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血小板源性生长因子-D影响前列腺癌细胞迁移及相关机制的研究
目的 研究血小板源性生长因子-D(platelet-derived growth factor-D,PDGF-D)对前列腺癌细胞迁移的影响及其作用机制. 方法 蛋白质印迹法检测前列腺癌LNCaP、PC-3细胞中PDGF-D的表达.针对PDGF-D基因的mRNA序列合成siRNA,脂质体转染法转染PC-3细胞；外源性PDGF-D作用LNCaP、PC-3细胞.Boyden槽迁移法分析外源性PDGF-D及siRNA转染对前列腺癌LNCaP、PC-3细胞迁移的影响,RT-PCR法检测血管内发生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)及基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMPO)mRNA表达水平的变化. 结果 LNCaP和PC-3细胞中PDGF-D蛋白的表达分别为29.47±1.68和63.43±2.10,两者比较差异有统计学意义(P＜0.05)；PC-3细胞转染PDCF-D siRNA后,siRNA阴性组蛋白表达水平为65.03±2.31,siRNA阳性组为35.19±1.51,两组比较差异有统计学意义(P＜0.05).外源性PDGF-D可以促进LNCaP和PC-3细胞的迁移,并刺激PC-3细胞VEGF、MMP-9 mRNA表达水平升高,与对照组比较,差异均有统计学意义(P ＜0.05)；PDGF-D siRNA转染PC-3细胞后,细胞迁移率下降,VEGF、MMP-9 mRNA的表达水平由转染前的0.72±0.09、0.65±0.07下降为0.43±0.18、0.22±0.08,差异有统计学意义(P＜0.05). 结论 PDCF-D能促进前列腺癌的转移和血管的形成.
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福辛普利对IgA肾病患者PDGF-D表达的作用
目的 研究血小板源性生长因子(PDGF-D)在IgA肾病患者肾小球中的表达及福辛普利对PDGF-D的作用.方法 32例经肾活检证实为IgA肾病的患者,服用福辛普利9个月后重复肾活检.应用酶联免疫吸附(ELISA)和免疫组化法检测PDGF-D在治疗前后肾组织、血液及尿液中的表达.同时检测治疗前后24 h尿蛋白定量、血浆白蛋白(ALB)及血尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)水平.结果 IgA肾病患者肾组织PDGF-D有较高的表达,同时患者血、尿中PDGF-D的水平也较高.经过福辛普利治疗后,PDGF-D在肾组织中的表达下降(P<0.01),同时血、尿中的浓度也减少.治疗前后24h尿蛋白定量、血浆白蛋白(ALB)及血尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)水平没有显著的变化.结论 福辛普利能显著抑制IgA肾病患者肾脏PDGF-D表达.
关键词： 福辛普利 IgA肾病 血小板源性生长因子-D -
血小板源性生长因子-D基因多态性与大肠癌遗传易感性关系的研究
目的 探讨血小板源性生长因子-D(PDGF-D)基因多态性与大肠癌发病的关系.方法 选择88例大肠癌组织和50例正常大肠组织为研究对象,应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术进行检测PDGF-D-858A/C和+ 3166C/G位点的基因型.结果 PDGF-D基因-858A/C位点多态性在大肠癌组和正常组的分布差异无统计学意义(P＞0.05),而PDGF-D基因+3166C/G多态性在两组人群中的分布差异有统计学意义(P＜0.05),通过Logistic回归分析发现PDGF-D基因+3166C/G位点中,携带G等位基因的基因型(CG +GG)可增加总体大肠癌发病风险,未发现-858A/C位点与大肠癌的发生显著相关.PDGF-D基因-858A/C和+3166C/G两个位点之间存在连锁不平衡.利用这2个位点构建单体型,发现单体型CG在大肠癌组中的频率显著高于对照组中的频率(OR=3.2,95％ CI:1.3 ～8.3,P＜0.05).结论 PDGF-D+3166C/G位点基因多态性与大肠癌发病有关,其中+3166 G等位基因可能是大肠癌的遗传易感基因,PDGF-D基因CG单体型是大肠癌发病的危险因素.
