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菌根真菌对青蒿生长状况影响的研究
目的：青蒿又名黄花蒿（Artemisia annua L），是一年生菊科草本植物。从中提取的有效成分青蒿素，对抗氯喹的恶性疟及脑内虐有特效，其作用机理与传统的奎宁类抗疟药物不同。菌根是自然界中一种普遍存在的植物共生现象。它是土壤中的菌根真菌与高等植物营养根系形成的一种互惠共生体。作为自然界中的一种普遍现象，菌根真菌的存在对青蒿的生长状况必然有一定的影响。
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金线莲菌根真菌的分离和鉴定
目的 分离及鉴定野生金线莲根内菌根真菌.方法 采用平皿点种法进行金线莲菌根真菌的分离,提取菌株的总DNA,采用丝状真菌ITS通用引物对其rDNA相应区段进行PCR扩增,产物经纯化后测序.结果 结合各菌株的形态特征和ITS区域基因序列特征,将A12菌株、5号菌株、2号菌株、6号菌株、A46菌株和A55菌株鉴定为丝核菌(Rhizoctonia sp.),其有性态为Thanatephorus sp.或Ceratobasidium sp..结论 通过对金线莲菌根真菌的分离鉴定,有望将其应用到金线莲及兰科其它濒危药用植物繁殖中去.
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浙麦冬根际菌根真菌多样性及土壤性状研究
目的:研究浙麦冬根际菌根真菌多样性以及种植地土壤性状.方法:用湿筛法获得麦冬根际土壤的丛枝菌根真菌孢子,计数孢子密度、物种丰富度及各物种的出现频率;分析浙麦冬种植地土壤性状及金属含量和农药残留.结果:浙麦冬根际土壤中丛枝菌根资源丰富,孢子密度平均824.33个/100g土壤,球囊霉属、巨孢囊霉属和无梗囊霉属为优势类群;菌种丰富度平均为5.丛枝菌根真菌孢子的分布呈明显的季节性变化.种植土壤含有丰富的钙、镁、锌、铜、铬等金属元素,无农药残留.结论:浙麦冬根际含有丰富的球囊霉属、巨孢囊霉属和无梗囊霉属等菌根真菌,其分布具有明显的季节性;根际土壤含有丰富的钙、镁、锌、铜、铬等金属元素.
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福建金线莲与菌根真菌互作过程中的蛋白质组研究
目的:通过蛋白质组差异研究菌根真菌促进植物生长的机制.方法:采用蛋白质双向电泳结合MALDI-TOF/TOF质谱方法研究了接种瘤菌根菌属Epulorhiza sp.的福建金线莲的蛋白组.结果:MALDI-TOF/TOF质谱分析了27个差异蛋白点,在数据库中以绿色植物为检索范围,确定了22个差异蛋白,功能大多涉及植物的信号传导、代谢调节等,光合作用及物质代谢中的功能蛋白及酶类等也有涉及.结论:菌根真菌通过影响植物的调控系统作用于植物,积极的调控使得植物物质代谢、光合作用等增强,进而表现出植株健壮、抗性增强；研究还表明植物与菌根真菌互作时可能发生某些基因的沉默.
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两种表型铁皮石斛的研究
目的 为铁皮石斛种质的评价和选育提供科学依据.方法 测量农艺性状指标;分析茎化学成分;观察植物与菌株M2(Mycena sp.)菌根栽培过程中生物量和化学成分含量的动态变化.结果 两种表型铁皮石斛的茎长、节距、叶宽和叶形指数有显著差异(P＜0.05);醇溶性浸出物和多糖含量有显著差异(P＜0.05);在A型与B型的生长过程中4,4′-二羟基-3,5-二甲氧基联苄和3,4′-二羟基-5-甲氧基联苄的含量有很大差异.菌根栽培12月,M-A组的茎干重和全株干重均极显著高于CK-A组(P＜0.01),分别提高了37.6％和37.3％,茎多糖含量提高了36.8％,6个对照品化合物含量提高了5％～50％.菌根栽培12月,M-B组茎多糖含量提高了16.7％,6个对照品化合物含量提高了25％ ～ 170％.结论 两种表型铁皮石斛的联苄含量,以及菌根栽培后它们对同一菌根真菌的响应能力有差异.
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菌根真菌诱导的铁皮石斛根差减cDNA文库构建
目的 构建菌根真菌共生诱导的铁皮石斛根的差减cDNA文库,从中筛选出差异表达基因.方法 采用SMARTer PCRcDNA合成方法直接以总RNA为模板合成并富集稀少cDNA,再利用抑制消减杂交(SSH)方法构建受菌根真菌共生诱导铁皮石斛根的差减cDNA文库.结果 成功构建了受菌根真菌诱导铁皮石斛根的差减cDNA文库,共获得1 975个阳性克隆.经检测,90％以上克隆能扩增出有效产物,其插入片段大小在150～1 000 bp之间.随机挑取了20个克隆菌液测序并进行了比对分析,大部分为植物应对环境胁迫防御性基因.结论 该技术体系所构建的差减cDNA文库质量较好,操作方便,尤其适用于珍稀濒危的植物材料.
