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氨溴索对放射性肺损伤保护作用的实验研究
目的探讨氨溴索对小鼠放射性肺损伤的保护作用.方法采用雄性BALB/c小鼠,体重25 g左右,随机分为空白对照组(C)、单纯放射组(SI)和照射加氨溴索组(SI+A),每组80只,观察8个月.采用4 MV X线直线加速器照射,射野2 cm×2.5 cm.常规照射,总吸收剂量为25Gy/5次.氨溴索口服吸收50 mg·kg-1·d-1,照射前1周服用至实验结束.照射后1～8个月取右肺组织进行羟脯胺酸含量测定,左肺组织用于病理检测,血浆进行转化生长因子β1(TGF-β1)含量测量.结果SI组羟脯胺酸含量从第3个月开始增高,6月时高,与7和8月基本一致.6月时,SI组明显高于SI+A组(P＜0.01);SI+A组明显高于C组(P＜0.01);TGF-β1含量从第2个月开始上升,3月达到高峰,4、5月开始下降,持续到8月.3个月时,SI组明显高于SI+A组(P＜0.01);SI+A组高于C组(P＜0.01).结论氨溴索通过羟脯胺酸和TGF-β1含量的改变减轻放射性肺损伤.
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单味药鹿茸调节骨关节炎模型兔软骨细胞外基质主要成分ADAMTS-4/TIMP-3基因的表达
背景:大量研究证实鹿茸对于治疗骨关节炎有效,但是其与软骨细胞外基质主要成分ADAMTS-4/TIMP-3基因的相关性却报道较少.目的:探讨鹿茸对兔骨关节炎模型ADAMTS-4/TIMP-3基因表达的影响,进一步阐明鹿茸防治骨关节炎的作用机制.方法:选择健康雌性新西兰大白兔42只,采用前交叉韧带离断法建立兔骨关节炎模型,随机分为3组:对照组(生理盐水)、低剂量鹿茸组(0.21 g/kg)和高剂量鹿茸组(0.84 g/kg).干预9周后,检测双膝关节中的羟脯氨酸含量,采用RT-PCR检测各组软骨靶基因mRNA的表达,采用Western blot测量蛋白聚糖和Ⅱ型胶原蛋白的表达.结果与结论:①低剂量鹿茸组和高剂量鹿茸组软骨羟脯氨酸含量显著高于对照组,且高剂量鹿茸组显著高于低剂量鹿茸组(P<0.05);②高剂量鹿茸组和低剂量鹿茸组ADAMTS-4 mRNA表达较对照组明显降低,且高剂量显著组低于低剂量鹿茸组(P<0.05),而TIMP-3、蛋白聚糖、Ⅱ型胶原蛋白mRNA表达较对照组明显增加,且高剂量鹿茸组显著高于低剂量鹿茸组(P<0.05);③高剂量鹿茸组和低剂量鹿茸组蛋白聚糖、Ⅱ型胶原蛋白表达较对照组明显增高,且高剂量鹿茸组显著高于低剂量鹿茸组(P<0.05);④结果提示,鹿茸通过抑制ADAMTS-4的分泌,促进保护因子TIMP-3的分泌,阻止蛋白聚糖、Ⅱ型胶原蛋白蛋白的降解,起到修复软骨的作用.
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二次气管切开灌注二氧化硅构建大鼠硅肺模型的效果观察
[目的]通过二次气管切开灌注二氧化硅建立硅肺动物模型,为探讨硅肺病发病机制、寻找更有效的治疗方法提供模型支持.[方法]将40只SD雄性大鼠随机分为对照组和模型组各20只.模型组采用二次(间隔7d)气管切开灌注0.5 mLSiO2混悬液(50 mg/mL)建立硅肺大鼠模型,对照组通过气管滴注注入生理盐水.两组均在第一次染尘90 d后行CT检查,并于处死后进行HE和Masson染色观察肺组织病理学变化;用酶联免疫法检测大鼠血清白介素-6(IL-6)和转化生长因子β1(TGF-β1)的水平,酸解法检测肺组织羟脯胺酸(HYP)水平的变化.[结果]模型组大鼠肺组织双肺表面可见散在的灰白色斑点,部分融合成不规则形斑块;CT摄影可见肺部呈弥漫性云雾状片状高密度影;病理检查结果显示肺组织出现细胞性硅结节(肉芽肿)等病理改变;模型组以上影像学、大体外观、组织学病理改变各有16例、20例、20例,而对照组均未发生改变.模型组IL-6、HYP、TGF-β1水平较对照组均明显升高,组间差异均有统计学意义(P＜ 0.01).[结论]采用二次染尘法气管内二次注入二氧化硅(SiO2)建立硅肺大鼠模型,能够达到满意效果.
