2细胞增殖无明显影响.结论:人参蛋白是人参的主要活性成分之一,其对Hep-2细胞增殖的影响与蛋白制备方法密切相关.

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