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八棱丝瓜蛋白-1对B16细胞的诱导分化作用
目的:测定八棱丝瓜蛋白-1对小鼠黑色素瘤B16细胞的诱导分化作用.方法:以MTT 法测定八棱丝瓜蛋白-1 对B16细胞的增殖抑制作用,以形态、黑色素含量及细胞周期变化为指标,观察八棱丝瓜蛋白-1诱导B16细胞分化的作用.结果:八棱丝瓜蛋白-1 对B16 细胞增殖具有明显的抑制作用,呈剂量依赖性和时间依赖性,LF-1对B16细胞作用48和72 h的IC50分别为33.29和10.28 g/L,并阻止B16细胞由G1期向S期过渡从而停滞于G1期;细胞形态向正常上皮样细胞分化,生长缓慢,平铺不重叠,甚至形成网状结构,胞质内细胞器丰富,可见较多不同成熟期(Ⅰ～Ⅳ期)的黑色素小体;黑色素含量显著增加,2.5、5、10和20 mg/L浓度的LF-1处理组的黑色素含量分别为对照组的2.1、4.4、5.9和7.8倍.结论:八棱丝瓜蛋白-1对B16细胞具有明显的诱导分化作用.
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植物蛋白MAP30体外抗HIV-1的实验研究
体外观察苦瓜子抗HIV植物蛋白30(MAP30)以及齐多夫足(AZT)、阿昔洛韦(ACV)、干扰素-α2a(IFN-α2a)抗HIV-1的作用.以MT4为靶细胞,采用ELISA法测定药物对细胞培养上清HIV-1 P24抗原的抑制作用,并观察药物对HIV-1致细胞病变效应的抑制效果.结果显示, MAP30具有明显的抗HIV-1作用,与一线抗HIV药物AZT作用相近,二者对HIV-1 P24抗原的50%抑制浓度(IC50)分别为0.9μmol/L和0.7μmol/L,它们对HIV-1的致细胞病变效应也有抑制作用.ACV及IFN-α2a在所取浓度范围内对HIV-1无抑制作用.证实植物蛋白MAP30具有体外抑制HIV-1的作用.
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不同植物蛋白质对生长期大鼠脂代谢的影响
目的:以酪蛋白为对照,观察大豆蛋白、花生蛋白、麦绿素(叶蛋白)三种植物蛋白质对生长期大鼠脂代谢的影响.方法:36只雄性SD大鼠随机分为4组,分别饲喂含20%酪蛋白、20%大豆蛋白、20%花生蛋白和14%酪蛋白加6%麦绿素的人工半合成饲料,5周后测定其肝脏和血清的总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的浓度.结果:四组大鼠血清TC水平无显著差异(P>0.05),除花生蛋白组TG水平显著低于对照组外,其它各组TG水平无显著差异;大豆蛋白组血清HDL-C和LDL-C水平与对照组相当,而花生蛋白组和麦绿素添加组血清HDL-C均显著高于对照组和大豆蛋白组(P<0.01),而其LDL-C水平显著低于对照组;与对照组相比,花生蛋白组和大豆蛋白组肝脏TG水平显著降低(P分别为<0.05和<0.01),麦绿素添加组TC水平显著升高(P<0.01);花生蛋白组的肝脏LDL-C水平显著降低(P<0.05).结论:大豆蛋白和花生蛋白均能降低实验大鼠肝脏TG水平,花生蛋白还能显著降低大鼠血清TG、LDL-C及肝脏LDL-C水平,提高血清HDL-C水平.
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郑氏植物蛋白在浸润性乳腺癌中的表达
目的 检测郑氏植物蛋白(Zheng's plant protein segment,ZPP)在正常乳腺组织及浸润性乳腺癌中的表达.分析其在乳腺癌诊断及判定预后中的重要作用.方法 应用免疫组织化学SP法,检测ZPP在正常乳腺组织和浸润性乳腺癌中的表达,以及与雌激素受体(estrogen receptor,ER)、孕激素受体(progesterone receptor,PR)、人表皮生长因子受体2(c-erbB-2)和E-钙黏附素(E-cadherin)的表达情况对比分析.结果 正常乳腺组织23例中,ZPP呈阳性表达8例,阳性率31.78%.乳腺浸润癌93例中,ZPP呈阳性表达81例.阳性率87.10%,二者差异有统计学意义(P<0.01).ZPP片段的表达与淋巴结转移密切相关(P<0.05),其在浸润性癌的阳性表达与ER、PR及E-cadherin的表达呈明显的正相关(P<0.01),与c-erbB-2表达呈明显负相关(P<0.01).结论 标记ZPP对乳腺癌的诊断及判定淋巴结转移具有较大价值,与雌,孕激素等指标的协同关系对于预后判定发挥着较大作用.
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商陆抗病毒蛋白在急性人乙型肝炎病毒感染小鼠体内的抑制作用
目的 探讨商陆抗病毒蛋白(PAP)在急性HBV感染小鼠模型体内抗HBV的效果.方法 通过尾静脉注射具有复制能力的HBV真核表达质粒来建立小鼠急性HBV感染模型.根据注射后第1天小鼠血清HBsAg和HBeAg水平,从35只小鼠中选出24只进行配对,分为PAP治疗组(腹腔注射0.25 mg/kg PAP)和对照组.于PAP注射前、注射后第1、3、5、7天,时间分辨免疫荧光分析法检测小鼠血清HBsAg、HBeAg和抗-HBc水平,荧光定量PCR检测小鼠血清HBV DNA水平.注射后第7天HE染色检测肝组织病理变化,免疫组织化学检测肝组织HBsAg、HBeAg表达.采用配对t检验进行统计学分析.结果 与对照组相比,在PAP腹腔注射后第1、3、5天对HBsAg的抑制率分别为23%(t=116.3,P<0.05)、47%(t=38.2,P<0.05)、68%(t=23.7,P<0.05),对HBeAg的抑制率分别为36%(t=34.2,P<0.05)、55%(t=61.6,P<0.05)、83%(t=98.8,P<0.05),对HBV DNA的抑制率分别为70.7%(t=6.6,P<0.05)、86.9%(t=5.9,P<0.05)、95.2%(t=36.6,P<0.05)、95.3%(t=19.7,P<0.05).结论 0.25 mg/kg剂量的PAP在急性HBV感染小鼠模型体内对血清和肝组织的HBsAg、HBeAg的表达及HBV DNA的复制均有明显的抑制效果.