关键词： 血小板源性生长因子-D 基因多态性 单体型 大肠癌 -
Hedgehog信号通路对人胃癌SGC-7901细胞体外血管形成的调控
目的 探讨Hedgehog信号通路调控人胃癌SGC-7901细胞体外血管形成的可能分子机制.方法 常规培养SGC-7901细胞和人脐静脉内皮细胞(Human umbilical vein endothelial cell,HUVEC),将SGC-7901细胞分为对照组A(未给药)、实验组B(环靶明终浓度5 μmol/L)及实验组C(环靶明终浓度10 μmol/L),培养48 h后,免疫荧光检测各组胶质瘤相关癌基因1 (Glioma-associated oncogene homolog,Gli)和血小板源性生长因子-D(Platelet-derived growth factor D,PDGF-D)在胃癌SGC-7901细胞中的表达；通过小管形成试验和血管拟态试验检测细胞处理前后血管形成能力的变化；RT-PCR和Western blot检测细胞处理前后Gli1、PDGF-D的mRNA和蛋白表达变化,并对二者mRNA和蛋白表达水平进行相关性分析.结果 Gli1和PDGF-D在各组SGC-7901细胞中均有表达；实验组SGC-7901细胞的体外血管形成能力较对照组下降,且呈剂量依赖性,差异具有统计学意义(P＜0.05)；实验组Gli1和PDGF-D的mRNA和蛋白表达较对照组均受到显著抑制,差异有统计学意义(P＜0.05),且二者mRNA和蛋白表达水平呈正相关(r-0.829,r=0.786,P＜O.05).结论 Hedgehog信号通路可能通过Gli1来调控PDGF-D的表达,进而促进肿瘤血管的形成.
关键词： Hedgehog 胃癌 血管形成 血管生成拟态 血小板源性生长因子-D -
重度子痫前期患者血小板源性生长因子-D的研究
目的:探讨血小板源性生长因子(PDGF-D)与重度子痫前期发病的关系;通过比较早发型及晚发型重度子痫前期患者血清及胎盘组织中PDGF-D的表达,探讨其病因和发病机制的差异.方法:选择2009-01～2010-06在福建医科大学厦门第一医院妇产科住院剖宫产分娩的重度子痫前期患者40例,其中早发型11例、晚发型29例,同期选择20例孕妇作为对照组,采用酶联免疫吸附实验(ELISA)法测各组外周血血清中PDGF-D的浓度,采用实时定量PCR(Realtime PCR)测定各组胎盘组织PDGF-D mRNA表达水平.结果:重度子痫前期组孕妇血清PDGF-D的浓度,早发型组:571.59±67.35pg/mL,晚发型组:573.92±51.24 pg/mL,高于正常妊娠组(509.63±49.99 pg/mL),差异有统计学意义(P<0.05);胎盘PDGF-D mRNA的表达量,早发型组:2.72±1.60,晚发型组:2.77±1.57,高于正常妊娠组(1.93±0.82),差异有统计学意义(P<0.05);重度子痫前期患者血清及胎盘组织PDGF-D表达水平呈正相关(r=0.328,p<0.05);早发型重度子痫前期和晚发型重度子痫前期其血清PDGF-D浓度及胎盘组织PDGF-D表达量相比,差异均无统计学意义(P>0.05).结论:外周血血清及胎盘组织中升高的PDGF-D可能与重度子痫前期的发病有关,可能参与了重度子痫前期的病理生理过程;PDGF-D在早发型和晚发型重度子痫前期的表达差异无显著性,提示两者的发病机制可能存在共同之处.