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赖诺普利对百草枯中毒肺纤维化的作用
目的 探讨赖诺普利(ACE-1)对百草枯中毒肺纤维化作用及其机制.方法 :清洁级成年Wistar大鼠(体重150～300g)50只.被分为5组:组1予生理盐水,组2予赖诺普利(1mg/kg:PO),组3予单剂量百草枯(20mg/kg),组4(治疗组):予百草枯后再给予赖诺普利,组5(预治疗组):予赖诺普利后再给予百草枯.21天后,测量大鼠肺组织羟脯胺酸含量(hydroxypro-line,Hyp)和过氧化脂质(LPO),一部分肺组织作病理组织学检查.结果 百草枯显著的增加肺组织羟脯胺酸含而赖诺普利显著降低大鼠肺组织中羟脯胺酸含量,组织学检查亦显示赖诺普利能有效地保护百草枯诱导的肺纤维化.脂质过氧化水平与对照组相比并无显著改变.结论 赖诺普利可能足通过抑制血管紧张素Ⅱ的产生发挥其抗纤维化作用.
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组织工程心脏瓣叶体外研究瓣叶基质的检测
目的初步探讨组织工程心脏瓣叶体外生成基质的检测.方法杂种猪4只,取主动脉.分离并培养、扩增内皮与成纤维、平滑肌细胞,将细胞种植在湿化处理后的支架材料上(聚羟基烷酸酯,PHA).以首次种植成纤维、平滑肌细胞为起点,培养28 d,使用氯胺-T法检测样本的羟脯氨酸含量,并行扫描电镜检测.结果氯胺-T法检测羟脯氨酸,方法简便,准确性高,经测定组织工程心脏瓣叶羟脯氨酸含量为(10.93±2.89)ug/g(材料重量).扫描电镜检测显示细胞表面可见基质的形成.结论氯胺-T法可精确测定体外培养的组织工程心脏瓣叶胶原含量,结合扫描电镜可有效检测基质的生成.
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TGF-β1、TNF-α及羟脯胺酸在大鼠放射性肺损伤中的变化及意义
目的:探讨大鼠放射性肺损伤与炎症反应、纤维化改变的相关机制.方法:SD大鼠分为3组:对照组、7.0 Gy放射损伤组、14.4 Gy放射损伤组.其中放射损伤组大鼠麻醉后用60Co治疗机单次照射右全肺；在照射后的1,7,30,90d,取大鼠右肺组织进行HE、Masson染色检查；免疫组化检测肺组织转化生长因子β1(TGF-β1)、肿瘤坏死因子(TNF-α)的表达,并检测羟脯胺酸的含量变化.结果:14.4 Gy组观察到明显的纤维化改变；免疫组化染色显示在各观察时点TGF-β1、TNF-α均为阳性表达；羟脯胺酸含量30 d后明显增加,至90 d时达大值,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论:放射性肺损伤的炎症反应激发了放射性肺损伤的纤维化进程.
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玉屏风散对大鼠光老化皮肤HYP含量、LC数量及形态的影响
目的:探讨玉屏风散是否对大鼠光老化皮肤具有保护作用.方法:将大鼠随机分成6组,除正常对照组外,模拟UV连续照射60天,造成皮肤光老化模型,给药组照射同时分别灌胃高.中,低剂量的玉屏风散提取液,模型组灌胃等剂量生理盐水.第61天碱水解法测定皮肤组织中羟脯胺酸(HYP)含量,免疫组织化学染色法观察表皮郎格罕斯细胞(LC)数量及形态.结果:模型组HYP含量明显减少;模型+玉屏风散高、中、低剂量组HYP含量均有所提高,并呈剂量依赖(分别是P<0.01,P<0.05).模型+玉屏风散高剂量组LC数量较多,树突状结构明显,排列较规则;模型+玉屏风散中、低剂量组对LC数量,形态及排列也有不同程度的改善作用.结论:玉屏风散对紫外线照射引起的大鼠皮肤光老化具有保护作用.其机制可能是一方面玉屏风散具有清除自由基、促进表皮细胞分裂,增加真皮胶原蛋白合成的作用;另一方面玉屏风散能够减少表皮LC的迁移,保护其树突状结构.