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5种兰科药用植物可培养内生真菌的鉴定及多样性分析
目的 调查5种兰科药用植物可培养内生真菌的多样性和分布,鉴定具有生物活性的真菌物种用于今后濒危兰科药用植物的人工栽培.方法 采用形态学和分子生物学的方法鉴定定殖于兰科5种药用植物(白芨、手参、金钗石斛、束花石斛、金线莲)体内可培养的内生真菌.结果 241株内生真菌分属子囊菌门(Ascomycota)3个纲,52个属,约100余种.10株内生真菌属于担子菌门(Basidiomycota).除未鉴定到属水平的菌株外(19.5％),已鉴定的内生真菌中,镰孢菌属(Fusarium)(14.9％)、刺盘孢属(Colletotrichum) (12.9％)、炭角菌属(Xylaria)(5.4％)及交链孢属(Alternaria)(3.7％)真菌是分离频率较高的真菌类群.暗色有隔内生真菌(DSE)仅在采自西藏地区的手参中有分离,兰科专一性菌根真菌如胶膜菌属(Tulasnella)、蜡壳菌属(Sebacina)及角担菌属(Ceratobasidium)真菌在石斛,白芨及手参中有分布.结论 内生真菌的种类分布与宿主植物种类及其地理分布有一定的相关性.该研究获得可培养的内生真菌菌株,为今后兰科药用植物的栽培和活性天然产物的分离提供宝贵的微生物资源.
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台湾金线莲和菌根真菌互作过程中抗旱相关蛋白质组差异
目的 研究干旱条件下接种菌根真菌的植物与未接菌植物的蛋白质组差异,探索菌根真菌提高植物抗旱能力可能的机制.方法 以未接菌植物作对照,采用双向电泳法首次从真菌、植物和环境3因素上研究在干旱逆境中接种丝核菌属的台湾金线莲与未接菌对照的蛋白质组差异.结果 差异表达蛋白中涉及光合作用的有8个,其中7个与暗反应中CO2的固定相关,并且植物启动了干旱条件下的C4途径以充分利用CO2；涉及糖、脂代谢的有5个蛋白,蛋白质合成相关蛋白有3个,抗性相关蛋白2个.结论 干旱条件下接菌台湾金线莲的光合作用的暗反应尤其是C4途径加强,增加了在气孔关闭情况下固定和利用CO2的能力,糖、脂代谢和蛋白合成及抵抗病虫害的能力均强于未接菌对照；丝核菌属菌株能够帮助台湾金线莲增加抵御干旱的能力.
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兰科石斛属植物菌根共生研究进展
目的 综述兰科石斛属药用植物菌根共生研究进展.方法 以近年来的研究文献为基础,结合本实验室的研究结果,对国内外石斛属植物菌根共生理论研究和技术应用进行综述.结果 介绍菌根真菌促进石斛种子萌发,生长发育,有效成分积累等生物活性、可能的作用机理及其在石斛资源保护和再生中的应用.结论 兰科菌根共生技术将在石斛属药用植物的人工栽培和资源保护方面有广阔的应用前景,深入开展共生机制的研究将为菌根共生技术应用提供理论指导.
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石斛属植物内生真菌及菌根真菌物种多样性研究进展
目的 综述兰科石斛属药用植物内生真菌及菌根真菌多样性研究进展.方法 总结国内外石斛属植物内生真菌多样性研究的新文献,结合本实验室近五年的研究结果,分析石斛属植物内生真菌的种类及其与宿主植物的专一性关系.结果 综述了石斛属内生真菌及菌根真菌的分离方法、鉴定手段、种类组成、分布及与宿主植物的专一性关系,分析了目前该领域研究中存在的问题,提出了可能的解决方法,并对未来的研究做了展望.结论 内生真菌及菌根真菌在石斛属植物资源保护和再生中具有广阔的应用前景,仍需继续深入系统的研究.
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铁皮石斛研究进展
综述了20余年来国内有关铁皮石斛的组织培养、化学成分、药理作用、菌根真菌等研究工作,并对其产业化开发的有关问题作了初步的探讨.
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甘草有益微生物的研究进展
植物体内大量分布的微生物对植物产生的影响已成为人们关注的热点,特别是那些有益的影响可对植物的生长及活性成分的形成产生一定的作用.甘草作为一种大宗中药,其栽培品的质量一直是人们所关心的问题,甘草有益微生物对提高甘草的品质有重要作用.该文综述了甘草有益微生物的研究进展,以期对提高栽培甘草的质量起到指导意义.
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铁皮石斛研究综述
本文综述了20余年来国内有关铁皮石斛的组织培养、化学成分、药理作用、菌根真菌等研究工作,并对铁皮石斛产业化开发提出建议.
