DEHP体外对大鼠睾丸支持细胞Bax和Bcl-2基因表达的影响

目的:探讨邻苯二甲酸二乙基己酯(di-2-ethylhexyl phthalate,DEHP)体外对大鼠睾丸支持细胞Bax和Bcl-2基因表达及细胞凋亡的影响.方法:体外分离和原代培养大鼠睾丸支持细胞,不同浓度的DEHP(10、50、100nmol/L)作用于支持细胞24h,荧光定量PCR法检测Bax和Bcl-2基因mRNA表达,Weastern blot检测Bax和Bd-2蛋白表达,流式细胞术检测细胞凋亡率.结果:与对照组相比,DEHP各组支持细胞Bcl-2基因mRNA和蛋白表达下降(P＜0.05),Bax基因mRNA和蛋白表达增加(P＜0.05),细胞凋亡率增加(P＜0.05),呈浓度依赖关系.结论:DEHP可通过抑制Bcl-2基因表达和上调Bax基因表达而诱导大鼠睾丸支持细胞凋亡,进而影响支持细胞功能.

Survivin在不同卵巢组织中的表达及意义

Survivin是近年来发现的一种新的凋亡抑制因子, Survivin基因可能通过抑制卵巢癌细胞的调亡,在卵巢肿瘤的发生、发展中起一定作用,有可能成为预测卵巢癌的一个有用指标.

急性白血病患者BAG-1、Survivin表达及其临床意义

目的:研究凋亡相关蛋白BAG-1、Survivin在急性白血病患者骨髓白血病细胞中的表达及其临床意义.方法:SABC法检测初治急性白血病患者骨髓单个核细胞BAG-1、Survivin蛋白表达水平,并动态检测患者不同治疗阶段BAG-1、Survivin蛋白表达,与非恶性血液病患者比较.结果:初诊急性白血病患者调亡相关蛋白BAG-1、Survivin表达阳性率显著高于对照组,P＜0.05,差异有显著性；完全缓解组与未缓解组比较,P＜0.05,差异有显著性.结论:BAG-1、Survivin蛋白是影响急性白血病缓解的重要因素；检测BAG-1、Survivin蛋白对预判急性白血病能否缓解有重要临床意义.

NDRG1下调对吉西他滨干预人胰腺癌细胞 PANC －1增殖及凋亡的影响

目的：观察 siNDRG1干扰对吉西他滨干预的胰腺癌细胞增殖、细胞周期及凋亡的影响并探讨其机制。方法：以 Western blot 法对 PANC －1、BXPC －3、CAPAN －2、SW1990细胞中 NDRG1的表达进行检测；构建靶向 NDRG1的干扰质粒 siNDRG1，转染 PANC －1细胞，以 Western blot 法及（qRT）－PCR 法检测 NDRG1干扰效率；对 siRNA 干扰细胞给予吉西他滨干预，采用 MTT 法检测细胞增殖，PI 法检测细胞周期，流式细胞术检测细胞调亡。结果：Western blot 显示，NDRG1在四组细胞株中均有表达，低分化细胞（PANC －1）中表达量较中分化（BXPC －3）及高分化细胞株（CAPAN －2、SW1990）中高（P ＜0．05）；MTT 显示，吉西他滨干预后 PANC －1细胞在 siNDRG1转染组细胞生长抑制率高于 siNC 组，差异有显著性（P ＜0．01）。PI 法显示，转
　　染 siNDRG1的 PANC －1细胞停留在 G1期比例减少，G2及 S 期比例升高，与 siNC 组对比，差异具有显著性（t＝4．21，P ＜0．05；t ＝3．54，P ＜0．05；t ＝3．29，P ＜0．05）。经吉西他滨处理后，siNDRG1较 siNC 组 G1期及 G2期细胞比例明显减少，S 期细胞比例升高，差异具有显著性（t ＝14．65，P ＜0．01；t ＝13．28，P ＜0．01；t ＝15．17， P ＜0．01）。流式细胞仪检测经吉西他滨处理后 siNDRG1组凋亡率高于 siNC 组，差异有显著性（t ＝22．42，P＜0．001）。结论：对胰腺癌细胞 NDRG1表达进行下调可以增强吉西他滨化疗敏感性，抑制细胞增殖，促进凋亡，可作为胰腺癌治疗新的靶向候选基因。

