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  • 毒蕈碱受体Ⅰ型受体在人眼巩膜成纤维细胞中的表达

    作者:周翔天;张立华;吕帆;谢若衷;胡诞宁;付小莹;瞿佳

    目的探讨正常人眼巩膜成纤维细胞毒蕈碱受体Ⅰ型(M1)受体的表达与近视发生发展之间的关系.方法应用定点解剖及游走促进法分离培养人巩膜成纤维细胞,取3~5代生长良好的细胞,运用RT-PCR、间接免疫荧光试验检测培养的巩膜成纤维细胞中M1受体的表达;并制作巩膜组织的冷冻切片,以免疫组化法检测巩膜组织中巩膜成纤维细胞上M1受体亚型的表达.结果培养的巩膜成纤维细胞呈双极型或纺锤形,平均分裂时间为2~3 d左右,细胞生长旺盛,近融合时细胞呈规则排列的纺锤形.RT-PCR和间接免疫荧光试验结果显示体外培养的人巩膜成纤维细胞表达M1受体.组织免疫组化法结果显示巩膜组织中的成纤维细胞表达M1受体.结论人巩膜成纤维细胞具有M1受体的分布.巩膜上M1受体的存在预示着M1受体拮抗剂延缓近视的发生发展的作用部位可能是位于巩膜上,而巩膜上的M1受体可能参与了近视的眼轴延长及近视屈光度的改变.(中华眼科杂志,2005,41:995-999)

  • 毒蕈碱1型受体在人视网膜色素上皮细胞表达的研究

    作者:张立华;闫东升;周翔天;吕帆;谢若衷;吴光波;胡诞宁;付小莹;瞿佳

    目的 探讨正常人眼视网膜色素上皮(RPE)细胞毒蕈碱1型(M1)受体的表达情况和M1受体对维持RPE细胞功能的作用及其与近视发生、发展的关系.方法 采用已建立的RPE细胞的分离和培养方法建立细胞培养株.取传3~5代生长良好的细胞,应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、间接免疫荧光法(IIF)检测培养的RPE细胞中M1受体的表达情况.结果 培养的RPE细胞呈多边形,平均分裂时间约2~3 d,细胞内含有棕黄色素颗粒,随着细胞的分裂,细胞内的色素颗粒稀释和变少.RT-PCR和间接免疫荧光法检测,显示体外培养的人RPE细胞有M1受体表达.结论 人RPE细胞有M1受体的分布.M1受体对维持RPE细胞的功能起重要作用.M1受体拮抗剂玻璃体腔注射以延缓近视的发生、发展机制可能与其抑制RPE细胞功能有关.

  • M1受体激动剂介导的神经保护作用机制

    作者:马珂;陆阳

    阿尔茨海默病(AD)是老年期常见的一类慢性、进行性神经细胞退行性病变.应用毒蕈碱M1受体激动剂是治疗AD的策略之一.M1受体激动剂可通过对抗淀粉样β蛋白产生的神经毒性,减少tau蛋白的过度磷酸化,产生神经生长因子样作用,以及缩短后超极化时程等机制而产生神经保护作用.

  • 七氟烷和东莨菪碱对老年大鼠海马毒蕈碱受体表达的影响

    作者:李国君;张焰;方强;孙大鹏;张邓新

    目的 探讨七氟烷和东莨菪碱对老年大鼠海马毒蕈碱受体表达的影响.方法 健康雄性老年SD大鼠48只,月龄18月,体重560~600 g,随机分为对照组(Con组)、七氟烷组(Sev组)和东莨菪碱组(Sco组),每组16只.Sco组腹腔注射东茛菪碱0.8 mg/kg,Con组和Sev组腹腔注射等容量生理盐水,30 min后Sev组吸入3.0%七氟烷、Con组和Sco组吸入空气2 h.于给药后1、3 d时分别取8只大鼠,采用Y型迷宫实验测试学习记忆能力,然后断头处死,取脑分离海马,采用RT-PCR法检测M1受体和M,受体mRNA的表达,采用免疫组化法检测海马神经元M1受体和M2受体的表达.结果 与Con组相比,给药后1d时Sev组和Sco组学习次数增多、训练时间延长,海马M1受体和M2受体的表达下调(P<0.05);各组间给药后3 d时学习次数、训练时间及海马M1受体和M2受体的表达差异无统计学意义(P>0.05).结论 七氟烷和东莨菪碱均可诱发老年大鼠认知功能一过性降低,其机制与海马M1受体和M2受体表达下调有关.

  • 七氟烷对老年大鼠海马毒蕈碱受体M,表达和认知功能的影响

    作者:李国君;张焰;方强;孙大鹏;张邓新

    目的 探讨不同剂量七氟烷对老年大鼠海马毒蕈碱受体M.受体亚型(mAChR M1)表达的影响及与认知功能的关系.方法 40只SD大鼠随机分为空白对照组(Con组)、1.5%七氟烷Ⅰ组(1.5%Sev Ⅰ组)、1.5%七氟烷Ⅱ组(1.5%Sev Ⅱ组)、3.0%七氟烷sev Ⅰ组(3.O%Sev Ⅰ组)和3.0%七氟烷Ⅱ组(3.0%SevⅡ组),每组8只.Con组吸入空气2h,1.5%Sev Ⅰ组、1.5%Sev Ⅱ组、3.0%Sev Ⅰ组和3.0%SevⅡ组分别吸入1.5%或者3.0%七氟烷2h.于给药后1 d或7d采用Y型迷宫实验测试学习记忆能力后即刻处死取脑,分离海马,通过RT-PCR法检测mRChR M1 mRNA表达,免疫组化法检测海马神经细胞M1受体的表达.结果 3.0%sev Ⅰ组学习次数,训练时间[分别为(41.83±4.30)次,(48.76±1.24)min]高于对照组[分别为(33.50±4.80)次,(38.24±0.68)min],差异有显著性(P<0.05),海马mAChR M1(42.12±0.66)和mAChR M1mRNA表达低于对照组mAChR M1(70.21±0.45)和mAChR M1 mRNA表达水平,差异有显著性(P<0.05).结论 七氟烷麻醉时,可以引起老年大鼠学习记忆能力一过性降低,可能与大鼠海马mAChR M1下调有关.

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