首页 > 文献资料
-
生物节律调控关键基因遗传变异与乳腺癌患病风险的相关性
目的 研究生物节律调控关键基因Clock和Per2的遗传变异与乳腺癌发病风险的关系.方法 采用病例-对照研究,使用TaqMan荧光定量PCR法检测406例乳腺癌患者和412例健康对照者位于Clock基因(rs2070062)和Per2基因(rs2304672、rs2304669、rs934945)的4个位点的基因多态性,采用非条件Logistic回归模型分析不同基因型或等位基因与乳腺癌发病风险的关系.结果 携带rs2304669-TT基因型者发生乳腺癌的风险是携带rs2304669-CC+CT基因型者的2.33倍(P=0.001).单体型分析的结果也显示,所有含有rs2304669-T等位基因的单体型均可增加乳腺癌的发病风险.而另外3个位点未发现与乳腺癌的发病相关.结论 位于Per2基因上的rs2304669位点可能与乳腺癌的发病风险相关;生物节律调控关键基因Per2的遗传变异会增加乳腺癌的发病风险,可能可以作为乳腺癌易感性的重要分子生物标志物.
-
节律基因Period2对肿瘤细胞生长及放射敏感性的影响
目的 探讨Period2(Per2)基因对细胞生长及放射敏感性的影响. 方法 体外培养C6神经胶质瘤细胞(C6 glioma cells),使用脂质体包裹法将Per2表达质粒(pcDNA 3.1-Per2)转导入C6细胞内;以免疫组化及流式细胞术检测Per2表达;通过流式细胞术和克隆形成试验检测稳定转染Per2阳性表达的C6细胞在正常情况下和γ射线照射后的凋亡、生长. 结果 未经γ射线照射的Per2阳性表达的C6细胞较对照组细胞增殖减慢、凋亡率增加,但γ射线照射后的较对照组细胞增殖速度快、凋亡率减少. 结论 节律基因Per2过表达会增加肿瘤细胞的凋亡,但在射线照射情况下会降低肿瘤细胞对射线的敏感性.
-
近日节律基因Period2对紫外线损伤NIH3T3细胞的影响
目的 探讨Period2(Per2)基因对紫外线损伤NIH3T3细胞的影响.方法 将Per2基因插入pcDNA 3.1,构建Per2基因的真核表达质粒,采用脂质体包裹法转导入NIH3T3细胞内.以紫外灯照射Per2基因过表达(pcDNA 3.1-Per2)的NIH3T3细胞、pcDNA 3.1空白组(pcDNA 3.1-vector)细胞和空白对照组细胞;通过流式细胞术和克隆形成试验检测稳定转染Per2阳性表达的NIH3T3细胞的凋亡、生长情况;采用单细胞凝胶电泳技术检测Per2过表达对DNA损伤后修复的影响.结果 紫外线照射后Per2阳性表达的NIH3T3细胞较其对照组细胞增殖速度快、凋亡率减少,单细胞凝胶电泳实验表明紫外线照射后,各组细胞均表现出明显的DNA损伤,但是pcDNA 3.1-Per2转染组均较pcDNA 3.1-vector及空白对照组细胞的彗星细胞出现率和拖尾细胞DNA迁移长度低.结论 节律基因Per2能抑制紫外线对细胞的损伤,其机制可能与Per2促进DNA修复作用有关.
-
Per1与Per2基因在胆管癌中的表达
目的：分析人类生物钟基因Per1与Per2在人类胆管癌中的表达，研究其表达与人类胆管癌的关系。方法获取人原发胆管癌标本58份，另取距离肿瘤边缘2 cm外组织作为正常对照。采用免疫组织化学方法检测人原发胆管癌标本与正常对照组织中Per1与Per2基因蛋白产物（ Per1、Per2蛋白）的表达。结果58份人原发胆管癌标本与正常对照组织中均见Per 1与Per2蛋白表达，但胆管癌标本中Per1与Per2蛋白的表达较正常对照组织明显下降（ P＜0.05）。结论生物钟基因Per1与Per2蛋白可能与人类胆管癌的发生及发展有关。
-
新生大鼠脑损伤后松果体Clock mRNA、Per2 mRNA表达和血浆褪黑素水平变化
目的 比较缺氧缺血性脑损伤(HIBD)模型组与对照组的新生大鼠松果体中Clock mRNA和Per2mNRA表达与血浆褪黑素(MLT)的变化.方法 7日龄新生Sprague-Dawley大鼠,随机分为2组(每组36只).HIBD模型组按改良Levine法建立.用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和放免技术分别测定并比较缺氧缺血后O、2、12、24、36、48 h松果体中Clock mRNA和Per2 mRNA的相对表达量和血浆MLT水平.结果 HIBD组和对照组Clock mRNA表达量差异均无统计学意义(P＞0.05);Per2 mRNA的表达在HIBD后24h开始下降,在36h和48h显著低于对照组(P＜0.01);HIBD导致外周血MLT水平12h开始下降,24h降至谷底,48h恢复.结论 钟基因Clock mRNA和下降的Per2 mRNA表达以及血浆MLT可能在缺氧缺血性脑损伤的发生发展中起重要的作用.
-
湖南地区汉族人群Per2基因多态性与睡眠癫痫的相关性研究
目的 探讨Per2C111G基因多态性与中国湖南地区汉族人群睡眠癫痫的关系.方法 选取湖南地区汉族癫痫患者300例及健康对照组100例,癫痫患者按好发时间分为觉醒癫痫组、不定期癫痫组、睡眠癫痫组.采用聚合酶链反应(PCR)和基因测序方法检测Per2基因C111G位点的多态性.结果 湖南地区汉族人群中,Per2基因C111G多态位点的基因型频率分别为:CC型87.0％、CG型13.0％、GG型0.0％,等位基因C和G频率分别为93.5％和6.5％.癫痫组和对照组间基因型及等位基因型频率差异无统计学意义(P＞0.05).3个癫痫亚组间基因型及等位基因型频率差异亦无统计学意义(P＞0.05).结论 Per2基因C111G位点多态性可能与湖南地区汉族人群睡眠癫痫无关.
-
大鼠PER2基因RNAi慢病毒载体的构建及干扰效率的测定
目的 构建及筛选有效干扰大鼠血管平滑肌细胞PER2基因的shRNA慢病毒载体,并测定其干扰效率.方法 设计大鼠PER2的siRNA靶序列,插入慢病毒载体质粒pGLV-U6-EGFP中,构建pLentivirus-per2-rat表达重组体并转染至A7r5大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞内,利用Real-time PCR方法检测PER2基因的mRNA表达水平,筛选有效沉默钟基因PER2表达的RNAi慢病毒载体.结果 经电泳、基因测序证实插入的目的序列正确,有PER2表达,成功构建了pLentivirus-per2-rat表达重组体;转染慢病毒载体pLentivirus-per2-rat至A7r5大鼠胸血管平滑肌细胞,测定转染效率达70%;Real-time PCR检测PER2基因的mRNA相对表达量,筛选出有效干扰大鼠血管平滑肌细胞钟基因Per2表达的siRNA片段,使PER2 mRNA表达量下调约84%.结论 成功构建了大鼠PER2的RNAi慢病毒载体,为进一步研究时钟基因的功能奠定了基础.