莪术油对高糖下视网膜血管内皮细胞增殖及VEGF表达的影响

目的:研究不同浓度的莪术油对高糖条件下体外培养的人视网膜血管内皮细胞(human retinal capillary endothelial cells,HRCECs)增殖、调亡及血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达的影响.方法:体外培养从角膜移植术后新鲜人眼球提取的HRCECs.取生长良好的第 3～4代细胞用于实验,实验分为低糖对照组、高糖对照组、高糖+(60,80,100,120μg/mL) 不同浓度莪术油组,用噻唑蓝 (MTT)比色法检测HRCECs的增殖,通过免疫细胞化学法观察各分组HRCECs中VEGF的表达情况.结果:MTT比色法结果显示:高糖对照组与低糖对照组没有显著差异(P>0.05),用60,80,100,120μg/mL的莪术油处理高糖下HRCECs作用24h高糖+不同浓度莪术油组与高糖对照组相比具有显著性差异 (P<0.05),高糖+不同浓度莪术油组之间呈时间和浓度的显著性差异(P<0.05).免疫细胞化学检测显示:与低糖对照组相比,高糖对照组VEGF表达明显(P<0.05),用80,100,120μg/mL的莪术油处理高糖下HRCECs 24h,高糖+不同浓度莪术油组与高糖对照组相比VEGF表达有显著性差异(P<0.05),高糖+不同浓度莪术油组之间两两比较均具有显著性差异(P<0.05).结论:莪术油可抑制高糖下人视网膜血管内皮细胞增殖和VEGF表达.

中药脑心通对血管内皮细胞的保护作用

目的:研究脑心通对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)损伤血管内皮的保护作用及其分子机制.方法:在建立人脐静脉内皮细胞(HUVEC)ox-LDL(50 mg/L)损伤模型的基础上,以阿托伐他汀(1μmol/L)作为阳性对照,并给予0.2,0.4,0.6,0.8 g/kg不同剂量脑心通含药血清预先干预.采用硝酸还原酶法、放免法、分光光度计比色法、流式细胞技术等检测HUVEC NO,ET-1,LDH释放量,细胞内Caspase-3活性和早期凋亡率.结果:HUVEC损伤后,ox-LDL组(4.74±1.61)μmol/L与对照组(9.96±1.57)μmol/L相比较,NO的合成显著减少,而ET-1释放明显增加[(44.72±2.01)ng/L vs(21.42±2.84)ng/L,P＜0.01].与ox-LDL组(4.74±1.61)μmol/L相比较,ox-LDL+脑心通0.2,0.4,0.6,0.8 g/kg组[(8.33±1.78),(11.35±2.14),(14.80±2.40),(17.82±2.02)μmol/L,P＜0.05)]呈剂量依赖性,并可促进NO合成,但对ET-1释放无明显影响.而ox-LDL+阿托伐他汀组不仅可以促进NO合成,且能抑制ET-1释放(P＜0.01);ox-LDL可显著提高HUVEC的Caspase-3酶活性,促进LDH释放(P＜0.05),与ox-LDL组比较,ox-LDL+脑心通组对此呈剂量依赖性抑制作用[(193.00±16.81)μmoL/L vs(168.00±11.51),(135.00±11.18),(117.00±10.37),(99.00±9.62)μmol/L,P＜0.05],[(470.28±23.34)μmol/L vs 412.14±25.67),(311.37±28.34),(294.57±20.22),(276.49±25.32)μmol/L,P＜0.05],但阿托伐他汀对LDH释放无明显影响.脑心通、阿托伐他汀均能明显抑制ox-LDL诱导的内皮细胞凋亡(P＜0.01).结论:中药脑心通可促进内皮细胞NO释放,减轻内皮细胞的损伤与凋亡,是其保护血管内皮的可能机制.

丹参麦冬煎剂对过氧化氢所致血管内皮细胞凋亡保护机制的研究

目的 研究丹参与麦冬的水提浓缩液1部位(MD-1)对过氧化氢H2O2损伤人脐静脉血管内皮细胞株HUVEC凋亡的保护作用及机制.方法 体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC),以H2O2行内皮细胞凋亡造模后,再加入不同浓度的MD-1作用24 h.用MTT法检测细胞生长活力,流式细胞仪检测凋亡率,Western Blot检测抗凋亡Bcl-2蛋白含量变化.结果 H2O2造模后,细胞增殖明显受抑,流式细胞检测出明显凋亡峰,Bel-2的表达量有明显的下降,而加药组的Bcl-2表达量一定程度回升与正常组相比P<0.01,具有明显的统计学意义.结论 丹参与麦冬的丹参与麦冬的水提浓缩液MD-1保护内皮细胞,抗内皮细胞凋亡.

缺氧/复氧对培养的大鼠海马神经元Fos、Jun表达和神经元调亡的影响