关键词： 血小板源性生长因子-D 子痫前期 早发型重度子痫前期 胎盘 动脉粥样硬化 -
黄三角地区人群中PDGF-D基因多态性与冠心病的相关性
目的 探讨黄河三角洲地区人群中血小板源性生长因子-D(PDGF-D)(rs3809021和rs7950273位点)基因多态性与冠心病遗传易感性之间的关系.方法 冠心病组158例,均经冠状动脉造影(CAG)确诊;对照组120例,均经CAG或冠状动脉CTA排除.两组均对PDGF-D rs3809021及rs7950273位点进行基因型检测,应用的检测方法是聚合酶链反应-限制性片段长度多态性和测序法.并根据冠状动脉造影结果采用冠状动脉病变支数和Gensini评分来评估冠状动脉病变严重程度.结果 PDGF-D基因rs3809021位点多态性在冠心病组和对照组的分布差异无统计学意义(P＞0.05),而PDGF-D基因rs7950273位点多态性在两组人群中的分布差异有统计学意义(P＜0.05),冠心病组rs7950273位点不同基因型的冠状动脉病变严重程度差异无统计学意义(P＞0.05).结论 PDGF-D rs7950273等位基因可能是冠心病的遗传易感基因,其基因多态性与冠心病发病有关,但与冠心病严重程度无关.
关键词： 血小板源性生长因子-D 基因多态性 冠心病 -
DIM对胃癌细胞SGC-7901体外增殖与侵袭的抑制作用
目的 探讨3,3-二吲哚基甲烷(3,3-Diindolylmethane,DIM)对胃癌细胞SGC-7901增殖和侵袭的抑制作用.方法 用MTT法检测不同浓度(0、10、20、40、80 μmol/L) DIM对胃癌细胞SGC-7901生长抑制情况;Transwell小室检测40 μmol/L的DIM对胃癌SGC-7901细胞侵袭力的影响,Western blot检测胃癌细胞中血小板源性生长因子-D(PDGF-D)和β-catenin蛋白表达的变化,ELISA法检测培养液上清中MMP-2、MMP-9的浓度.结果 不同浓度的DIM对胃癌细胞SGC-7901均有抑制作用(P＜0.05),随着药物浓度增加,抑制作用增强;但40 μmol/L和80 μmol/L差异无统计学意义(P＞0.05).40μmol/L的DIM作用24 h后胃癌细胞SGC-7901侵袭力下降75.2％(125.4 ±10.8 vs 31.1 ±4.5,P＜0.05),PDGF-D和β-catenin的表达分别下降了55.8％和52.5％(P＜0.05),培养液上清中的MMP-2、MMP-9的浓度明显下降(23.5 ±2.6 vs 13.2 ±1.9;30.4 ±2.4 vs 15.8±2.1,P＜0.05).结论 DIM对胃癌细胞的增殖和侵袭有抑制作用,其机制可能与PDGF-D、β-catenin、MMP-2、MMP-9的表达下降有关.
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下调胃癌细胞PDGF-D表达对共培养HUVECs生长和功能的影响
目的:探讨通过RNA干扰下调血小板源性生长因子-D(PDGF-D)基因在胃癌SGC-7901细胞中的表达对与其共培养的脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)生长和功能的影响.方法:构建靶向PDGF-D的短发夹状RNA(shRNA)真核表达载体,转染胃癌SGC-7901细胞后,通过RT.PCR,Western Blot检测干扰前后PDGF-D的表达;用ELISA法检测培养液上清中血管内皮生长因子(VEGF)的含量;将胃癌细胞SGC-7901与HUVECs共培养后,细胞计数法检测细胞生长变化,流式细胞术测量细胞周期变化,血管形成实验检测HUVECs的血管形成能力.结果:PDGF-D-shRNA1,PDGF-D-shRNA2重组载体均能使SGC-7901细胞中PDGF-D基因在mRNA和蛋白水平上的表达明显下调(P<0.05),且后者抑制效果更好;干扰后胃癌细胞培养液上清中的VEGF下降;与转染后的SGE.7901细胞共培养的HUVECs牛长速度明显变慢,且无管状结构形成.结论:重组真核载体能有效抑制SGC-7901细胞的PDGF-D表达,并通过减少VEGF的表达来抑制HUVECs生长和血管形成能力.
关键词： 胃癌 血小板源性生长因子-D 血管内皮生长因子 脐静脉血管内皮细胞 RNA干扰