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苦瓜核糖体失活蛋白MAP30的原核表达和生物活性研究
目的:从苦瓜籽中克隆HIV-1整合酶抑制剂MAP30,构建其表达载体,并在大肠杆菌中进行表达,用于MAP30在细胞内的转运机理研究.方法:从成熟苦瓜种子中提取基因组DNA,通过PCR的方法扩增出MAP30基因的全长,并将其克隆进入原核表达载体pET-30a,转化Eoli.BL21(DE3),IPTG诱导表达,Ni-NTA亲和纯化,梯度咪唑洗脱.MTT法分析生物学活性.结果:测序发现插入的MAP30基因序列正确,SDS-PAGE鉴定表达产物分子量正确,且MAP30主要以可溶形式表达.MTT法测定重组的MAP30具有生物学活性,且对肿瘤细胞的毒性远远大于对正常细胞的毒性.结论:本研究成功地构建了MAP30的表达系统,并实现了MAP30的可溶性表达,表达后的蛋白具有生物学活性,可用于抗体-毒素的肿瘤靶向药物的合成.
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大豆蛋白对胆固醇作用的研究进展
大量文献表明,大豆蛋白可以降低实验动物和人血液中胆固醇的含量,但其机理尚不完全清楚.为此,本文从胆固醇吸收、代谢、排泄及其对内分泌的影响等几方面详细地综述了膳食中大豆蛋白对胆固醇代谢的影响,并对其可能的作用机理加以阐述.
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掌叶半夏蛋白对肺癌细胞增殖的影响研究
目的 观察掌叶半夏蛋白对肺癌细胞增殖的抑制作用.方法 将体外培养的对数生长期的人肺癌细胞株A549随机分为空白对照组、掌叶半夏蛋白组(1.25、5.00、10.00μg/mL)、阳性对照组(5.00μg/mL顺铂).利用四甲基偶氮唑蓝比色法测定各组细胞增殖相对抑制率;用流式细胞仪检测各组细胞周期;采用Western blotting测定B细胞淋巴瘤因子相关X蛋白(Bax)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)含量.结果 作用24 h后,掌叶半夏蛋白组与阳性对照组吸光度(OD)值均显著低于空白对照组,差异均有统计学意义(P<0.05),且掌叶半夏蛋白组呈剂量依赖性;与空白对照组比较,掌叶半夏蛋白组与阳性对照组在G0～G1期人肺癌细胞株A549细胞明显增多,而S期人肺癌细胞株A549细胞明显减少,差异均有统计学意义(P<0.05),且掌叶半夏蛋白组呈剂量依赖性;掌叶半夏蛋白组与阳性对照组人肺癌细胞株A549细胞中Bax表达水平均显著高于空白对照组,而Bcl-2、Caspase-3表达水平及Bcl-2/Bax显著低于空白对照组,差异均有统计学意义(P<0.05),且掌叶半夏蛋白组呈剂量依赖性.结论 掌叶半夏蛋白可调节人肺癌细胞株A549抗凋亡/促凋亡因子(Bcl-2/Bax)平衡,从而起到抑制细胞增殖的作用,且呈剂量依赖性.
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OsLEA5蛋白对乳酸脱氢酶体外保护机制的研究
目的：确定胚胎发育晚期丰富蛋白（LEA蛋白）在体外不同压力胁迫下对酶活性的保护作用，并对其可能机制进行探讨。方法评估OsLEA5蛋白对于防止乳酸脱氢酶（LDH）免受高温（43℃）、反复冻融和干燥脱水伤害的保护能力。磷酸盐缓冲液、牛血清蛋白（BSA）和纯水分别用于阳性和阴性对照。结果 OsLEA5蛋白组相对活性百分比在热处理10、20、30 min后分别是纯水对照组的2.2、3.7、5.4倍。在5个反复冻融循环后，纯水对照组的LDH活性降至7%甚至更低，而质量比2∶1和5∶1的OsLEA5蛋白组分别为28%和69%，质量比为10∶1组其活性几乎未受到影响。经过干燥处理后，不同质量比组LDH活性均有明显降低，其中纯水对照组和磷酸盐缓冲液组的LDH接近完全失活。质量比为5∶1和10∶1的OsLEA5蛋白组相对活性分别达24%和36%。结论 OsLEA5蛋白能够在各种环境胁迫下有效保护底物酶的体外活性或防止失活。
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复合植物奶的营养学评价
目的:对自制的复合植物奶进行营养成分分析和评价.方法:用氨基酸分析仪、原子吸收分光光度仪和气相色谱仪及经典的化学成分分析法对复合植物奶中氨基酸,矿物质、微量元素、脂肪酸、蛋白质和脂肪的组成和含量进行测定并进行营养评价.结果:共测出19种氨基酸,8种脂肪酸(其中亚油酸占总量的46.7%),2种宏量元素和五种微量元素.蛋白质与脂肪的含量分别为30。
