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多巴胺能细胞在大鼠消化道不同部位分布的比较
目的 比较正常大鼠消化道不同部位多巴胺能细胞的分布性差异.方法 用免疫荧光组织化学法观察多巴胺转运蛋白(DAT)在正常大鼠的胃、十二指肠、回肠以及结肠的分布,提取正常大鼠上述部位组织总RNA,反转录成cDNA后,用酪氨酸羟化酶(TH)与DAT基因特异性引物进行聚合酶链反应(PCR),并做半定量检测.结果 确定了多巴胺能细胞在正常大鼠胃、十二指肠、回肠以及结肠的具体分布情况.发现TH与DAT基因在消化道不同部位的表达有差异.结论 正常大鼠消化道存在着大量多巴胺能细胞,它们可能通过分泌多巴胺来调节消化道的分泌与吸收功能.
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斑马鱼帕金森疾病模型的建立
目的:利用斑马鱼建立一种新的帕金森疾病动物模型.方法:利用显微注射将6-羟基多巴(6-OHDA)注射到斑马鱼玻璃体腔特异杀死视网膜中多巴胺能神经细胞,采用免疫印迹、免疫组化等技术在蛋白水平上进行鉴定.结果:与注射PBS的对照组相比,注射6-OHDA的实验组在行为学和生理学上都有明显的变化,实验组的斑马鱼游动缓慢甚至静止,其视网膜内多巴胺能细胞数明显减少,TH后明显降低,这些变化符合帕金森氏病的特征.结论:采用6-OHDA注射至斑马鱼玻璃体腔能够快速有效的建立斑马鱼帕金森氏病的动物模型.
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视网膜电图在帕金森病诊断中的应用
帕金森病(Parkinson disease,PD)是一种常见的锥体外系疾病.运动减少,肌张力增高及震颤是其主要临床表现.而眼科检查发现多数帕金森病患者有视觉对比敏感度及色觉敏感度下降,并与疾病的严重程度相关,这可能是帕金森病患者体内多巴胺(dopamine,DA)缺乏所致.由于视网膜感受器细胞亦是多巴胺能细胞,对多巴胺缺乏比较敏感,故笔者试图通过视网膜电图(electroretinogram,ERG)检查为帕金森病诊断提供参考,结果报告如下.
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姜黄素对多巴胺能细胞的保护作用研究
目的 探讨姜黄素对多巴胺能细胞的保护作用及机制.方法 采用神经毒素鱼藤酮(1 μmol/L)处理经神经生长因子(NGF)(50 ng/ml×7)诱导分化过的PC12细胞,并在处理前6 h加入1 μmol/L的姜黄素进行干预,MTT法检测细胞活力,荧光分光光度法检测细胞内活性氧水平,比色法检测还原型谷胱甘肽(GSH)含量.结果 NGF诱导后的PC12细胞经1 μmol/L鱼藤酮处理24 h后,细胞活力下降至对照组的57.1%,细胞内活性氧水平为对照组的189%,而GSH水平显著下降(P<0.05);姜黄素干预后,与鱼藤酮组相比,细胞活力和GSH含量显著提高,活性氧水平显著降低(P<0.05).结论 姜黄素对多巴胺细胞具有保护作用,其机制与抗氧化活性有关.
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黄芪甲甙对大鼠LPS诱导原代培养多巴胺神经细胞的保护效应
目的:观察黄芪甲甙(AS-Ⅳ)对大鼠脂多糖(LPS)诱导多巴胺能细胞增殖的影响,检测炎症因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS) mRNA表达变化.方法:建立原代多巴胺细胞培养,加入LPS刺激,给予不同浓度AS-Ⅳ预处理.通过MTT方法检测多巴胺能细胞增殖情况,通过RT-PCR检测TNF-α、iNOSmRNA表达变化.结果:LPS刺激后多巴胺能细胞MTT值降低,经AS-Ⅳ预处理后MTT值升高.LPS刺激后TNF-α、iNOS mRNA表达上调；经AS-Ⅳ预处理后,TNF-α、iNOS mRNA表达明显下调(P＜0.05).结论:大鼠用AS-Ⅳ预处理可降低LPS对多巴胺能细胞毒性作用,提示AS-Ⅳ预处理可阻断LPS诱导多巴胺细胞变性和炎症变化,对中脑多巴胺能神经元具有保护性作用.
